RESUMO
The objective of this study was to determine the effect of fetal calf serum (FCS) on the quality of in vitro produced bovine embryos. Cumulus oocyte-complexes (COCs, n = 2 449) recovered by ovum pick-up from Bos taurus indicus donors were randomly assigned to experimental groups. Sperm selected by Percoll gradient was used for in vitro fertilization (insemination = Day 0). In Experiment 1 (n = 1 745 COCs), zygotes were cultured in vitro in Synthetic Oviduct Fluid + 4 mg/mL of bovine serum albumin (BSA), or BSA + 2% FCS (BSA+FCS). In Experiment 2 (n = 704 COCs), the COCs were cultured in SOF + BSA, BSA + 2% FCS, or BSA + 2% FCS on D4 (BSA + FCSD4). In Experiment 1, blastocyst yield (51%) and Quality I blastocysts (41%) at Day 7 were higher (P < 0.05) in the BSA + FCS treatment than in BSA (42 and 30%, respectively). In Experiment 2, blastocyst yield was higher (P < 0.05) in the BSA+FCS (47%) treatment. Quality I blastocyst yield was higher (P < 0.05) for BSA + FCS (34%) and BSA+FCSD4 (32%) compared to the BSA treatment (20%). A total of 820 embryos were transferred, with no significant differences among groups in pregnancy rates. In conclusion, in vitro culture in SOFaaci + BSA + FCS enhanced blastocyst yield and Quality I blastocysts; adding FCS to the culture medium increased the efficiency of IVP of bovine embryos.
Assuntos
Bovinos/embriologia , Desenvolvimento Embrionário , Fertilização in vitro/veterinária , Sangue Fetal/fisiologia , Animais , Blastocisto/fisiologia , Células Cultivadas , Meios de Cultura , Células do Cúmulo , Técnicas de Cultura Embrionária/veterinária , Transferência Embrionária/veterinária , Feminino , Masculino , Oócitos , Gravidez , Soroalbumina Bovina/administração & dosagemRESUMO
Resultados de 1390 ovulaçöes múltiplas seguidas de transferência de embriöes foram submetidas à análise multivariada para estudo da relaçäo entre algumas variáveis envolvidas no processo. As superovulaçöes foram realizadas no período de 1989 a 1999 em várias doadoras zebuínas das raças Brahman (31), Gir (22), Guzerá (68) e Nelore (411), provenientes de 61 rebanhos de diversas regiöes do Brasil. As doadoras tinham idades entre 1,5 e 19,5 anos. Analisaram-se apenas dados de primeira colheita e dados de colheitas consecutivas. As principais correlaçöes encontradas com a análise de ambos os arquivos pelo método de Pearson foram de: 0,72 entre o total de estruturas recuperadas (ER) e o número de embriöes viáveis (EV); 0,66 entre ER e o total de prenhezes positivas (PP); 0,53 entre ER e o número de corpos lúteos palpados (CL); 0,89 entre EV e PP; 0,33 entre EV e CL; e 0,30 entre PP e CL. Observou-se associaçäo entre coeficiente de endogamia, idade das doadoras à superovulaçäo, droga estimuladora, dose da droga estimuladora, ordem de colheita e número de inseminaçöes. Foram estimados os seguintes fatores nas análises de colheitas consecutivas: fator 1 - que reduz a resposta à superovulaçäo, fator 2 - que define os esquemas de superovulaçäo de doadoras e fator 3 - que define o sucesso do esquema de superovulaçäo. Com os dados de primeira colheita foram obtidos: fator 1 - que define a idade ótima à superovulaçäo, fator 2 - que define os esquemas de superovulaçäo de doadoras e fator 3 - que define esquema alternativo de superovulaçäo. As análises indicaram que os resultados de superovulaçäo säo muito variáveis e que há grande efeito da idade da doadora à superovulaçäo, do coeficiente de endogamia da doadora, da ordem de colheita, da dose da droga e do número de inseminaçöes sobre esses resultados. O número de embriöes viáveis por superovulaçäo e a correlaçäo entre número de embriöes viáveis e total de prenhezes positivas podem ser indicadores da eficiência do MOET
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Transferência Embrionária , SuperovulaçãoRESUMO
Data on 1390 Zebu donors multiple ovulation followed by embryo transfer results were analyzed. The donors came from different regions of Brazil and belonged to Brahman (31), Gir (22), Guzerá (68) and Nelore (411) breeds. The age of donors ranged from 1.5 to 19.5 years old. The first recovery data and consecutive recovery data were submitted to multivariate analysis. The estimated Pearson correlation coefficients were: 0.72 between total recovered structures (ER) and number of viable embryos (EV); 0.66 between ER and total of positive pregnant receptors (PP); 0.53 between ER and number of palpated corpora luteum; 0.89 between EV and PP; 0.33 between EV and CL and 0.30 between PP and CL. Relationships among inbreeding coefficient, age of donors to superovulation, stimulating drug, drug dosage, recovery number and number of executed insemination were also observed. Factor analysis indicated the following factors for consecutive recoveries: factor 1 - factors that reduce superovulation response, factor 2 - superovulation scheme according to characteristics of donors, factor 3 - success of superovulation scheme. For first recovery analysis the following factors were designated: factor 1 - optimum age for superovulation, factor 2 - superovulation scheme according to characteristics of donors, and factor 3 - alternative superovulation scheme. The analysis also indicated the results of superovulation are quite variable and that the age of donors to superovulation, inbreeding coefficient of donors, recovery number, drug dosage and number of inseminations have high effect on the results. The number of viable embryos and the correlation between number of viable embryos and total of positive pregnant receptors can be indicators of MOET success.
Resultados de 1390 ovulações múltiplas seguidas de transferência de embriões foram submetidas à análise multivariada para estudo da relação entre algumas variáveis envolvidas no processo. As superovulações foram realizadas no período de 1989 a 1999 em várias doadoras zebuínas das raças Brahman (31), Gir (22), Guzerá (68) e Nelore (411), provenientes de 61 rebanhos de diversas regiões do Brasil. As doadoras tinham idades entre 1,5 e 19,5 anos. Analisaram-se apenas dados de primeira colheita e dados de colheitas consecutivas. As principais correlações encontradas com a análise de ambos os arquivos pelo método de Pearson foram de: 0,72 entre o total de estruturas recuperadas (ER) e o número de embriões viáveis (EV); 0,66 entre ER e o total de prenhezes positivas (PP); 0,53 entre ER e o número de corpos lúteos palpados (CL); 0,89 entre EV e PP; 0,33 entre EV e CL; e 0,30 entre PP e CL. Observou-se associação entre coeficiente de endogamia, idade das doadoras à superovulação, droga estimuladora, dose da droga estimuladora, ordem de colheita e número de inseminações. Foram estimados os seguintes fatores nas análises de colheitas consecutivas: fator 1 - que reduz a resposta à superovulação, fator 2 - que define os esquemas de superovulação de doadoras e fator 3 - que define o sucesso do esquema de superovulação. Com os dados de primeira colheita foram obtidos: fator 1 - que define a idade ótima à superovulação, fator 2 - que define os esquemas de superovulação de doadoras e fator 3 - que define esquema alternativo de superovulação. As análises indicaram que os resultados de superovulação são muito variáveis e que há grande efeito da idade da doadora à superovulação, do coeficiente de endogamia da doadora, da ordem de colheita, da dose da droga e do número de inseminações sobre esses resultados. O número de embriões viáveis por superovulação e a correlação entre número de embriões viáveis e total de prenhezes positivas podem ser indicadores da eficiência do MOET.