RESUMEN

The mitochondrial ATP synthase of Polytomella exhibits a peripheral stalk and a dimerization domain built by the Asa subunits, unique to chlorophycean algae. The topology of these subunits has been extensively studied. Here we explored the interactions of subunit Asa3 using Far Western blotting and subcomplex reconstitution, and found it associates with Asa1 and Asa8. We also identified the novel interactions Asa1-Asa2 and Asa1-Asa7. In silico analyses of Asa3 revealed that it adopts a HEAT repeat-like structure that points to its location within the enzyme based on the available 3D-map of the algal ATP synthase. We suggest that subunit Asa3 is instrumental in securing the attachment of the peripheral stalk to the membrane sector, thus stabilizing the dimeric mitochondrial ATP synthase.

Asunto(s)

Proteínas Algáceas/química , Membrana Celular/química , Chlorophyceae/química , ATPasas de Translocación de Protón Mitocondriales/química , Subunidades de Proteína/química , Proteínas Algáceas/genética , Proteínas Algáceas/metabolismo , Secuencias de Aminoácidos , Sitios de Unión , Membrana Celular/metabolismo , Membrana Celular/ultraestructura , Chlorophyceae/enzimología , Chlorophyceae/genética , Chlorophyceae/ultraestructura , Clonación Molecular , Microscopía por Crioelectrón , Escherichia coli/genética , Escherichia coli/metabolismo , Expresión Génica , Vectores Genéticos/química , Vectores Genéticos/metabolismo , ATPasas de Translocación de Protón Mitocondriales/genética , ATPasas de Translocación de Protón Mitocondriales/metabolismo , Modelos Moleculares , Unión Proteica , Conformación Proteica en Hélice alfa , Conformación Proteica en Lámina beta , Dominios y Motivos de Interacción de Proteínas , Multimerización de Proteína , Subunidades de Proteína/genética , Subunidades de Proteína/metabolismo , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/genética , Proteínas Recombinantes/metabolismo