RESUMO
O emprego da criopreservação espermática na reprodução equina representou um grande avanço para o desenvolvimento da espécie. Entretanto a utilização de biotecnicas como a refrigeração e congelação espermática imprime sobre as células danos físicos e químicos que resultam em elevação nos níveis de espécies reativas do oxigênio (EROs), estresse oxidativo e injúrias irreversíveis aos espermatozoides. Visando amenizar as consequências do estresse oxidativo, diversas substancias com propriedades antioxidantes são adicionadas aos meios diluidores durante a criopreservação, apesar disto, na maioria das vezes o mecanismo de ação desencadeado por estes antioxidantes não é bem esclarecido. Diante disto, objetivou-se com o presente estudo referenciar os principais agentes antioxidantes utilizados na criopreservação de garanhões e seus mecanismos de ação.
The use of sperm cryopreservation in equine reproduction represented a major breakthrough for the development of the species. However the use of biotechnologies such as refrigeration and freezing sperm prints on the physical and chemical damage cells that result in increased levels of reactive oxygen species (ROS), oxidative stress and irreversible injury to sperm. Aiming to mitigate the consequences of oxidative stress, different substances with antioxidant properties are added to extenders for cryopreservation, despite this, most of the time the mechanism of action triggered by these antioxidants is not well understood. In view of this, the aim with this study reference the main antioxidants used in cryopreservation stallions and their mechanisms of action.
El uso de la criopreservación de espermatozoides en reproducción equina representa un avance importante para el desarrollo de la especie. Sin embargo, el uso de las biotecnologías, como la refrigeración y congelación de esperma impresiones sobre las células de daños físicos y químicos que resultan en un aumento de los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS), estrés oxidativo y el daño irreversible a los espermatozoides. Con el objetivo de mitigar las consecuencias del estrés oxidativo, se añaden diferentes sustancias con propiedades antioxidantes de diluyentes para la criopreservación, a pesar de esto, la mayoría de las veces el mecanismo de acción provocada por estos antioxidantes no se entiende bien. En vista de esto, el objetivo de este estudio de referencia los principales antioxidantes utilizados en los sementales de criopreservación y sus mecanismos de acción.
Assuntos
Masculino , Animais , Antioxidantes/análise , Cavalos , Criopreservação/veterinária , Preservação do Sêmen/métodos , Preservação do Sêmen/veterinária , Radicais Livres , Estresse OxidativoRESUMO
O emprego da criopreservação espermática na reprodução equina representou um grande avanço para o desenvolvimento da espécie. Entretanto a utilização de biotecnicas como a refrigeração e congelação espermática imprime sobre as células danos físicos e químicos que resultam em elevação nos níveis de espécies reativas do oxigênio (EROs), estresse oxidativo e injúrias irreversíveis aos espermatozoides. Visando amenizar as consequências do estresse oxidativo, diversas substancias com propriedades antioxidantes são adicionadas aos meios diluidores durante a criopreservação, apesar disto, na maioria das vezes o mecanismo de ação desencadeado por estes antioxidantes não é bem esclarecido. Diante disto, objetivou-se com o presente estudo referenciar os principais agentes antioxidantes utilizados na criopreservação de garanhões e seus mecanismos de ação.(AU)
The use of sperm cryopreservation in equine reproduction represented a major breakthrough for the development of the species. However the use of biotechnologies such as refrigeration and freezing sperm prints on the physical and chemical damage cells that result in increased levels of reactive oxygen species (ROS), oxidative stress and irreversible injury to sperm. Aiming to mitigate the consequences of oxidative stress, different substances with antioxidant properties are added to extenders for cryopreservation, despite this, most of the time the mechanism of action triggered by these antioxidants is not well understood. In view of this, the aim with this study reference the main antioxidants used in cryopreservation stallions and their mechanisms of action.(AU)
El uso de la criopreservación de espermatozoides en reproducción equina representa un avance importante para el desarrollo de la especie. Sin embargo, el uso de las biotecnologías, como la refrigeración y congelación de esperma impresiones sobre las células de daños físicos y químicos que resultan en un aumento de los niveles de especies reactivas de oxígeno (ROS), estrés oxidativo y el daño irreversible a los espermatozoides. Con el objetivo de mitigar las consecuencias del estrés oxidativo, se añaden diferentes sustancias con propiedades antioxidantes de diluyentes para la criopreservación, a pesar de esto, la mayoría de las veces el mecanismo de acción provocada por estos antioxidantes no se entiende bien. En vista de esto, el objetivo de este estudio de referencia los principales antioxidantes utilizados en los sementales de criopreservación y sus mecanismos de acción.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Cavalos , Criopreservação/veterinária , Preservação do Sêmen/métodos , Preservação do Sêmen/veterinária , Antioxidantes/análise , Radicais Livres , Estresse OxidativoRESUMO
Resumo: Este artigo discute os principais aspectos do uso de protocolos hormonais baseados na aplicação de estrógeno seguido de progestágenos em receptoras anovulatórias o acíclicas, seja em anestro ou transição nos protocolos de transferência de embriões. A maioria das éguas apresentam comportamento poliéstrico estacional, com o que manifestam estro e ciclos ovulatórios nos períodos de maior luminosidade diária. O ciclo reprodutivo anual das éguas é caracterizado pela presença de quatro fases definidas pela dinâmica folicular: de anestro, de transição de primavera, ovulatória e de transição de outono. Durante as fases de transição e anestro, a incidência das ovulações diminui ou é nula, ou que dificulta a sincronização das ovulações entre doadoras e receptoras durante a preparação para a transferência de embriões. Alguns estudos mostram que as receptoras anovulatórias/acíclicas mantidas com protocolos com base em esteroides apresentam mudanças uterinas similares às que acontecem nas éguas gestantes. Contudo, não há pesquisas suficientes que permitam esclarecer o melhor protocolo de esteroides, no que se refere à dose, tempos de tratamento e vias de administração.
Abstract: This article discusses the main aspects of using hormonal protocols based on the application of estrogen followed by progestogen in anovulatory or acyclic recipients, either in anestrous or transition in embryo transfer protocols. Most mares demonstrate seasonally polyestrous behavior, by which they manifest estrus and ovulatory cycles during periods of higher daily luminosity. The annual reproductive cycle of mares is characterized by the presence of four phases defined by follicular dynamics: anestrous, spring transition, ovulatory, and autumn transition. During the phases of transition and anestrous, the incidence of ovulations decreases or is zero, making it difficult to synchronize ovulations between donors and recipients in preparation for embryo transfer. Some studies have shown that anovulatory/acyclic recipient mares managed with steroid-based protocols have similar uterine changes to those observed in pregnant mares. However, there is no sufficient research to allow to clarify the best steroid protocol with respect to dose, treatment times, and routes of administration.
Resumen: Este artículo discute los principales aspectos del uso de protocolos hormonales basados en la aplicación de estrógeno seguido de progestágeno en receptoras anovulatorias o acíclicas, sea en anestro o transición en los protocolos de transferencia de embriones. La mayoría de las yeguas presentan comportamiento poliéstrico estacional, con lo que manifiestan estro y ciclos ovulatorios en los periodos de mayor luminosidad diaria. El ciclo reproductivo anual de las yeguas es caracterizado por la presencia de cuatro fases definidas por la dinámica folicular: de anestro, de transición de primavera, ovulatoria y de transición de otoño. Durante las fases de transición y anestro, la incidencia de las ovulaciones disminuye o es nula, lo que dificulta la sincronización de las ovulaciones entre donadoras y receptoras durante la preparación para la transferencia de embriones. Algunos estudios han mostrado que las receptoras anovulatorias/acíclicas mantenidas con protocolos con base en esteroides presentan cambios uterinos similares a los que pasan en las yeguas gestantes. Sin embargo, no hay investigaciones suficientes que permitan aclarar el mejor protocolo de esteroides, con respecto a dosis, tiempos de tratamiento y vías de administración.
RESUMO
cooling device to stabilize equine straws before freezing. The samples were diluted in Botu-Sêmen® extender and centrifuged at 600xg for 10 minutes. Then, the pellets were ressuspended with Botucrio® cryopreservation extender, loaded into 0.5 mL straws and divided into three groups. On Group M, straws were placed horizontally in a Minitub® refrigerator at 5 C for 20 minutes. For groups B and E, the straws were placed in Botutainer® and Equitainer® devices, respectively. Both systems were previously stabilized at 5 C and straws were maintained for 20 minutes, and then frozen. The straws were thawed at 46 C for 20 seconds. Sperm samples were evaluated by CASA for Total Motility (TM) and Progressive Motility (PM) and by fluorescent microscopy for Plasma Membrane Integrity (MPI). Statistical differences were not observed (p>0.05) for Total Motility (GM=67.1%; GB=65.2% and GE= 63.4%) and Progressive Motility (GM=32.1%; GB=31.9% and GE=30.4%). Although MPI percentages were not different between groups M and B, group E showed a decrease in comparison to the other groups (GM=49.4%, GB= 48.7%, GE= 44.9%). These results demonstrate that passive cooling devices can be used to stabilize equine straws before freezing, being an alternative for replacing refrigerators, making easier the cryopreservation in the field. KEYWORDS: Equine, semen, stabilization, cryopreservation.
Com este estudo objetivou-se analisar a eficiência da utilização de sistemas de transporte de sêmen refrigerado na estabilização das palhetas previamente à congelação de sêmen equino. Os ejaculados foram diluídos em meio diluente Botu-Sêmen®, e centrifugados por dez minutos a 600xg e; os pellets foram ressuspendidos no diluente para criopreservação Botucrio®, envasados em palhetas de 0,5 ml e divididos em três grupos. No Grupo M, as palhetas foram dispostas horizontalmente em geladeira Minitub®, a 5 C, por vinte minutos. Nos Grupos B e E, as palhetas foram colocadas respectivamente nos sistemas Botutainer® e Equitainer®, previamente equilibrados na temperatura interna de 5 C, e mantidas nesses sistemas também por vinte minutos. A congelação seguiu-se da mesma maneira para os três grupos. As palhetas foram descongeladas em banho-maria a 46 C, por vinte segundos, e analisadas quanto às motilidades total (MT) e progressiva (MP) (CASA) e integridade de membrana por microscopia de fluorescência (IMP). Não se observaram diferenças estatíscas (P>0,05) para os valores de MT (GM = 67,1%a; GB = 65,2%a e GE = 63,4%a) e MP (GM = 32,1%a; GB = 31,9%a e GE = 30,4%a). Para os valores de IMP não foram observadas diferenças estatísticas entre os Grupos M e B; no entanto, o Grupo E apresentou um valor significativamente inferior (P 0,05) em comparação com os demais (GM = 49,4%a, GB = 48,
RESUMO
cooling device to stabilize equine straws before freezing. The samples were diluted in Botu-Sêmen® extender and centrifuged at 600xg for 10 minutes. Then, the pellets were ressuspended with Botucrio® cryopreservation extender, loaded into 0.5 mL straws and divided into three groups. On Group M, straws were placed horizontally in a Minitub® refrigerator at 5 C for 20 minutes. For groups B and E, the straws were placed in Botutainer® and Equitainer® devices, respectively. Both systems were previously stabilized at 5 C and straws were maintained for 20 minutes, and then frozen. The straws were thawed at 46 C for 20 seconds. Sperm samples were evaluated by CASA for Total Motility (TM) and Progressive Motility (PM) and by fluorescent microscopy for Plasma Membrane Integrity (MPI). Statistical differences were not observed (p>0.05) for Total Motility (GM=67.1%; GB=65.2% and GE= 63.4%) and Progressive Motility (GM=32.1%; GB=31.9% and GE=30.4%). Although MPI percentages were not different between groups M and B, group E showed a decrease in comparison to the other groups (GM=49.4%, GB= 48.7%, GE= 44.9%). These results demonstrate that passive cooling devices can be used to stabilize equine straws before freezing, being an alternative for replacing refrigerators, making easier the cryopreservation in the field. KEYWORDS: Equine, semen, stabilization, cryopreservation.
Com este estudo objetivou-se analisar a eficiência da utilização de sistemas de transporte de sêmen refrigerado na estabilização das palhetas previamente à congelação de sêmen equino. Os ejaculados foram diluídos em meio diluente Botu-Sêmen®, e centrifugados por dez minutos a 600xg e; os pellets foram ressuspendidos no diluente para criopreservação Botucrio®, envasados em palhetas de 0,5 ml e divididos em três grupos. No Grupo M, as palhetas foram dispostas horizontalmente em geladeira Minitub®, a 5 C, por vinte minutos. Nos Grupos B e E, as palhetas foram colocadas respectivamente nos sistemas Botutainer® e Equitainer®, previamente equilibrados na temperatura interna de 5 C, e mantidas nesses sistemas também por vinte minutos. A congelação seguiu-se da mesma maneira para os três grupos. As palhetas foram descongeladas em banho-maria a 46 C, por vinte segundos, e analisadas quanto às motilidades total (MT) e progressiva (MP) (CASA) e integridade de membrana por microscopia de fluorescência (IMP). Não se observaram diferenças estatíscas (P>0,05) para os valores de MT (GM = 67,1%a; GB = 65,2%a e GE = 63,4%a) e MP (GM = 32,1%a; GB = 31,9%a e GE = 30,4%a). Para os valores de IMP não foram observadas diferenças estatísticas entre os Grupos M e B; no entanto, o Grupo E apresentou um valor significativamente inferior (P 0,05) em comparação com os demais (GM = 49,4%a, GB = 48,