RESUMEN

In the latent pro-form of matrix metalloproteinase 7 (MMP-7), the cysteine residue in the pro-peptide binds the active-site zinc ion. Hence, recombinant active MMP-7 was prepared from pro-MMP-7 by modification of this cysteine residue with a mercuric reagent. In this study, mature MMP-7 was expressed in Escherichia coli as inclusion bodies, solubilized, and refolded with 1 M L-arginine. The purified product was indistinguishable from the one prepared from pro-MMP-7 as assessed by hydrolysis of (7-methoxycoumarin-4-yl)acetyl-L-Pro-L-Leu-Gly-L-Leu-[N(3)-(2,4-dinitrophenyl)-L-2,3-diaminopropionyl]-L-Ala-L-Arg-NH(2).

Asunto(s)

Escherichia coli/genética , Metaloproteinasa 7 de la Matriz/biosíntesis , Metaloproteinasa 7 de la Matriz/aislamiento & purificación , Ingeniería de Proteínas/métodos , Replegamiento Proteico , Proteínas Recombinantes/biosíntesis , Proteínas Recombinantes/aislamiento & purificación , Secuencia de Aminoácidos , Arginina/farmacología , Secuencia de Bases , Escherichia coli/citología , Expresión Génica , Humanos , Concentración de Iones de Hidrógeno , Cuerpos de Inclusión/genética , Metaloproteinasa 7 de la Matriz/química , Metaloproteinasa 7 de la Matriz/metabolismo , Replegamiento Proteico/efectos de los fármacos , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/metabolismo , Solubilidad