RESUMEN

A previous study showed that BMP-2 (bone morphogenetic protein-2) and wear debris can separately support osteoclast formation induced by the receptor activator of NF-κB ligand (RANKL). However, the effect of BMP-2 on wear debris-induced osteoclast formation is unclear. In this study, we show that neither titanium particles nor BMP-2 can induce osteoclast formation in RAW 264.7 mouse leukemic monocyte macrophage cells but that BMP-2 synergizes with titanium particles to enhance osteoclast formation in the presence of RANKL, and that at a low concentration, BMP-2 has an optimal effect to stimulate the size and number of multinuclear osteoclasts, expression of osteoclast genes, and resorption area. Our data also clarify that the effects caused by the increase in BMP-2 on phosphorylated SMAD levels such as c-Fos expression increased throughout the early stages of osteoclastogenesis. BMP-2 and titanium particles stimulate the expression of p-JNK, p-P38, p-IkB, and P50 compared with the titanium group. These data suggested that BMP-2 may be a crucial factor in titanium particle-mediated osteoclast formation.

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A previous study showed that BMP-2 (bone morphogenetic protein-2) and wear debris can separately support osteoclast formation induced by the receptor activator of NF-κB ligand (RANKL). However, the effect of BMP-2 on wear debris-induced osteoclast formation is unclear. In this study, we show that neither titanium particles nor BMP-2 can induce osteoclast formation in RAW 264.7 mouse leukemic monocyte macrophage cells but that BMP-2 synergizes with titanium particles to enhance osteoclast formation in the presence of RANKL, and that at a low concentration, BMP-2 has an optimal effect to stimulate the size and number of multinuclear osteoclasts, expression of osteoclast genes, and resorption area. Our data also clarify that the effects caused by the increase in BMP-2 on phosphorylated SMAD levels such as c-Fos expression increased throughout the early stages of osteoclastogenesis. BMP-2 and titanium particles stimulate the expression of p-JNK, p-P38, p-IkB, and P50 compared with the titanium group. These data suggested that BMP-2 may be a crucial factor in titanium particle-mediated osteoclast formation.

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In adrenal cortex, ACTH regulation of steroidogenesis depends on PKA-dependent serine/threonine phosphorylation and also on the activity of protein tyrosine phosphatases (PTPs). In addition, ACTH increases total PTPs involving at least three soluble PTPs (50, 82 and 115 kDa). Serine/threonine phosphorylation of these enzymes themselves could be a regulatory mechanism of their activity since the increase of total PTP activity is dependent on PKA-activation. In this report we analyzed the effect of in vitro phospho-dephosphorylation processes on the activity displayed by the ACTH-activated PTP of 115 kDa. Using an in-gel PTP assay we demonstrate that dephosphorylation catalyzed by potato acid phosphatase (PAP) reduces the activity of the 115 kDa PTP present in ZF from ACTH-treated animals and PKA-mediated phosphorylation reverses this effect.

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In a previous work we demonstrated that germ and epithelial cells of the atrophic right ovary and of the medulla in the left functioning ovary undergo regression while interstitial cells are preserved. The objective of the present study was to analyze the relationship between nerve fibers and nerve endings and interstitial cells from both ovaries during embryogenesis in the chick. To this purpose, left and right ovaries from embryos of 7 to 19 days of development were processed for ultrastructural study and ultracytochemical determination of acid phosphatase. At 7 days, isolated interstitial cells were found in the central region of both ovaries, containing SER, Golgi apparatus, mitochondria with tubular cristae and abundant lipidic vacuoles. Nerve fibers and nerve endings were scarce. From the 11th day, interstitial cells were found grouped in the right ovary and in the medulla of the left one, and were related to nerve bundles surrounded by Schwann cells. The nerve ending, in close contact with the membrane of interstitial cells, contained mitochondria, microtubules and small and big vesicles, some with an electro-dense content. This relationship between interstitial cells and nerve endings and fibers was more frequent from the 15th day. The activity of acid phosphatase localized in germ and epithelial cells presented a more intense reaction in the right ovary and in the medulla of the left ovary at 15 days.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)

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En trabajos previos demostramos que en el ovario derecho atrófico y en la médula del ovario izquierdo funcionante del pollo experimental regresión las células germinales y epiteliales y se preservan las células intersticiales (Avila y col. 1987). El objetivo del presente trabajo fue analizar la relación de las fibras y terminaciones nerviosas con las células intersticiales en ambos ovarios durante la embriogénesis en el pollo. Para ello se utilizaron ovarios izquierdos y derechos de embriones de 7 a 19 días de desarrollo, los que fueron procesados para su estudio ultraestructrual y determinación ultracitoquímica de fosfatasa ácida. A los 7 días se encontraron células intersticiales aisladas en la región central de ambos ovarios, las cuales contenían REL, Golgi, mitocondrias con crestas tubulares y abundantes vacuolas lipídicas. Las fibras y teminaciones nerviosas eran escasas. A partir de los 11 días las células intersticiales se encontraron agrupadas en el ovario derecho y en la médula del ovario izquierdo y se relacionaban con fascículos nerviosos rodeados de células de Schwann. Los terminaciones nerviosas, en íntimo contacto con la membrana de las células intersticiales, contenían mitocondrias, microtúbulos y vesículas grandes y pequeñas, algunas con contenido electrodenso. Esta relación entre las células intersticiales y las fibras y terminaciones nerviosas fue más frecuente desde los 15 días. La actividad de fosfatasa ácida localizada en las células germinales y epiteliales, presentó una reacción más intensa a los 15 días en el ovario derecho y en la médula del ovario izquierdo. No se detectó actividad enzimática en las células intersticiales ni en las fibras y terminaciones nerviosas en las distintas edades estudiadas. Estos hallazgos sugieren que las fibras y terminaciones nerviosas serían necesarias para la diferenciación de las células intersticiales en ambos ovarios del embrión de pollo (AU)

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En trabajos previos demostramos que en el ovario derecho atrófico y en la médula del ovario izquierdo funcionante del pollo experimental regresión las células germinales y epiteliales y se preservan las células intersticiales (Avila y col. 1987). El objetivo del presente trabajo fue analizar la relación de las fibras y terminaciones nerviosas con las células intersticiales en ambos ovarios durante la embriogénesis en el pollo. Para ello se utilizaron ovarios izquierdos y derechos de embriones de 7 a 19 días de desarrollo, los que fueron procesados para su estudio ultraestructrual y determinación ultracitoquímica de fosfatasa ácida. A los 7 días se encontraron células intersticiales aisladas en la región central de ambos ovarios, las cuales contenían REL, Golgi, mitocondrias con crestas tubulares y abundantes vacuolas lipídicas. Las fibras y teminaciones nerviosas eran escasas. A partir de los 11 días las células intersticiales se encontraron agrupadas en el ovario derecho y en la médula del ovario izquierdo y se relacionaban con fascículos nerviosos rodeados de células de Schwann. Los terminaciones nerviosas, en íntimo contacto con la membrana de las células intersticiales, contenían mitocondrias, microtúbulos y vesículas grandes y pequeñas, algunas con contenido electrodenso. Esta relación entre las células intersticiales y las fibras y terminaciones nerviosas fue más frecuente desde los 15 días. La actividad de fosfatasa ácida localizada en las células germinales y epiteliales, presentó una reacción más intensa a los 15 días en el ovario derecho y en la médula del ovario izquierdo. No se detectó actividad enzimática en las células intersticiales ni en las fibras y terminaciones nerviosas en las distintas edades estudiadas. Estos hallazgos sugieren que las fibras y terminaciones nerviosas serían necesarias para la diferenciación de las células intersticiales en ambos ovarios del embrión de pollo

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Foi estudada, a influência da ligadura do ducto principal da glândula parótida de ratos albinos, machos, adultos, de linhagem Wistar, pesando 170 a 230 g, nos períodos de 1, 7, 15, 21, 30 e 60 dias após obstruçäo, através de métodos morfológicos e morfométricos aplicados à microscopia de luz e bioquímicos de dosagem do conteúdo de proteína total e de fosfatase ácida das glandulas contralaterais dos mesmos animais. A análise morfológica demonstrou que no 1§ dia de obstruçäo, os ácinos näo apresentavam alteraçöes estruturais evidentes, apresentando forma piramidal, núcleos dispostos na porçäo basal, contendo granulaçöes citoplasmáticas. Os ductos intercalares eram poucos, sendo revestidos por tecido epitelial de células cubóides baixas; os ductos estriados apresentavam epitélio colunar alto e os ductos excretores, epitélio pseusoestratificado cilíndrico. Os dois tipos de ductos se apresentavam dilatados, circundados, em alguns casos, por células tipo neutrófilos polimorfonucleares. A partir do 7§ dia do experimento, observou-se atrofia das células acinosas e intensa infiltraçäo de macrófagos entre estas células. Os ductos estriados se apresentavam dilatados, contendo em sua luz neutrófilos polimorfonucleares. Eram raros os ductos intercalares. A cápsula e os septos interlobulares se apresentavam mais espessos e sediavam infiltrado de células monocluceares. Em alguns períodos de tempo, observaram-se alteraçöes degenerativas das células acinosas com formaçäo de vacúolos. Foram evidenciadas também áreas de colagenizaçäo envolvendo os ductos intralobulares. Nos períodos mais tardios do experimento, havia intensa atrofia dos constituintes intralobulares os quais estavam representados, basicamente, por estruturas ductiformes, sendo evidenciada substituiçäo das estruturas parenquimentosas por tecido conjuntivo fibroso...

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