RESUMO
INTRODUCTION: The workflow in clinical flow cytometry laboratories must constantly be reviewed to develop technical procedures that improve quality and productivity and reduce costs. Using the Beckman Coulter dry coating technology, we customized a ten-color tube with dried antibody reagents, designated the Duraclone screening tube (DST), for screening hematological malignancies. Here, we compared the applicability, clinical and numerical equivalence, and cost and time required for the technical procedures between the liquid reagents and the DST. METHODS: The DST contains CD4 + Kappa-FITC, CD8 + Lambda-PE, CD3 + CD14-ECD, CD33-PE-Cy5.5, CD20 + CD56-PE-Cy7, CD34-APC, CD19-APC-AlexaFluor700, CD10-APC-AlexaFluor750, CD5-Pacific Blue, and CD45-Krome Orange. We evaluated 20 bone marrow samples, 13 peripheral blood samples, 6 lymph node biopsy samples, 5 fine-needle aspirate samples, 5 cerebrospinal fluid samples, and 1 pleural fluid sample. RESULTS: The DST was useful for more than 60% of our samples. It was able to enumerate the majority of the populations in all types of samples with a statistically acceptable correlation with the liquid reagents. The use of the DST translated into significant time and cost savings of 15.8% and 12.3%, respectively, compared with the use of the liquid reagent. The cost was reduced by $14.36 per sample. CONCLUSIONS: The DST is an efficient solution for screening hematological malignancies with improved quality, productivity, standardization, and sustainability. These improvements could benefit patients by providing faster diagnoses using a higher quality and lower cost reagent.
Assuntos
Neoplasias Hematológicas/diagnóstico , Anticorpos/imunologia , Humanos , Imunofenotipagem , Indicadores e Reagentes/economia , Indicadores e Reagentes/normas , Fatores de TempoRESUMO
O conhecimento da dinâmica das alterações nos parâmetros hematológicos e na cinética das proteínas de fase aguda em animais saudáveis nas primeiras semanas de vida é essencial para a interpretação correta dessas avaliações em situações de morbidez e para diferenciar animais sadios e enfermos de forma confiável. Com o intuito de avaliar a cinética desses parâmetros no primeiro mês de vida de bezerros de corte sadios, filhos de vacas primíparas ou pluríparas, amostras de sangue foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento. Os parâmetros eritrocitários foram influenciados pelo número de partos das vacas e o leucograma mostrou alterações características de influência do cortisol fetal liberado por ocasião do nascimento. O teor sérico de proteína total aumentou significativamente após a ingestão do colostro. As concentrações de ceruloplasmina, haptoglobina e proteínas de pesos moleculares 33 kDa e 23 kDa aumentaram significativamente no primeiro dia de vida, seja pela resposta ao nascimento ou pela ingestão do colostro, enquanto os teores de transferrina, albumina e α1-glicoproteína ácida mantiveram-se relativamente estáveis nos primeiros dias de vida, aumentando gradualmente até os 30 dias de idade.(AU)
The knowledge of the dynamic in changes of hematologic parameters and the acute phase proteins kinetics in healthy animals in the first weeks of life is essential for the accurate interpretation of these evaluations in morbidity situations, and to reliably differentiate healthy from sick animals. The aim of the study was to evaluate the dynamic of these parameters in the first month of life of healthy beef calves, born from primiparous or multiparous cows, and so blood samples were collected before colostrum intake and 1, 2, 7, 15 and 30 days thereafter to evaluate hemogram and serum proteinogram. The red cell parameters were influenced by the parturition number of cows, and the leukogram showed characteristic changes of the release of fetal cortisol at birth. The total protein level significantly increased after colostrum intake. The concentrations of acute phase proteins ceruloplasmin, haptoglobin and proteins of molecular weight 33 kDa and 23 kDa significantly increased in the first day of life, influenced either by response to birth or colostrum intake, while the levels of transferrin, albumin and α1-acid glycoprotein were relatively stable in the first days, increasing gradually until 30 days of life.(AU)
Assuntos
Animais , Recém-Nascido , Bovinos , Animais Recém-Nascidos/fisiologia , Contagem de Células Sanguíneas/veterinária , Proteínas de Fase Aguda/análise , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/veterináriaRESUMO
O conhecimento da dinâmica das alterações nos parâmetros hematológicos e na cinética das proteínas de fase aguda em animais saudáveis nas primeiras semanas de vida é essencial para a interpretação correta dessas avaliações em situações de morbidez e para diferenciar animais sadios e enfermos de forma confiável. Com o intuito de avaliar a cinética desses parâmetros no primeiro mês de vida de bezerros de corte sadios, filhos de vacas primíparas ou pluríparas, amostras de sangue foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento. Os parâmetros eritrocitários foram influenciados pelo número de partos das vacas e o leucograma mostrou alterações características de influência do cortisol fetal liberado por ocasião do nascimento. O teor sérico de proteína total aumentou significativamente após a ingestão do colostro. As concentrações de ceruloplasmina, haptoglobina e proteínas de pesos moleculares 33 kDa e 23 kDa aumentaram significativamente no primeiro dia de vida, seja pela resposta ao nascimento ou pela ingestão do colostro, enquanto os teores de transferrina, albumina e α1-glicoproteína ácida mantiveram-se relativamente estáveis nos primeiros dias de vida, aumentando gradualmente até os 30 dias de idade.
The knowledge of the dynamic in changes of hematologic parameters and the acute phase proteins kinetics in healthy animals in the first weeks of life is essential for the accurate interpretation of these evaluations in morbidity situations, and to reliably differentiate healthy from sick animals. The aim of the study was to evaluate the dynamic of these parameters in the first month of life of healthy beef calves, born from primiparous or multiparous cows, and so blood samples were collected before colostrum intake and 1, 2, 7, 15 and 30 days thereafter to evaluate hemogram and serum proteinogram. The red cell parameters were influenced by the parturition number of cows, and the leukogram showed characteristic changes of the release of fetal cortisol at birth. The total protein level significantly increased after colostrum intake. The concentrations of acute phase proteins ceruloplasmin, haptoglobin and proteins of molecular weight 33 kDa and 23 kDa significantly increased in the first day of life, influenced either by response to birth or colostrum intake, while the levels of transferrin, albumin and α1-acid glycoprotein were relatively stable in the first days, increasing gradually until 30 days of life.
Assuntos
Animais , Recém-Nascido , Bovinos , Animais Recém-Nascidos/fisiologia , Contagem de Células Sanguíneas/veterinária , Proteínas de Fase Aguda/análise , Eletroforese em Gel de Poliacrilamida/veterináriaRESUMO
Passive immunity transfer (PIT) evaluation is an essential tool for the maintenance of healthy calves during the first months of life. Since lactation number and breed have been proven to influence immunoglobulin levels in colostrum, the aim of this study was to evaluate PIT from primiparous and multiparous Canchim cows to their calves. Blood samples were collected from the calves before colostrum intake and 1, 2, 7, 15 and 30 days thereafter, while colostrum samples from the cows were taken immediately after parturition. Activities of gamma-glutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP), and concentrations of total protein, albumin, globulins, immunoglobulin A (IgA), immunoglobulin G (IgG), total and ionized calcium, inorganic phosphorus, magnesium, sodium and potassium were evaluated in calves' serum and activities of GGT and ALP and concentrations of total protein, IgA and IgG were assessed in cow's colostrum whey. Immunoglobulins concentrations were evaluated by electrophoresis in polyacrylamide gels. Serum biochemistry evaluations revealed an increase in gamma-glutamyl transferase and alkaline phosphatase activities and in total protein, globulins, immunoglobulin A and immunoglobulin G levels in calves' serum after colostrum intake. Only total protein and light chain immunoglobulin G levels in colostrum whey were affected by the cows' lactation number. Phosphorus and magnesium levels in blood serum increased after colostrum intake, while sodium and potassium levels oscillated in the experimental period. PIT was influenced by the cows' lactation number but was efficient in both groups.(AU)
A avaliação da transferência de imunidade passiva (TIP) é uma ferramenta essencial para manutenção de bezerros saudáveis nos primeiros meses de vida. Uma vez que há influência do número de lactações e da raça de vacas nos teores de imunoglobulinas do colostro, o presente estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a TIP de vacas Canchim primíparas e pluríparas aos seus bezerros. Amostras de sangue dos bezerros foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento e amostras de colostro das vacas foram coletadas imediatamente após o parto. As atividades de gamaglutamiltransferase (GGT), fosfatase alcalina (ALP) e as concentrações de proteína total, albumina, globulinas, imunoglobulina A (IgA) e imunoglobulina G (IgG), cálcio total e ionizado, fósforo, magnésio, sódio e potássio foram avaliadas no soro dos bezerros e as atividades de GGT e ALP e as concentrações de proteína total, IgA e IgG foram avaliadas no soro colostral. A concentração de imunoglobulinas foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida. As avaliações bioquímicas do soro sanguíneo dos bezerros revelaram aumento nas atividades das enzimas gamaglutamiltransferase e fosfatase alcalina e nos teores de proteína total, globulinas, imunoglobulina A e imunoglobulina G após a ingestão do colostro. Apenas os teores de proteína total e imunoglobulina G de cadeia leve no soro colostral foram influenciados pelo número de lactações das vacas. Os teores de fósforo e magnésio aumentaram após a ingestão de colostro, enquanto as concentrações de sódio e potássio oscilaram no decorrer do período experimental. A TIP foi influenciada pelo número de lactações das vacas, no entanto mostrou-se eficiente em ambos os grupos.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/imunologia , Colostro/imunologia , Imunoglobulina A Secretora/análise , Imunoglobulina G/análise , Imunização Passiva/veterinária , gama-Glutamiltransferase/análise , Fosfatase Alcalina/análise , Imunoglobulinas/análiseRESUMO
Passive immunity transfer (PIT) evaluation is an essential tool for the maintenance of healthy calves during the first months of life. Since lactation number and breed have been proven to influence immunoglobulin levels in colostrum, the aim of this study was to evaluate PIT from primiparous and multiparous Canchim cows to their calves. Blood samples were collected from the calves before colostrum intake and 1, 2, 7, 15 and 30 days thereafter, while colostrum samples from the cows were taken immediately after parturition. Activities of gamma-glutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP), and concentrations of total protein, albumin, globulins, immunoglobulin A (IgA), immunoglobulin G (IgG), total and ionized calcium, inorganic phosphorus, magnesium, sodium and potassium were evaluated in calves' serum and activities of GGT and ALP and concentrations of total protein, IgA and IgG were assessed in cow's colostrum whey. Immunoglobulins concentrations were evaluated by electrophoresis in polyacrylamide gels. Serum biochemistry evaluations revealed an increase in gamma-glutamyl transferase and alkaline phosphatase activities and in total protein, globulins, immunoglobulin A and immunoglobulin G levels in calves' serum after colostrum intake. Only total protein and light chain immunoglobulin G levels in colostrum whey were affected by the cows' lactation number. Phosphorus and magnesium levels in blood serum increased after colostrum intake, while sodium and potassium levels oscillated in the experimental period. PIT was influenced by the cows' lactation number but was efficient in both groups.
A avaliação da transferência de imunidade passiva (TIP) é uma ferramenta essencial para manutenção de bezerros saudáveis nos primeiros meses de vida. Uma vez que há influência do número de lactações e da raça de vacas nos teores de imunoglobulinas do colostro, o presente estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a TIP de vacas Canchim primíparas e pluríparas aos seus bezerros. Amostras de sangue dos bezerros foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento e amostras de colostro das vacas foram coletadas imediatamente após o parto. As atividades de gamaglutamiltransferase (GGT), fosfatase alcalina (ALP) e as concentrações de proteína total, albumina, globulinas, imunoglobulina A (IgA) e imunoglobulina G (IgG), cálcio total e ionizado, fósforo, magnésio, sódio e potássio foram avaliadas no soro dos bezerros e as atividades de GGT e ALP e as concentrações de proteína total, IgA e IgG foram avaliadas no soro colostral. A concentração de imunoglobulinas foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida. As avaliações bioquímicas do soro sanguíneo dos bezerros revelaram aumento nas atividades das enzimas gamaglutamiltransferase e fosfatase alcalina e nos teores de proteína total, globulinas, imunoglobulina A e imunoglobulina G após a ingestão do colostro. Apenas os teores de proteína total e imunoglobulina G de cadeia leve no soro colostral foram influenciados pelo número de lactações das vacas. Os teores de fósforo e magnésio aumentaram após a ingestão de colostro, enquanto as concentrações de sódio e potássio oscilaram no decorrer do período experimental. A TIP foi influenciada pelo número de lactações das vacas, no entanto mostrou-se eficiente em ambos os grupos.
Assuntos
Animais , Bovinos , Bovinos/imunologia , Colostro/imunologia , Imunização Passiva/veterinária , Imunoglobulina A Secretora/análise , Imunoglobulina G/análise , Fosfatase Alcalina/análise , Imunoglobulinas/análise , gama-Glutamiltransferase/análiseRESUMO
An acetate anion bearing an imidazolium cation as its charge tag was reacted with M(OAc)(2) complexes (where M = Ni, Cu, and Pd; in situ reaction) to form members of a new class of charge-tagged metal complexes. The formation of these unprecedented precatalysts with potential for cross-coupling reactions was confirmed by electrospray ionization (and tandem) mass spectrometry. The catalytic performance of the palladium complex was tested in Heck and Suzuki cross-coupling reactions, often with superior activity and yields as compared with Pd(OAc)(2).
RESUMO
Newly designed 2,1,3-benzothiadiazole-containing fluorescent probes with four excited state intramolecular proton transfer (ESIPT) sites were successfully tested in live cell-imaging assays using a confluent monolayer of human stem-cells (tissue). All tested dyes were compared with the commercially available DAPI and gave far better results.
Assuntos
Corantes Fluorescentes/análise , Células-Tronco/citologia , Tiadiazóis/análise , Sobrevivência Celular , Células Cultivadas , DNA de Cadeia Simples/análise , Corantes Fluorescentes/química , Humanos , Espectrometria de Fluorescência , Tiadiazóis/químicaRESUMO
A series of 4,7-pi-extended 2,1,3-benzothiadiazoles (BTDs) with different molecular architectures, in particular, the organic dyes based on the 4-(arylethynyl)-7-(4-methoxy)-2,1,3-benzothiazole skeleton, can be used at very low concentrations (down to 10 microM) to detect DNA at 1 ppm in phosphate buffer solutions. Upon binding to DNA, these dyes showed an exponential increase in the fluorescence intensity (hyperchromic effect) and a red shift (1-5 nm) in the long-wavelength emission maxima. Pre-steady state kinetic experiments (stopped-flow) demonstrated the fast dye interaction with the biomacromolecules of DNA with an increase in fluorescence, especially with non-symmetrical BTDs containing an ethynyl spacer. An intercalation model could be proposed based on the photophysical properties, X-ray analysis, and theoretical calculations (ab initio). In this model, the intercalation occurs on the ethynyl side of the BTD, and as a consequence, the PhOMe portion is free to perform the ICT process with the BTD core and stabilizes it in the excited state.
Assuntos
DNA/química , Corantes Fluorescentes/química , Espectrometria de Fluorescência/métodos , Tiadiazóis/química , Actinas/química , Actinas/genética , Sítios de Ligação , DNA/genética , Humanos , Cinética , Modelos Moleculares , Estrutura Molecular , Conformação de Ácido Nucleico , Reação em Cadeia da Polimerase , Reprodutibilidade dos TestesRESUMO
In the present overview, we describe the bases of intercalation of small molecules (cationic and polar neutral compounds) in DNA. We briefly describe the importance of DNA structure and principles of intercalation. Selected syntheses, possibilities and applications are shown to exemplify the importance, drawbacks and challenges in this pertinent, new, and exciting research area. Additionally, some clinical applications (molecular processes, cancer therapy and others) and trends are described.
Assuntos
DNA/química , Substâncias Intercalantes , Conformação de Ácido Nucleico , Acridinas/síntese química , Acridinas/química , Corantes Fluorescentes/síntese química , Corantes Fluorescentes/química , Humanos , Substâncias Intercalantes/síntese química , Substâncias Intercalantes/química , Estrutura Molecular , Quinoxalinas/síntese química , Quinoxalinas/químicaRESUMO
Indole-3-glycerol phosphate synthase (IGPS) catalyzes the irreversible ring closure of 1-(o-carboxyphenylamino)-1-deoxyribulose 5-phosphate (CdRP), through decarboxylation and dehydration steps, releasing indole-3-glycerol phosphate (IGP), the fourth step in the biosynthesis of tryptophan. This pathway is essential for Mycobacterium tuberculosis virulence. Here we describe the cloning, expression, purification, and kinetic characterization of IGPS from M. tuberculosis. To perform kinetic studies, CdRP was chemically synthesized, purified, and spectroscopically and spectrometrically characterized. CdRP fluorescence was pH-dependent, probably owing to excited-state intramolecular proton transfer. The activation energy was calculated, and solvent isotope effects and proton inventory studies were performed. pH-rate profiles were carried out to probe for acid/base catalysis, showing that a deprotonated residue is necessary for CdRP binding and conversion to IGP. A model to describe a steady-state kinetic sequence for MtIGPS-catalized chemical reaction is proposed.
Assuntos
Indol-3-Glicerolfosfato Sintase/metabolismo , Mycobacterium tuberculosis/enzimologia , Sequência de Bases , Fenômenos Biofísicos , Clonagem Molecular , Primers do DNA/genética , DNA Bacteriano/genética , Genes Bacterianos , Concentração de Íons de Hidrogênio , Indol-3-Glicerolfosfato Sintase/genética , Indol-3-Glicerolfosfato Sintase/isolamento & purificação , Cinética , Espectroscopia de Ressonância Magnética , Modelos Químicos , Mycobacterium tuberculosis/genética , Mycobacterium tuberculosis/patogenicidade , Ribulosefosfatos/síntese química , Ribulosefosfatos/metabolismo , Espectrometria de Fluorescência , Espectrometria de Massas por Ionização por Electrospray , Termodinâmica , VirulênciaRESUMO
The transesterification (alcoholysis) reaction was successfully applied to synthesize biodiesel from vegetable oils using imidazolium-based ionic liquids under multiphase acidic and basic conditions. Under basic conditions, the combination of the ionic liquid 1-n-butyl-3-methylimidazolium bis(trifluoromethylsulfonyl)imide (BMINTf2), alcohols, and K2CO3 (40 mol %) results in the production of biodiesel from soybean oil in high yields (>98%) and purity. H2SO4 immobilized in BMINTf2 efficiently promotes the transesterification reaction of soybean oil and various primary and secondary alcohols. In this multiphase process the acid is almost completely retained in the ionic liquid phase, while the biodiesel forms a separate phase. The recovered ionic liquid containing the acid could be reused at least six times without any significant loss in the biodiesel yield or selectivity. In both catalytic processes (acid and base), the reactions proceed as typical multiphasic systems in which the formed biodiesel accumulates as the upper phase and the glycerol by-product is selectively captured by the alcohol-ionic liquid-acid/base phase. Classical ionic liquids such as 1-n-butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborate and hexafluorophosphate are not stable under these acidic or basic conditions and decompose.
Assuntos
Ácidos/química , Fontes de Energia Bioelétrica , Líquidos Iônicos/química , Álcoois/química , Carbonatos/química , Catálise , Esterificação , Potássio/química , Óleo de Soja/químicaRESUMO
4,7-Disubstituted benzothiadiazoles containing 1-arylethynyl and 4-methoxyphenyl groups are selective photoluminescent "light up" probes to duplex DNA with unprecedented sensibility in both spectrophotometric and spectrofluorimetric measurements.
Assuntos
DNA/análise , Corantes Fluorescentes/análise , Corantes Fluorescentes/química , DNA/química , Estrutura Molecular , Sensibilidade e Especificidade , Espectrofotometria , TitulometriaRESUMO
Objetivos: Demonstrar a utilização e importância da tomografia de coerência óptica em dois casos de retinosquise ligada ao cromossomo X. Local: Departamento de Oftalmologia da Universidade de São Paulo, São Paulo (SP), Brasil. Método: Descrição dos achados oftalmoscópicos e tomografia de coerência óptica em dois casos de retinosquise ligada ao cromossomo X. Resultado: A tomografia de coerência óptica dos olhos com retinosquise ligada ao cromossomo X possibilitou a visibilização da esquise retiniana dentro da camada de fibras nervosas, confirmando a suspeita diagnóstica. Conclusão: A tomografia de coerência óptica é um método de imagem não invasivo, de não contato, e um poderoso método de exame para a detecção e monitorização de uma variedade de doenças maculares.