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El tratamiento de la alergia a las proteínas de la leche de vaca se basa en la eliminación completa de las proteínas de leche de vaca de la dieta del niño y de la madre en los que reciben leche materna. Para lograr la remisión de los síntomas y la tolerancia futura, la exclusión debe ser total. En los niños que reciben fórmula, esta deberá tener hidrolizado extenso de proteínas en las formas leves o moderadas, mientras que aquellas a base de aminoácidos se reservan para los casos más graves. El tiempo de tratamiento, la adquisición de tolerancia y el momento para la prueba de provocación oral van a variar según el cuadro clínico, el mecanismo inmunológico implicado y la edad del paciente. El objetivo de este consenso ha sido reflejar el conocimiento actualizado junto con la experiencia de neonatólogos, pediatras, especialistas en alergia, nutrición y gastroenterología.

The treatment of cow's milk protein allergy is based on the complete elimination of cow's milk protein from the diet. To achieve remission of symptoms and future tolerance, exclusion must be total. In formula fed infants the extensively hydrolysed formula is the most appropriate option in mild or moderate forms, while those based on amino acids are reserved for the most severe cases. The treatment time, the acquisition of tolerance and the moment for the oral provocation test will vary according to the clinical picture, the immunological mechanism involved and the age of the patient. The aim of this consensus has been to reflect the updated knowledge together with the experience of neonatologists, pediatricians, experts in allergy, nutrition and gastroenterology

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Introducción. Los pacientes con patología abdominal quirúrgica que requieren manejo con abdomen abierto son susceptibles a la pérdida de proteínas desde la cavidad expuesta. El objetivo de este estudio fue caracterizar la pérdida proteica a través de dos tipos de cierre temporal abdominal. Métodos. Se realizó un estudio decohorte prospectivo, con pacientes críticos manejados durante el año 2021 con abdomen abierto mediante dos tipos de cierre temporal: bolsa de Bogotá y ABThera™. Se recolectaron muestras intraoperatorias seriadas de líquido peritoneal (días 1, 3 y 5). Se calcularon frecuencias y promedios, y se compararon con las pruebas de Chi cuadrado y t de Student. Resultados. Se incluyeron 25 pacientes. El promedio de pérdida de proteínas en líquido peritoneal fue mayor con el sistema ABThera™ (44,38 g/L) comparado con la bolsa de Bogotá (25,18 g/L; p=0,0185). Durante el seguimiento se observó la tendencia a la disminución del promedio de proteínas perdidas por ambos sistemas, pero con ABThera™ se perdieron en promedio 15,47 gr/L más de proteínas, independientemente del estado nutricional y del aporte proteico recibido (p=0,042). No hubo diferencias según la etiología que llevó al manejo con abdomen abierto, los procedimientos quirúrgicos realizados o el estado de infección por COVID-19. Conclusiones. El abdomen abierto representa una fuente importante de pérdida de proteínas, que es diferente según el tipo de cierre temporal usado. Estas pérdidas deberían considerarse en los cálculos de soporte nutricional en la unidad de cuidado intensivo.

Introduction. Patients with surgical abdominal pathology requiring management with an open abdomen are susceptible to protein loss from the exposed cavity. The objective of this study was to characterize protein loss through two types of temporary abdominal closure. Methods. A prospective cohort study was carried out with critically ill patients managed during 2021 with an open abdomen using two types of temporary closure: Bogota bag and ABThera™. Serial intraoperative peritoneal fluid samples were collected (days 1, 3, and 5). Frequencies and averages were calculated and compared with the Chi square and Student's t tests. Results. Twenty-five patients were included. The average protein loss in peritoneal fluid was higher with the ABThera™ system (44.38 g/L) compared to the Bogota bag (25.18 g/L; p-value=0.0185). During follow-up, a tendency to decrease the average protein lost by both systems was observed, but with ABThera™ an average of 15.47 gr/L more protein was lost, regardless of the nutritional status and protein intake received (p=0.042). There were no differences based on etiology leading to open abdomen management, surgical procedures performed, or Covid-19 infection status. Conclusions. The open abdomen represents an important source of protein loss, which is different depending on the type of temporary closure used. These losses should be considered in calculations of nutritional support in the intensive care unit.

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Las proteínas de la leche de vaca pueden causar alergia alimentaria. Los distintos mecanismos de acción involucrados y la variabilidad clínica según la etapa de la vida pediátrica en la que se manifieste ocasionan dificultades en su abordaje, con riesgo de sub- o sobrediagnóstico. En este proceso, intervienen profesionales de diversas áreas y es recomendable su interacción. Es por ello que el objetivo de este consenso ha sido reflejar el conocimiento actualizado desde la interdisciplina, generando recomendaciones para su correcto diagnóstico. Hemos trabajado con el método de Delphi para sumarle a la evidencia científica, la experiencia proveniente de neonatólogos, pediatras, especialistas en alergia, nutrición y gastroenterología. Pensamos que este enfoque interdisciplinario de trabajo va a resultar de utilidad práctica y promoverá una atención más integral de estos pacientes.

Cow's milk protein can cause food allergy. The different mechanisms of action involved, the clinical variability depending on the stage of pediatric life in which it manifests, leads to difficulties in its approach, with the risk of under- or over-diagnosis. Professionals from various areas intervene in this process and their interaction is recommended. That is why the objective of this consensus has been to reflect the updated knowledge in an interdisciplinary mode, generating recommendations for its correct diagnosis. We have worked with the Delphi method to add to the scientific evidence, the experience from neonatologists, pediatricians, experts in allergy, nutrition and gastroenterology. We think that this interdisciplinary approach will be of practical use and will promote more comprehensive care for these patients.

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Ataxias are characterized by aberrant movement patterns closely related to cerebellar dysfunction. Purkinje cell axons are the sole outputs from the cerebellar cortex, and dysfunctional activity of Purkinje cells has been associated with ataxic movements. However, the synaptic characteristics of Purkinje cells in cases of ataxia are not yet well understood. The nicotinamide antagonist 3-acethylpyridine (3-AP) selectively destroys inferior olivary nucleus neurons so it is widely used to induce cerebellar ataxia. Five days after 3-AP treatment (65mg/kg) in adult male Sprague-Dawley rats, motor incoordination was revealed through BBB and Rotarod testing. In addition, in Purkinje cells from lobules V-VII of the cerebellar vermis studied by the Golgi method, the density of dendritic spines decreased, especially the thin and mushroom types. Western blot analysis showed a decrease in AMPA and PSD-95 content with an increase of the α-catenin protein, while GAD-67 and synaptophysin were unchanged. Findings suggest a limited capacity of Purkinje cells to acquire and consolidate afferent excitatory inputs and an aberrant, rigid profile in the movement-related output patterns of Purkinje neurons that likely contributes to the motor-related impairments characteristic of cerebellar ataxias.

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Introduction: Introduction: vegan diets are currently an essential topic of discussion because they are recognized as a prototype of a healthy diet but are also associated with deficits in the intake of critical nutrients such as protein. Evaluating the factors that influence the deficit in their intake in vulnerable populations such as university students represents an important topic of interest, considering that this is one of the groups where veganism is most popular. Given this, the present study aimed to determine the degree of protein sufficiency and its associated factors in a sample of Chilean vegan university students. Materials and methods: an exploratory cross-sectional study was conducted on 114 vegan university students who responded to an online survey on academic, attitudinal, clinical, dietary, and sociodemographic variables. Protein intake was calculated, and based on self-reported weight, daily protein adequacy was calculated according to the recommendation of 0.9 g/kg/day. Finally, the association between protein adequacy and previously consulted variables was calculated by determining the odds ratios. Results: only 53.5 % had adequate daily protein intake, which was associated with the length of time respondents had been vegan (OR, 2.86; 95 % CI, 1.07 to 7.34; p < 0.05), use of supplements (OR, 5.24; 95 % CI, 1.17 to 25.2; p < 0.05), and the frequency with which they ate lunch at home (OR, 87.7; 95 % CI, 24.1 to 304; p = 0.000). Conclusion: there needs to be more protein adequacy in the assessed sample. Protein adequacy is associated with the length of time on the vegan diet, frequency of eating lunch away from home, and use of supplements regularly.

Introducción: Introducción: en la actualidad, las dietas veganas representan una importante temática de discusión debido a que son reconocidas como prototipo de régimen saludable pero también se encuentran asociadas a déficits en la ingesta de nutrientes críticos como las proteínas. La evaluación de los factores que influyen en el déficit de su ingesta en poblaciones vulnerables como los estudiantes universitarios representa un importante tema de interés, considerando que es uno de los grupos donde mayor popularidad presenta el veganismo. Frente a esto, el presente estudio tuvo como objetivo determinar el grado de suficiencia proteica y los factores asociados a esta en una muestra de estudiantes universitarios veganos chilenos. Materiales y método: se realizó un estudio de alcance exploratorio de corte transversal en 114 estudiantes universitarios veganos que respondieron a una encuesta online sobre variables académicas, actitudinales, clínicas, dietarias y sociodemográficas. Se calculó la ingesta proteica y, en función del peso autorreportado, se calculó la adecuación proteica diaria de acuerdo con la recomendación de 0,9 g/kg/día. Finalmente se calculó la asociación entre la adecuación proteica y las variables anteriormente consultadas a partir de la determinación de los odds ratios. Resultados: solo un 53,5 % presentaron una ingesta diaria adecuada de proteínas, la cual se asocia al tiempo de antigüedad del veganismo de los encuestados (OR: 2,86; IC 95 %: 1,07 a 7,34; p < 0,05), la utilización de suplementos (OR: 5,24; II 95 %: 1,17 a 25,2; p < 0,05) y la frecuencia con la que almuerzan en el hogar (OR: 87,7; IC 95 %: 24,1 a 304; p = 0,000). Conclusión: existe una importante falta de adecuación proteica en la presente muestra evaluada. La adecuación proteica se asocia con la duración del régimen vegano, la frecuencia de almuerzos fuera de casa y la utilización de suplementos de forma regular.

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Resumen La interferencia por paraproteínas en los análisis clínicos ha sido extensamente informada a nivel mundial. Si bien se han propuesto estrategias metodológicas para evitar el informe de datos erróneos asociados a interferencias (p. ej. confirmación manual, sistema de alerta), en pocos casos se ha propuesto su detección como herramienta diagnóstica de patologías no sospechadas desde la clínica. A partir del trabajo conjunto de dos hospitales de la provincia de Buenos Aires se describió: i) la presencia de interferencia positiva de paraproteínas en la determinación de bilirrubina total con reactivos y autoanalizadores Wiener, y ii) su contribución, en un período inferior a los seis meses, a la detección de cuatro gammapatías no sospechadas (tres monoclonales). Se recomienda dar difusión de esta inferencia a nivel nacional y se propone un esquema de trabajo en laboratorio para identificar la interferencia así como un perfil mínimo de determinaciones para evaluar la existencia de gammapatías desconocidas.

Abstract Paraprotein interference in clinical biochemistry has been widely reported around the world. Methodological strategies have been proposed to avoid reporting erroneous data due to interferences (i.e. manual check, alert system); however, few cases have suggested its use as a diagnostic tool for unsuspected pathologies. Based on the joint work of two hospitals from Buenos Aires Province, the following has been described: i) the presence of positive interference of paraproteins in the assessment of total bilirubin with Wiener chemistry and autoanalizers, and ii) its contribution, in less than six months, to the diagnosis of four gammophaties previously unsuspected (three monoclonal ones). Sharing the occurrence of this interference in our country is recommended. An interference identification workflow is also propose, as well as a set of biochemical assays to evaluate the occurrence of unsuspected gammophaties.

Resumo A interferência da paraproteína na bioquímica clínica tem sido amplamente relatada em todo o mundo. Embora estratégias metodológicas para evitar a comunicação de dados errôneos associados a interferências tenham sido propostas (p. ex., verificação manual, sistema de alerta), em poucos casos sugerem seu uso como ferramenta diagnóstica para patologias não suspeitas a partir da clínica. Com base no trabalho conjunto de dois hospitais da Província de Buenos Aires, foi descrita: i) a presença de interferência positiva de paraproteínas na determinação da bilirrubina total com reagentes e autoanalisadores Wiener e ii) sua contribuição, em um período inferior aos seis meses, para o diagnóstico de quatro gamopatias não suspeitas (três monoclonais). Recomenda-se difundir essa interferência em nível nacional e se propõe um esquema de trabalho em laboratório para identificar a interferência bem como um perfil mínimo de determinações para avaliar a ocorrência de gamopatias desconhecidas.

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ABSTRACT Background: Helicobacter pylori is an etiologic agent of gastroduodenal diseases. The microorganism, considered a type I carcinogen, affects about 50% of the global population. H. pylori virulence factors are determinant for the clinical outcome of the infection. The outer inflammatory protein A (oipA) gene encodes an outer membrane adhesin and is related to severe gastropathies, such as gastric cancer. Objective: The aim of this study was to evaluate the association of the oipA gene with the severity of gastroduodenal diseases in dyspeptic patients in region Central Brazil. Methods: The polymerase chain reaction (PCR) was used to determine the presence of H. pylori. Samples positives were used for molecular screening of the oipA gene. Gastropathies were categorized as non-severe and severe diseases. Results: Approximately 68% of patients had H. pylori and 36% were infected with H. pylori oipA+ strains. Infection was significantly associated in patients aged over 44 years (P=0.004). However, there was no association between oipA and patients' age (P=0.89). Approximately 46% of patients infected with oipA+ strains had some severe illness. Gastric adenocarcinoma was the most frequent severe gastropathy. The H. pylori oipA genotype was inversely associated with the severity of gastroduodenal diseases (OR=0.247, 95%CI: 0.0804-0.7149 and P=0.007). Conclusion: The characterization of possible molecular markers will contribute to personalized medicine, impacting the prognosis of patients.

RESUMO Contexto: Helicobacter pylori é um agente etiológico de doenças gastroduodenais. O microrganismo, considerado cancerígeno tipo I, afeta cerca de 50% da população mundial. Os fatores de virulência do H. pylori são determinantes para o desfecho clínico da infecção. O gene da proteína inflamatória externa A (oipA) codifica uma adesina da membrana externa e está relacionado a gastropatias severas, como o câncer gástrico. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a associação do gene oipA com a gravidade das doenças gastroduodenais em pacientes dispépticos na região Brasil Central. Métodos: A reação em cadeia da polimerase (PCR) foi utilizada para determinar a presença de H. pylori. Amostras positivas foram utilizadas para triagem molecular do gene oipA. As gastropatias foram categorizadas como doenças não severas e severas. Resultados: Aproximadamente 68% dos pacientes apresentaram H. pylori e 36% estavam infectados com cepas H. pylori oipA+. A infecção foi significativamente associada em pacientes com idade superior a 44 anos (P=0,004). No entanto, não houve associação entre oipA e a idade dos pacientes (P=0,89). Aproximadamente 46% dos pacientes infectados com cepas oipA+ tiveram alguma doença severa. O adenocarcinoma gástrico foi a gastropatia severa mais frequente. O genótipo oipA de H. pylori foi inversamente associado à gravidade das doenças gastroduodenais (OR=0,247, IC95%: 0,0804-0,7149 P=0,007). Conclusão: A caracterização de possíveis marcadores moleculares contribuirá para a medicina personalizada, impactando no prognóstico dos pacientes.

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ABSTRACT Objective: To study the temporal changes of autophagy related factors in skeletal muscle of rats after exhaustive exercise and blunt trauma. Methods: Forty-two male SD rats were divided into 7 groups with 6 rats in each group: Quiet control group (C), immediately after exhaustive exercise (E0), 24 hours after exhaustive exercise (E24), 48 hours after exhaustive exercise (E48), immediately after blunt trauma (D0), 24 hours after blunt trauma (D24), 48 hours after blunt trauma (D48). All groups of rats were killed and samped respectively at different time points specified above, and the right gastrocnemius muscle was taken, which was divided into two parts, one for mRNAs of, Lamp-2, BNIP3 and NIX by real-time fluorescent quantitative PCR, and the other for p62 protein by Western blotting. Results: (1) Compared with group C, mRNA levels of p62, Lamp-2 and NIX in group E48 were significantly increased after exhaustive exercise(P<0.05), suggesting that autophagy increased in 48h after exhaustive exercise. (2) Compared with group C, p62mRNA and Lamp-2 mRNA levels were significantly increased immediately after blunt trauma(P<0.05) and decreased significantly in 48h after blunt trauma(P<0.05), suggesting that autophagy activity was enhanced immediately after blunt trauma and decreased in 48h after injury. Conclusions: Generally, there were differences at each recovery phase between blunt trauma and exhausted exercise models, and the basal autophagy factors and mitochondrial autophagy factors were also inconsistent. Basal autophagy factors p62 and Lamp-2 increased significantly 48 hours after eccentric exhaustive exercise and immediately after blunt trauma. Mitochondrial autophagy factor BNIP3 did not increase after exhaustive exercise and blunt trauma, but NIX only increased after exhaustive exercise. Its molecular mechanism needs to be further studied. Level of Evidence III; Therapeutic Studies Investigating the Results of Treatment.

RESUMEN Objetivo: Estudiar los cambios temporales de los factores relacionados con la autofagia en el músculo esquelético de ratas tras el ejercicio exhaustivo y el traumatismo contuso. Métodos: Se dividieron 42 ratas SD macho en 7 grupos con 6 ratas en cada grupo: grupo de control silencioso (C), inmediatamente después del ejercicio exhaustivo (E0), 24 horas después del ejercicio exhaustivo (E24), 48 horas después del ejercicio exhaustivo (E48), inmediatamente después de un traumatismo contuso (D0), 24 horas después de un traumatismo contuso (D24), 48 horas después de un traumatismo contuso (D48). Todos los grupos de ratas fueron sacrificados y rotulados, respectivamente, en diferentes momentos especificados anteriormente, y se extrajo el músculo gastrocnemio derecho, dividido en dos partes, una para los ARNm Lamp-2, BNIP3 y NIX mediante PCR cuantitativa fluorescente en tiempo real, y la otra para la proteína p62 mediante Western blotting. Resultados: (1) En comparación con el grupo C, los niveles de ARNm de p62, Lamp-2 y NIX en el grupo E48 aumentaron significativamente tras el ejercicio exhaustivo (P<0,05), lo que sugiere que la autofagia aumentó en las 48 horas posteriores al ejercicio exhaustivo. (2) En comparación con el grupo C, los niveles de ARNm de p62 ARNm y Lamp-2 aumentaron significativamente inmediatamente después del traumatismo contuso (P<0,05) y disminuyeron significativamente a las 48 horas después del traumatismo contuso (P<0,05), lo que sugiere que la actividad de autofagia aumentó inmediatamente después del traumatismo contuso y disminuyó a las 48 horas después de la lesión. Conclusión: En general, hubo diferencias en cada fase de recuperación entre los modelos de traumatismo contuso y ejercicio exhaustivo, y los factores de autofagia basal y los factores de autofagia mitocondrial también fueron inconsistentes. Los factores de autofagia basal p62 y Lamp-2 aumentaron significativamente 48 horas después del ejercicio excéntrico exhaustivo e inmediatamente después del traumatismo contuso. El factor de autofagia mitocondrial BNIP3 no aumentó tras el ejercicio exhaustivo y el traumatismo contuso, pero NIX sólo aumentó tras el ejercicio exhaustivo. Su mecanismo molecular debe investigarse con más detalle. Nivel de Evidencia III; Estudios Terapéuticos que Investigan los Resultados del Tratamiento.

RESUMO Objetivo: Estudar as alterações temporais dos fatores relacionados à autofagia no músculo esquelético de ratos após exercício exaustivo e trauma contuso. Métodos: Quarenta e dois ratos machos SD foram divididos em 7 grupos com 6 ratos em cada grupo: Grupo de controle silencioso (C), imediatamente após o exercício exaustivo (E0), 24 horas após o exercício exaustivo (E24), 48 horas após o exercício exaustivo (E48), imediatamente após o trauma contuso (D0), 24 horas após o trauma contuso (D24), 48 horas após o trauma contuso (D48). Todos os grupos de ratos foram mortos e rotulados, respectivamente, em diferentes momentos especificados acima, e o músculo gastrocnêmio direito foi retirado, dividido em duas partes, uma para mRNAs de Lamp-2, BNIP3 e NIX por PCR quantitativo fluorescente em tempo real, e a outra para a proteína p62 por imunotransferência. Resultados: (1) Em comparação com o grupo C, os níveis de mRNA de p62, Lamp-2 e NIX no grupo E48 aumentaram significativamente após o exercício exaustivo (P<0,05), sugerindo que a autofagia aumentou em 48 horas após o exercício exaustivo. (2) Em comparação com o grupo C, os níveis de mRNA de p62mRNA e Lamp-2 foram significativamente aumentados imediatamente após o trauma contuso (P<0,05) e diminuíram significativamente em 48 horas após o trauma contuso (P<0,05), sugerindo que a atividade de autofagia foi aumentada imediatamente após o trauma contuso e diminuiu em 48 horas após a lesão. Conclusão: Houve, via de regra, diferenças em cada fase de recuperação entre os modelos de trauma contuso e de exercício exaustivo, sendo que os fatores de autofagia basal e os fatores de autofagia mitocondrial também foram inconsistentes. Os fatores de autofagia basal p62 e Lamp-2 aumentaram significativamente 48 horas após o exercício excêntrico exaustivo e imediatamente após o trauma contuso. O fator de autofagia mitocondrial BNIP3 não aumentou após o exercício exaustivo e o trauma contuso, mas o NIX aumentou somente após o exercício exaustivo. Seu mecanismo molecular precisa ser investigado com mais detalhes. Nível de Evidência III; Estudos Terapêuticos que Investigam os Resultados do Tratamento.

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The cheese after processing, generates whey, which is a residue that has potential benefit to human health. However, there are still few studies that seek to evaluate the composition and potential benefits of goat milk whey, even though it is a promising dairy source. Despite this, the large-scale generation of this waste can favor the environmental impact when improperly disposed of. Given this, the use of all content of dairy production can reverse this impact and increase the income of the dairy industry. Thus, this research prepared a powdered product based on goat's milk whey from the spray drying technique and evaluate its physicochemical composition by chemical analytical methods and protein profile through polyacrylamide gel electrophoresis. The elaborated product had a higher carbohydrate content than protein, and the identification of protein fractions showed that the most expressive bands represented beta-lactoglobulin and alpha-lactoalbumin. Therefore, the elaborated product has the potential to generate novel products for human consumption and with potential health benefits.

O queijo após processado gera o soro de leite, sendo este um resíduo que possui potencial benefício à saúde humana. No entanto, ainda são poucos os estudos que buscam avaliar a composição e os potenciais benefícios do soro de leite de cabra, mesmo esta sendo uma fonte láctea promissora. Apesar disso, a geração em larga escala deste resíduo pode favorecer o impacto ambiental quando descartado inadequadamente. Em vista disso, a utilização de todo conteúdo gerado na produção de lácteos pode reverter este impacto e aumentar o rendimento da indústria de laticínios. Diante disso, é importante buscar o desenvolvimento de novos produtos para favorecer a redução do impacto gerado. Assim, este trabalho teve como objetivo elaborar um produto em pó, à base de soro de leite de cabra a partir da secagem pela técnica de spray drying e avaliar sua composição físico-química por métodos químicos analíticos e perfil proteico através da eletroforese em gel de poliacrilamida. O produto elaborado apresentou maior teor de carboidratos do que proteína, e a identificação das frações proteicas mostrou que as bandas mais expressivas representavam beta-lactoglobulina e alfa-lactoalbumina. Portanto, o produto elaborado apresenta potencial para geração de novos produtos para consumo humano e com prováveis benefícios à saúde.

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Schistosomiasis is a neglected chronic parasitic tropical disease caused by the trematode worm Schistosoma spp., common in developing countries. Pharmacological treatments are available, but they are not effective due to the global epidemiological situation. A preventive vaccine could effectively contribute to reduce the infection. Among a number of antigens, the tegumental protein Sm29 from adult worm Shistosoma mansoni has been identified as a promising vaccine candidate. The gene Sm29 was cloned with 393 nucleotides, excluding a signal peptide and the transmembrane domain, to express the protein with 130 amino acids, approximately 18 kDa, with theoretical pI 6.5. Our objectives is to obtain the recombinant Sm29 protein expressed in Escherichia coli without histidine tag. Therefore, we must optimize the Sm29 obtaining processe, upstream and downstream, in order to design the industrial process, improving the yield and quality of the product to be used in clinical trials. Cells of E. coli BL21(DE3)_pET28_Sm29 were cultivated in bioreactor for Sm29 expression and they were separated by centrifugation. The cells were resuspended in buffer and lysed in French Press. The inclusion bodies (IB) were recovered by centrifugation and we studied the clarification of IB by washing with different solutions and using different centrifugation forces. The solubilization of IB was tested with 8 M Urea under different pH conditions. After the treatments, the protein profiles were analyzed by SDS-PAGE, to verify the presence of the expected band of ~18 kDa and the removal of contaminants. The washing solutions and the lower centrigugation speed helped to clarify the material, without causing losses. The pH of the solubilization solutions interfere with protein recovery, determining to work above pH 7.5, to seek the best balance between protein recovery and contaminant elimination. To meet regulatory requirements in the industrial process for vaccine production, we aim to replace purification by metal affinity chromatography (IMAC), allowed by the presence of the his-tag, added to the antigen as a purification strategy. Thus, the purification of rSm29 by IMAC was compared with studies of ion exchange chromatography, evaluating the binding of denatured or renatured proteins to the resins. It was found that the initial IB clarification parameters and solubilization conditions interfere in the chromatography and dialysis stages. It was determined that. to date. the best condition of binding is the renatured protein to the anion exchange resin, Q-Sepharose. As we identified an alternative purification method, we cloned the Sm29 gene without the his tag code to express the protein in BL21(DE3). Furthermore, the Sm29 gene was optimized for E. coli codon usage. The optimized gene was also cloned for expression in BL21(DE3), to evaluate whether it would modify the protein synthesis in terms of amount of expression and solubility. The first tests suggest that the amount of protein expression is similar to that obtained with the original gene. Tests of solubilization by pressurization are planned to analyze whether possible structural modifications in rSm29 may improves protein recovery.

A esquistossomose é uma doença tropical parasitária crônica negligenciada, causada pelo verme trematódeo Schistosoma spp., comum em países em desenvolvimento. Os tratamentos farmacológicos disponíveis não são eficazes devido à situação epidemiológica global. Uma vacina preventiva poderia contribuir eficazmente para a reduzir a infecção. Entre uma série de antígenos, a proteína tegumentar Sm29 do verme adulto Shistosoma mansoni foi identificada como uma promissora candidata a vacina. O gene Sm29 foi clonado com 393 nucleotídeos, excluindo um peptídeo sinal e o domínio transmembrana, para expressar a proteína com 130 aminoácidos, aproximadamente 18 KDa, com pI teórico 6,5. Nosso objetivo é obter a proteína Sm29 recombinante expressa em Escherichia coli sem cauda de histidina. Para tanto, devemos otimizar os processos de fermentação dos clones e os processos de purificação, para então, desenhar o processo industrial para melhorar o rendimento e a qualidade do produto a ser utilizado em ensaios clínicos. Células do clone E. coli BL21(DE3)_pET28_Sm29 foram cultivadas em biorreator para expressão de rSm29, separadas por centrifugação, ressuspensas em tampão e lisadas em “French Press”. Os corpos de inclusão (CI) foram recuperados por centrifugação e estudamos a etapa de clarificação dos CI por lavagens com diferentes soluções e forças de centrifugação. Testamos a solubilização dos CI com Ureia 8 M sob diferentes condições de pH. Após os tratamentos, analisamos os perfis proteicos por SDS-PAGE, verificando a banda esperada de ~18 kDa e a remoção de contaminantes. As soluções utilizadas na lavagem e a menor velocidade de centrifugação clarificam o material, sem causar perdas da proteína de interesse. O pH da solução de solubilização interfere na recuperação da proteína, determinando trabalhar com pH acima de 7,5 para buscar o melhor equilíbrio entre recuperação proteica e eliminação de contaminantes. Para atender aos requisitos regulatórios de processo industrial na produção de vacinas, temos o objetivo de substituir a purificação por cromatografia de afinidade a metal (IMAC) para poder remover a cauda de histidina, adicionada ao antígeno como estratégia de purificação. Assim, comparamos a purificação da rSm29 por IMAC com estudos de purificação por trocas iônicas, avaliando a ligação da proteína desnaturada ou renaturada com as resinas. Verificamos que os parâmetros iniciais de clarificação da CI e as condições de solubilização interferem nas etapas de cromatografia e diálise. Determinamos que a melhor condição, até o momento, é a ligação da proteína renaturada à resina de troca aniônica, Q-Sepharose. Identificado um método alternativo de purificação, clonamos o gene Sm29 sem a cauda de histidina e expressamos a proteína em BL21(DE3). Além disso, o gene Sm29 foi otimizado para uso de códons de E. coli. Um gene otimizado foi clonado para expressão em BL21(DE3), para avaliarmos se modificaria a estrutura da proteína durante a síntese da cadeia primária, em termos de quantidade de expressão e solubilidade. Os primeiros testes sugerem que a expressão é semelhante à obtida com o gene original. Testes de solubilização por pressurização estão planejados para analisar se a possível modificação estrutural na rSm29 melhoraria a recuperação do antígeno.

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Abstract Livestock is a fundamental part of the agriculture industry in Pakistan and contributes more than 11.53% to GDP. Among livestock species, the buffaloes are regarded as the black gold of Pakistan. Being the highest milk producers globally, Nili-Ravi buffaloes are the most famous ones. Buffaloes are affected by many endemic diseases, and "Hemorrhagic septicemia" (HS) is one of them. This study was designed to ascertain the effects of experimental exposure ofP. multocida B:2 (oral) and its immunogens, i.e., LPS (oral and intravenous) and OMP (oral and subcutaneous) on reproductive hormonal profiles in Nili-Ravi buffaloes. Repeated serum samples were collected from the jugular vein of experimental animals for 21 days (0, 02, 04, 08, 12, 16, 20, 24, 36, 48, 72, 120, 168, 216, 264, 360, 456 and 504 hours). Hormonal assays to determine the serum concentrations of Gonadotropin-releasing hormone (GnRH), Follicle-stimulating hormone (FSH), Luteinizing hormone (LH), Estrogen (E2) and progesterone (P4) were performed using (MyBioSource) commercial Elisa kits. The hormonal profile of all treatment groups of the buffalo heifers exhibited significant (P<0.05) variations as compared to the control group (G-1). These results indicate suppression in Nili-Ravi buffaloes' reproductive hormonal profile on exposure to P. multocida B:2 and its immunogens. This influence warrants that exposure to H.S may be a possible reason for delayed puberty and poor reproduction performance in Nili-Ravi buffaloes.

Resumo A pecuária é uma parte fundamental da indústria agrícola no Paquistão e contribui com 11,53% do PIB nacional. Entre as espécies de gado, os búfalos são considerados o ouro negro do Paquistão. Sendo os maiores produtores de leite em todo o mundo, os búfalos Nili-Ravi são os mais famosos. Os búfalos são afetados por muitas doenças endêmicas, entre as quais a "septicemia hemorrágica" (SH). Este estudo busca verificar os efeitos da exposição experimental de P. multocida B:2 (oral) e seus imunógenos, ou seja, LPS (oral e intravenoso) e OMP (oral e subcutâneo), nos perfis hormonais reprodutivos em búfalos Nili-Ravi. Amostras de soro repetidas foram coletadas da veia jugular de animais experimentais por 21 dias (0, 2, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 36, 48, 72, 120, 168, 216, 264, 360, 456 e 504 horas). Os ensaios hormonais para determinar as concentrações séricas do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH), hormônio foliculoestimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH), estrogênio (E2) e progesterona (P4) foram realizados usando kits comerciais Elisa (MyBioSource). O perfil hormonal de todos os grupos de tratamento das novilhas bubalinas apresentou variações significativas (P < 0,05) em relação ao grupo controle (G-1). Esses resultados indicam supressão no perfil hormonal reprodutivo de búfalos Nili-Ravi na exposição a P. multocida B:2 e seus imunógenos. Essa influência garante que a exposição à SH possa ser uma possível razão para o atraso da puberdade e o baixo desempenho reprodutivo em búfalos Nili-Ravi.

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Abstract Livestock is a fundamental part of the agriculture industry in Pakistan and contributes more than 11.53% to GDP. Among livestock species, the buffaloes are regarded as the black gold of Pakistan. Being the highest milk producers globally, Nili-Ravi buffaloes are the most famous ones. Buffaloes are affected by many endemic diseases, and "Hemorrhagic septicemia" (HS) is one of them. This study was designed to ascertain the effects of experimental exposure ofP. multocida B:2 (oral) and its immunogens, i.e., LPS (oral and intravenous) and OMP (oral and subcutaneous) on reproductive hormonal profiles in Nili-Ravi buffaloes. Repeated serum samples were collected from the jugular vein of experimental animals for 21 days (0, 02, 04, 08, 12, 16, 20, 24, 36, 48, 72, 120, 168, 216, 264, 360, 456 and 504 hours). Hormonal assays to determine the serum concentrations of Gonadotropin-releasing hormone (GnRH), Follicle-stimulating hormone (FSH), Luteinizing hormone (LH), Estrogen (E2) and progesterone (P4) were performed using (MyBioSource) commercial Elisa kits. The hormonal profile of all treatment groups of the buffalo heifers exhibited significant (P 0.05) variations as compared to the control group (G-1). These results indicate suppression in Nili-Ravi buffaloes' reproductive hormonal profile on exposure to P. multocida B:2 and its immunogens. This influence warrants that exposure to H.S may be a possible reason for delayed puberty and poor reproduction performance in Nili-Ravi buffaloes.

Resumo A pecuária é uma parte fundamental da indústria agrícola no Paquistão e contribui com 11,53% do PIB nacional. Entre as espécies de gado, os búfalos são considerados o ouro negro do Paquistão. Sendo os maiores produtores de leite em todo o mundo, os búfalos Nili-Ravi são os mais famosos. Os búfalos são afetados por muitas doenças endêmicas, entre as quais a septicemia hemorrágica (SH). Este estudo busca verificar os efeitos da exposição experimental de P. multocida B:2 (oral) e seus imunógenos, ou seja, LPS (oral e intravenoso) e OMP (oral e subcutâneo), nos perfis hormonais reprodutivos em búfalos Nili-Ravi. Amostras de soro repetidas foram coletadas da veia jugular de animais experimentais por 21 dias (0, 2, 4, 8, 12, 16, 20, 24, 36, 48, 72, 120, 168, 216, 264, 360, 456 e 504 horas). Os ensaios hormonais para determinar as concentrações séricas do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH), hormônio foliculoestimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH), estrogênio (E2) e progesterona (P4) foram realizados usando kits comerciais Elisa (MyBioSource). O perfil hormonal de todos os grupos de tratamento das novilhas bubalinas apresentou variações significativas (P 0,05) em relação ao grupo controle (G-1). Esses resultados indicam supressão no perfil hormonal reprodutivo de búfalos Nili-Ravi na exposição a P. multocida B:2 e seus imunógenos. Essa influência garante que a exposição à SH possa ser uma possível razão para o atraso da puberdade e o baixo desempenho reprodutivo em búfalos Nili-Ravi.

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Resumo Objetivo Estimar a associação entre baixa ingestão de proteínas e mortalidade em pessoas idosas. Métodos Estudo prospectivo realizado com 621 pessoas idosas da cidade de Viçosa (Minas Gerais), município de médio porte no Brasil. A ingestão de proteínas foi avaliada na linha de base (2009) pelo recordatório de ingestão habitual e foi utilizada a classificação de ingestão de proteínas proposta pela Sociedade Brasileira de Nutrição Parenteral e Enteral. Os dados de mortalidade foram coletados no período de acompanhamento (2009 a 2018) através do Sistema de Informações sobre Mortalidade. Modelos de regressão de Cox foram aplicados para estimar a associação independente entre ingestão total de proteínas e mortalidade, e estimativas de hazard ratio e seus respectivos intervalos de confiança de 95% foram calculados. Resultados Entre os 621 participantes do estudo, 52,7% eram do sexo feminino e a prevalência de baixa ingestão proteica foi de 60,9%. Ao longo dos 9 anos de acompanhamento ocorreram 154 óbitos (23,3%). No modelo ajustado, pessoas idosas com baixa ingestão de proteínas apresentaram maior risco de morte [HR: 1,72; IC 95%: 1,05 - 2.82]. Conclusão A baixa ingestão de proteínas pode aumentar o risco de morte em pessoas idosas.

Abstract Objective To estimate the association between low protein intake and mortality in older adults. Methods Prospective study carried out with 621 older adults in a medium-sized city (Viçosa, Minas Gerais) in Brazil. Protein intake was assessed at baseline (2009) by the usual intake recall and the protein intake classification was used as proposed by the Brazilian Society of Parenteral and Enteral Nutrition. Mortality data were collected in the follow-up period (2009 to 2018) from the Mortality Information System. Cox regression models were applied to estimate the independent association between total protein intake and mortality, and Hazard Ratio estimates and their respective 95% confidence intervals were calculated. Results Among the 621 participants in the study, 52.7% were female, and the prevalence of low protein intake was 60.9%. Over the 9 years of follow-up, there were 154 deaths (23,3%). In the adjust models, older adults with low protein intake showed increased risk of death [HR: 1.72; 95% CI: 1.05 - 2.82]. Conclusion Low protein intake may increase the risk of death in the older adults.

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Objetivo: caracterizar clínica y epidemiológicamente a los pacientes con enfermedad pulmonar obstructiva crónica. Métodos: estudio descriptivo retrospectivo trasversal, que incluyó pacientes adultos con diagnóstico de enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un hospital universitario de Medellín. Material y métodos: la fuente de información fue secundaria a través de historias clínicas, el análisis se realizó en el programa Jamovi, empleando un análisis univariado. Resultados y discusión: se incluyeron 552 pacientes, la edad mediana fue 76 años con predominio del sexo femenino (56.7%). Respecto a la exposición a sustancias tóxicas respiratorias importantes en el desarrollo de la enfermedad, 24.1% consumían cigarrillo y 23% exposición a biomasa. Al momento del ingreso hospitalario 17.9% fueron clasificados con disnea grado IV; 74.1% recibió beta-agonistas de corta acción y antimuscarínicos de corta acción 60%; 11.6% requirió ingreso a las unidades de cuidados intensivos o especiales y 7.8% fallecieron durante la hospitalización. Conclusiones: se evidencia subdiagnóstico espirométrico de la enfermedad que puede estar relacionado con las limitaciones económicas, tecnológicas y de recurso humano capacitado, lo cual afecta el adecuado diagnóstico y manejo de la enfermedad, así como impacta la calidad de vida de los pacientes.

Objective: clinical and epidemiological characterization of patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Methods: a retrospective, cross-sectional, descriptive study, which included adult patients with a diagnosis of COPD in a university hospital in Medellín. Data sources were secondary, based on medical records. The Jamovi program was used to perform a univariate analysis. Results and discussion: 552 patients were included. Median age was 76 years with a female predominance (56.7%). Regarding exposure to major respiratory toxic substances implicated in the development of the disease, 24.1% were tobacco smokers and 23% were exposed to biomass smoke. At the time of hospital admission,17.9% were classified as having grade 4 dyspnea; 74.1% received short acting beta-agonists and 60% short-acting antimuscarinics,11.6% required intensive care unit or special care unit admission, and 7.8% died in hospital. Conclusions: under-diagnosis of COPD by spirometry may be related to economic, technological, and trained human resource limitations, which affect adequate diagnosis and management of the disease, as well as patient ́s quality of life.

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Introducción: Algunos estudios han encontrado relación entre exceso de peso y baja fuerza de prensión relativa. En países de ingresos socioeconómicos medianos y bajos hay pocas evidencias que evalúen la fuerza prensil y su relación con la composición corporal en población pediátrica. Objetivo: Evaluar la correlación entre la fuerza prensil y la composición corporal de escolares de Bucaramanga, Colombia. Materiales y métodos: Se realizó un estudio piloto de corte transversal, analítico, correlacional. Participaron niños en edad escolar de Bucaramanga, Colombia. Las principales variables dependientes fueron masa muscular, agua corporal total, proteínas (kg) y el porcentaje de grasa corporal. La variable independiente correspondió a la fuerza prensil. Se usó el coeficiente de correlación de Spearman para explorar la relación entre variables. Resultados: El promedio de la fuerza prensil en el total de la muestra fue de 13,8 ± 3,2 Newton. Se encontraron correlaciones positivas y estadísticamente significativas entre la fuerza prensil y la masa musculoesquelética (r = 0,73), agua corporal total (r = 0,73) y proteínas (r = 0,74). Discusión: Nuestros resultados son consistentes con evidencias previas que identifican a la fuerza prensil como un indicador de la composición corporal, específicamente en las variables de masa musculoesquelética y proteínas. Conclusión: Los niños en el tercil más alto de fuerza prensil presentan los terciles más altos de masa musculoesquelética, agua corporal total y proteínas.

Introduction: Some studies have found a relationship between excess weight and low relative grip strength. In countries with medium and low socioeconomic income, there is little evidence evaluating grip strength and its relationship with body composition in the pediatric population. Objective: To evaluate the correlation between grip strength and body composition of schoolchildren from Bucaramanga, Colombia. Materials and Methods: A cross-sectional, analytical, correlational pilot study was conducted. Schoolchildren from Bucaramanga, Colombia participated. The main dependent variables were muscle mass, total body water, protein (kg), and percentage of body fat. The independent variable corresponded to the prehensile force. Spearman's Correlation Coefficient was used to explore the relationship between variables. Results: The average prehensile force in the total sample was 13.8±3.2 Newton. Positive and statistically significant correlations were found between grip strength and musculoskeletal mass (r=0.73), total body water (r=0.73), and protein (r=0.74). Discussion: Our results are consistent with previous evidence that identifies grip strength as an indicator of body composition, specifically in the variables of musculoskeletal mass and protein. Conclusion: Children in the highest tertile of prehensile strength present the highest tertiles of skeletal muscle mass, total body water, and protein.

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ABSTRACT Patients with inflammatory bowel disease (IBD) are prone to develop kidney injury. Renal involvement in IBD patients is usually diagnosed by the measurement of serum creatinine and the estimation of the glomerular filtration rate. We describe a patient with IBD who presented with large fluctuations in his serum creatinine level (~3.0-fold) without significant histologic abnormalities and with a normal cystatin C level. This appears to be related to a high-protein diet and intermittent fasting. Even though the impact of a high-protein diet on mild elevations of the serum creatinine level has been described, large fluctuations in serum creatinine from diet alone, as seen in this case, have never been reported, raising the question about the potential contribution of inflamed bowel on gut absorption or metabolism of creatinine. This case highlights the importance of a detailed history, including the dietary habits, when encountering a patient with increased serum creatinine level, and careful interpretation of serum creatinine in a patient with a creatinine high-protein diet or underlying IBD.

RESUMO Pacientes com doença inflamatória intestinal (DII) são propensos a desenvolver lesão renal. O envolvimento renal em pacientes com DII é geralmente diagnosticado pela medição da creatinina sérica e pela estimativa da taxa de filtração glomerular. Descrevemos um paciente com DII que apresentou grandes flutuações em seu nível de creatinina sérica (~3,0 vezes) sem anormalidades histológicas significativas e com nível normal de cistatina C. Isso parece estar relacionado a uma dieta rica em proteínas e jejum intermitente. Ainda que o impacto de uma dieta rica em proteínas em elevações leves do nível de creatinina sérica tenha sido descrito, nunca foram relatadas grandes flutuações na creatinina sérica apenas devido à dieta, como observado neste caso, o que levanta a questão sobre a possível contribuição do intestino inflamado na absorção intestinal ou no metabolismo da creatinina. Esse caso destaca a importância de um histórico detalhado, incluindo os hábitos alimentares, ao se deparar com um paciente com nível de creatinina sérica aumentado, e a interpretação cuidadosa da creatinina sérica em um paciente com dieta rica em proteínas ou DII subjacente.

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Abstract Chromatin remodeling enzymes are important "writers'', "readers'' and "erasers'' of the epigenetic code. These proteins are responsible for the placement, recognition, and removal of molecular marks in histone tails that trigger structural and functional changes in chromatin. This is also the case for histone deacetylases (HDACs), i.e., enzymes that remove acetyl groups from histone tails, signaling heterochromatin formation. Chromatin remodeling is necessary for cell differentiation processes in eukaryotes, and fungal pathogenesis in plants includes many adaptations to cause disease. Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid. is a nonspe-cific, necrotrophic ascomycete phytopathogen that causes charcoal root disease. M. phaseolina is a frequent and highly destructive pathogen in crops such as common beans (Phaseolus vulgaris L.), particularly under both water and high temperature stresses. Here, we evaluated the effects of the classical HDAC inhibitor trichostatin A (TSA) on M. phaseolina in vitro growth and virulence. During inhibition assays, the growth of M. phaseolina in solid media, as well as the size of the microsclerotia, were reduced (p <0.05), and the colony morphology was remark-ably affected. Under greenhouse experiments, treatment with TSA reduced (p <0.05) fungal virulence in common bean cv. BAT 477. Tests of LIPK, MAC1 and PMK1 gene expression during the interaction of fungi with BAT 477 revealed noticeable deregulation. Our results provide additional evidence about the role of HATs and HDACs in important biological processes of M. phaseolina.

Resumen Las enzimas remodeladoras de la cromatina son «escritores¼, «lectores¼ y «borradores¼ importantes del código epigenético. Estas proteínas son responsables de la localización, el reconocimiento y la remoción de las marcas moleculares sobre las terminaciones de las histonas que desencadenan cambios funcionales y estructurales en la cromatina. Es el caso de las desacetilasas de histonas (HDAC), enzimas que remueven grupos acetilo de las «colas¼ de las histonas, señalizando la formación de heterocromatina. La anterior es una actividad necesaria en los procesos de diferenciación celular de los eucariotas, y se conoce que la patogénesis fúngica en las plantas requiere de adaptaciones diversas para ocasionar enfermedad. Macrophomina phaseolina (Tassi) Goid. es un ascomiceto fitopatógeno, necrótrofo e inespecífico, causante de la pudrición carbonosa. Este es un hongo frecuente y altamente destructivo en cultivos como fríjol común (Phaseolus vulgaris L.), particularmente bajo estrés hídrico y térmico. En este trabajo evaluamos los efectos del inhibidor de HDAC clásicas tricostatina A (TSA) sobre el crecimiento in vitro y la virulencia de M. phaseolina. El TSA redujo el crecimiento de M. phaseolina en medio sólido y el tamano de los microesclerocios (p < 0,05), lo que afectó la morfología colonial. En invernadero, el tratamiento con TSA disminuyó (p<0,05) la gravedad de la infección en la variedad de frijol BAT 477. La expresión de los genes de patogenicidad LIPK, MAC1 y PMK1 durante la interacción del hongo con la planta reveló una desregulación importante. Estos resultados proporcionan evidencia adicional del papel que cumplen las HDAC en la regulación de procesos biológicos fundamentales de M. phaseolina. © 2023 Asociación Argentina de Microbiología. Publicado por Elsevier Espana, S.L.U.

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Background: Amyloid light chain (AL) amyloidosis is characterized by amyloid fibril deposition derived from monoclonal immunoglobulin light chains, resulting in multiorgan dysfunction. Limited data exist on the clinical features of AL amyloidosis. Objective: This study aims to describe the clinical characteristics, treatments, and outcomes in Colombian patients with AL amyloidosis. Methods: A retrospective descriptive study was conducted at three high-complexity centers in Medellín, Colombia. Adults with AL amyloidosis diagnosed between 2012 and 2022 were included. Clinical, laboratory, histological, treatment, and survival data were analyzed. Results: The study included 63 patients. Renal involvement was most prevalent (66%), followed by cardiac involvement (61%). Multiorgan involvement occurred in 61% of patients. Amyloid deposition was most commonly detected in renal biopsy (40%). Bortezomib-based therapy was used in 68%, and 23.8% received high-dose chemotherapy with autologous hematopoietic stem cell transplantation (HDCT-ASCT). Hematological response was observed in 95% of patients with available data. Cardiac and renal organ responses were 15% and 14%, respectively. Median overall survival was 45.1 months (95% CI: 22.2-63.8). In multivariate analysis, cardiac involvement was significantly associated with inferior overall survival (HR 3.27; 95% CI: 1.23-8.73; p=0.018), HDCT-ASCT had a non-significant trend towards improved overall survival (HR 0.25; 95% CI: 0.06-1.09; p=0.065). Conclusions: In this study of Colombian patients with AL amyloidosis, renal involvement was more frequent than cardiac involvement. Overall survival and multiorgan involvement were consistent with data from other regions of the world. Multivariate analysis identified cardiac involvement and HDCT-AHCT as possible prognostic factors.

Antecedentes: La amiloidosis por amiloide de cadenas ligeras (AL) se caracteriza por el depósito de fibrillas amiloides derivadas de cadenas ligeras de inmunoglobulinas monoclonales, lo que resulta en disfunción multiorgánica. Existen datos limitados sobre las características clínicas de la amiloidosis AL. Objetivo: Este estudio tiene como objetivo describir las características clínicas, tratamientos y desenlaces en pacientes colombianos con amiloidosis AL. Métodos: Se llevó a cabo un estudio descriptivo retrospectivo en tres centros de alta complejidad en Medellín, Colombia. Se incluyeron adultos con diagnóstico de amiloidosis AL entre 2012 y 2022. Se analizaron datos clínicos, de laboratorio, histológicos, de tratamiento y de supervivencia. Resultados: El estudio incluyó 63 pacientes. La afectación renal fue más prevalente (66%), seguida de la afectación cardíaca (61%). El 61% de los pacientes presentaron afectación multiorgánica. El depósito amiloide se detectó con mayor frecuencia en la biopsia renal (40%). El tratamiento basado en bortezomib se utilizó en el 68%, y el 23.8% recibió altas dosis de quimioterapia con trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos (ADQT-TAPH). Se observó respuesta hematológica en el 95% de los pacientes con datos disponibles. La respuesta de órgano cardíaca y renal fue del 15% y 14%, respectivamente. La mediana de la supervivencia global fue de 45.1 meses (IC del 95%: 22.2-63.8). En el análisis multivariado, la afectación cardíaca se asoció significativamente con una supervivencia global inferior (HR 3.27; IC del 95%: 1.23-8.73; p=0.018), ADQT-TAPH mostró una tendencia no significativa hacia una mejora en la supervivencia global (HR 0.25; IC 95%: 0.06-1.09; p=0.065). Conclusiones: En este estudio de pacientes colombianos con amiloidosis AL, la afectación renal fue más frecuente que la afectación cardíaca. La supervivencia global y la afectación multiorgánica fueron consistentes con datos de otras regiones del mundo. El análisis multivariado identificó la afectación cardíaca y ADQT-TAPH como posibles factores pronósticos.

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Contexto: Amiloidose é um grupo de doenças caracterizadas pelo depósito de proteínas fibrilares, denominadas substância amiloide. Podem ser divididas em formas localizadas ou sistêmicas, sendo que dentre as localizadas, a forma nodular é a mais rara. Descrição do caso: Relatamos o caso de amiloidose primária localizada cutânea nodular que se apresentou com nódulos violáceos no dorso, e placas acastanhadas na região cervical há 8 anos sem evidências de envolvimento sistêmico. Discussão: Como cerca de 1% a 7% dos casos de amiloidose nodular localizada cutânea podem evoluir com envolvimento sistêmico, o seguimento dos pacientes faz-se necessário. O tratamento não é obrigatório, a retirada das lesões pode ser feita se o paciente o desejar, contudo as recidivas são frequentes. Conclusões: Mesmo possuindo baixa prevalência, a amiloidose nodular deve ser reconhecida pelo risco de progredir para acometimento sistêmico e associação com discrasias plasmocitárias, como mieloma múltiplo.

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La determinación de proteínas totales es una técnica de rutina utilizada en la industria biofarmacéutica durante los procesos de purificación de derivados plasmáticos y/o producción de proteínas recombinantes; y la elección del método analítico es un paso crítico para la obtención de resultados confiables. En este trabajo se demostró la interferencia de heparina (Hep), un compuesto comúnmente utilizado como excipiente en la formulación de Concentrados de Factores de la Coagulación (CFC), en la determinación de proteínas por el método de Bradford, cuya interferencia no está descripta como tal en los insertos de los kits comerciales de Bradford ni en la Farmacopea Europea. Esta interferencia fue demostrada tanto en soluciones de Albúmina Sérica Bovina (BSA) fortificadas con Hep, como en muestras de CFC. Para una solución de BSA 40 mg %, la concentración límite de Hep que no interfiere en la determinación de proteínas totales fue de 1,6 UI/ml. Cabe destacar que, si se trabaja a un nivel menor de concentración de proteínas, una proteína diferente o mezclas complejas de proteínas, se debe evaluar el grado de interferencia para cada caso particular, pudiéndose utilizar los valores obtenidos en este trabajo como referencia. Alternativamente, se evaluó la neutralización de la Hep con Polybrene (Poly), previo a la determinación de proteínas por Bradford. En el caso de soluciones de BSA, el efecto interferente se revirtió logrando una correcta cuantificación de proteínas, mientras que en las muestras de CFC, la neutralización con Poly no fue efectiva. Por lo tanto, para considerar el uso de Poly, previo a la aplicación del método de Bradford, debe evaluarse cada caso particular según las características de la muestra proteica en estudio. Si esto no es posible, se recomienda la utilización de un método alternativo, por ejemplo, el colorimétrico que utiliza ácido bicinconínico.

Protein quantification in biological samples is a routine assay used in the biopharmaceutical industry during the purification procedures of plasma-derived products and/or recombinant proteins. Thus, choosing the method for this purpose is a critical step to obtaining reliable results. In this work, it was shown that Heparin (Hep), a compound commonly used as an excipient in the formulation step of Coagulation Factor Concentrates (CFC), interferes in protein quantification by the Bradford assay. This interference was proved both in solutions of Hep-fortified Bovine Serum Albumin (BSA) and in CFC samples. For a 40 mg % BSA solution, the Hep concentration which shows no interference in protein quantification is 1.6 IU/ml. It should be noted that a specific analysis must be carried out if working at a lower protein concentration, with a different protein, or with complex protein solutions, so the values obtained in this work can be used as a reference. Alternatively, Hep neutralization with Polybrene (Poly) was evaluated before protein determination by Bradford. In the case of BSA solutions, the interference was reversed and correct protein quantification was achieved, whereas in the CFC samples, the results were unsatisfactory. Until now, Hep interference in the Bradford assay has not been described in the scientific literature, nor listed in the inserts of the commercial kits for protein quantification by this method. It was concluded that for protein samples containing Hep, the choice of an alternative method, such as the one that uses bicinchoninic acid, is the most convenient option to obtain reliable results

Asunto(s)