RESUMEN
O presente trabalho de pesquisa teve como objetivo a detecçäo de toxinas, microcistinas, produzidas por cianobactérias, ou algas azuis, na água e plâncton de represas para abastecimento público. A metodologia utilizada para este fim foi a de imunoadsorçäo ligada à enzima por competiçäo direta (ELISA). O cultivo de linhagens de cianobactérias tóxicas, mais especificamente do gênero Microcystis, foi realizado com o intuito de se obter suficiente biomassa, utilizada no processo de extraçäo e purificaçäo das microcistinas. A extraçäo das microcistinas por meio de álcoois e "clean up" do extrato obtido foi necessário para a separaçäo e purificaçäo cromatográfica realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). A identificaçäo química das microcistinas foi realizada pelo conhecimento da constituiçäo dos aminoácidos e peso molecular. Os métodos empregados foram os de análise de aminoácidos por HPLC e espectrometria de massa por bombardeamento atômico rápido (FABMS). A presença das microcistinas foi constatada nas amostras de água e plâncton coletadas em diferentes represas, sendo que duas linhagens de cianobactérias tóxicas, identificadas como BRJU20a e BRAM 9 foram cultivadas e estudadas em relaçäo aos seus análogos da microcistina. Os análogos da microcistina que foram encontrados nestas linhagens säo a microcistina-LR, microcistina-RR, microcistina-YR, microcistina-FR e seus análogos demetilados, como a [D- 'Asp POT. 3'] microcistina-LR, [D- 'Asp POT.3'] microcistina-RR e [D- 'Asp POT. 3'] microcistina-YR. Os resultados obtidos com o presente trabalho de pesquisa comprovam a existência de toxinas, microcistinas, produzidas por cianobactérias em águas de represas para fins de abastecimento público. Este dado endossa a importância de se desenvolver um programa de monitorizaçäo das toxinas, iniciando-o pelas microcistinas, avaliando-se o risco do consumo de água na saúde humana
Asunto(s)
Cianobacterias/crecimiento & desarrollo , Cistina/química , Cistina/aislamiento & purificación , Presas , Técnicas de Inmunoadsorción , Toxinas Biológicas/análisis , Purificación del Agua , Abastecimiento de Agua , Agua/análisis , Cromatografía Líquida de Alta Presión/métodos , Medios de Cultivo , Contaminación Ambiental , Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática , Eucariontes , Espectrometría de Masas , Control de la Calidad del AguaRESUMEN
Half-cystine peptides were isolated from the enzymatic digest of reduced and carbamidomethylated alpaca growth hormone. From their amino acid composition and determination of the end terminal residues we propose the amino acid sequence around the two disulphide bridges, partially based on homology with other mammalian growth hormones. The proposed sequence is identical to that of equine growth hormone and very similar to those of rat, bovine and ovine hormones.