RESUMEN
INTRODUCTION: Hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is a widely used therapy, but its success largely depends on the number and quality of stem cells collected. Current evidence shows the complexity of the hematopoietic system, which implies that, in the quality assurance of the apheresis product, the hematopoietic stem cells are adequately characterized and quantified, in which mass cytometry (MC) can provide its advantages in high-dimensional analysis. OBJECTIVE: This research aimed to characterize and enumerate CD45dim/CD34+ stem cells using the MC in apheresis product yields from patients with chronic lymphoid malignant diseases undergoing autologous transplantation at the Abu Dhabi Stem Cells Center. METHODS: An analytical and cross-sectional study was performed on 31 apheresis products from 15 patients diagnosed with multiple myeloma (n = 9) and non-Hodgkin lymphomas (n = 6) eligible for HSCT. The MC was employed using the MaxPar Kit for stem cell immunophenotyping. The analysis was performed manually in the Kaluza and unsupervised by machine learning in Cytobank Premium. RESULTS: An excellent agreement was found between mass and flow cytometry for the relative and absolute counts of CD45dim/CD34+ cells (Bland-Altman bias: -0.029 and -64, respectively), seven subpopulations were phenotyped and no lineage bias was detected for any of the methods used in the pool of collected cells. A CD34+/CD38+/CD138+ population was seen in the analyses performed on four patients with multiple myeloma. CONCLUSIONS: The MC helps to characterize subpopulations of stem cells in apheresis products. It also allows cell quantification by double platform. Unsupervised analysis allows results completion and validation of the manual strategy. The proposed methodology can be extended to apheresis products for purposes other than HSCT.
RESUMEN
Introducción: Las donaciones de sangre constituyen una actividad sanitaria de importancia estratégica, su historia ha evolucionado junto a la del sistema de salud cubano. Objetivo: Describir el comportamiento de las donaciones de sangre desde una perspectiva histórica, según las etapas del desarrollo del sistema sanitario cubano. Métodos: Se realizó una investigación por el método histórico-lógico sobre los antecedentes históricos y la actualidad de las donaciones de sangre. La información se obtuvo mediante la entrevista y las revisiones bibliográfica y documental. Resultados: Durante la seudorepública se fundaron las primeras instituciones de salud para las donaciones y transfusiones de sangre, su administración se fundamentaba en las recolecciones provenientes de los donantes remunerados y familiares. En el período revolucionario se logró un programa de sangre organizado e integrado al sistema de salud, por primera vez unificado y de alcance nacional, con la participación coordinada entre el personal del nivel primario de atención y las organizaciones sociales. Esto permitió el creciente y considerable incremento de la disponibilidad de sangre y el desarrollo de la medicina transfusional, las especialidades médico-quirúrgicas y la industria médico-farmacéutica cubanas. Además, se consolidó la práctica de donar sangre como un acto voluntario. Conclusiones: La donación de sangre en Cuba constituye una actividad trazadora que muestra el desarrollo del sistema sanitario cubano en sus diferentes etapas y es reflejo de la voluntad política del gobierno, el pueblo y sus instituciones(AU)
Introduction: Blood donations are health care activity of a strategic importance. Their history has evolved together with the Cuban health system. Objective: To describe the behaviour of blood donations from a historical perspective according to the development stages of the Cuban health system. Method: It was carried out a research by the logic-historical method on the historical background and the current data on blood donations. The information was collected through interviews and the bibliographic and documentary reviews. Results: During the pseudo-republic times, the first institutions for blood donations and transfusions were created, and their managements was supported with the collections of paid donors and relatives. In the Revolution period, it was achieved an organized blood donation program which was integrated to the health system and for the fist time unified and of national scope, with coordinated participation between the staff of the first level of care and the social organizations. This allowed the significant increase of the availability of blood and the development of the Cuban transfusion medicine, medical-surgical specialties and medical-pharmaceutical industry. In addition, it was strengthen the practice of blood donation as a voluntary act. Conclusions: Blood donation in Cuba is a trace activity that shows the development of the Cuban health system in its different stages and it is a reflection of the political will of the Government, the people and the institutions(AU)
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Sistemas Nacionales de Salud , Medicina Transfusional , Donación de Sangre/historia , Donación de Sangre/métodos , CubaRESUMEN
INTRODUCTION: In several countries, molecular diagnosis of haemophilia A (HA) and B (HB) is hampered by a lack of resources for DNA analysis. The advent of next-generation sequencing (NGS) has enabled gene analysis at a reasonable cost. AIM: Describe a collaboration between Cuban and Spanish researchers to identify candidate variants and investigate the molecular epidemiology of 106 Cuban haemophilia patients using NGS. PATIENTS/METHODS: The molecular analysis protocol included well-established LR-PCR procedures to detect F8 inversions, NGS with a 30-gene panel to sequence F8 and F9, and multiplex ligation-dependent probe amplification to identify large structural variants. RESULTS: One-hundred and thirty-one candidate variants were identified along F8, F9, and VWF; 72 were unique and 28 (39%) had not been previously recorded. Putative variants were identified in 105/106 patients. Molecular characterization enabled confirmation and reclassification of: 90 HA (85%), 15 HB (14%), and one type 2N VWD (1%). Null variants leading to non-production of FVIII or FIX were common in severe HA (64%), moderate HA (74%), and severe HB (60%), whereas missense variants were frequent in mild HA (57%) and moderate or mild HB (83%). Additional variants in VWF were identified in 16 patients. CONCLUSION: This is the first description of the molecular epidemiology of HA and HB in Cuba. Variants identified in index cases will be of value for local implementation of familial studies and prenatal diagnosis using the molecular approaches available in Cuba. The results of this protocolled genetic study improved the accuracy of the clinical diagnosis and will facilitate management of these patients.
Asunto(s)
Hemofilia A , Cuba/epidemiología , Factor VIII/genética , Femenino , Hemofilia A/diagnóstico , Hemofilia A/epidemiología , Hemofilia A/genética , Secuenciación de Nucleótidos de Alto Rendimiento , Humanos , Mutación , Embarazo , TecnologíaRESUMEN
La terapia celular basada en células mesenquimales/estromales se aplica ampliamente en la medicina moderna, aun cuando no todos los mecanismos de supervivencia y diferenciación están identificados. Sin embargo, hace pocos años se comenzaron a encontrar elementos extracelulares que generan nuevos paradigmas. En el presente trabajo se explican las principales características y funciones atribuidas a los exosomas, nanopartículas constituidas por microvesículas secretadas por las células con efecto en la matriz extracelular, y su repercusión como alternativa hacia una medicina regenerativa libre de células. Estas estructuras participan de forma notoria y crucial en la comunicación intercelular, lo que ha supuesto un cambio en el concepto de las funciones y el papel que desempeñan estas vesículas en los organismos vivos, en particular en la restauración de tejidos dañados y la respuesta inflamatoria e inmunológica. Se comentan algunos ejemplos de la repercusión biotecnológica de los exosomas en empresas y el mercado biofarmaceútico(AU)
Mesenchymal/stromal cell ;based therapy is widely applied in modern medicine, even though not all survival and differentiation mechanisms are identified. However, a few years ago, extracellular elements began to be found that generate new paradigms. The present work explains the main characteristics and functions attributed to exosomes, nanoparticles made up of microvesicles secreted by with an effect on the extracellular matrix, and their impact as an alternative towards cell-free regenerative medicine. These structures participate, notoriously and critically, in intercellular communication, which has led to a change in the concept of the functions and role that these vesicles play within living organisms, particularly in the restoration of damaged tissues and the inflammatory and immunological response. Some examples of the exosomes' biotechnological impact on companies and the biopharmaceutical market are discussed(AU)
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Medicina Regenerativa/métodos , Exosomas/fisiología , Células Madre Mesenquimatosas/fisiologíaRESUMEN
Durante los últimos 45 años, el trasplante alogénico de células progenitoras hematopoyéticas ha sido una modalidad de tratamiento cada vez más utilizada en la curación de hemopatías malignas y otras enfermedades genéticas como la drepanocitosis y algunas inmunodeficiencias primarias. Sin embargo, la falta de donantes adecuados, por carecer los pacientes de hermanos que puedan ser histocompatibles, ha hecho necesaria la búsqueda de alternativas en donantes no relacionados para garantizar la eficacia y seguridad del trasplante. Una fuente muy utilizada es la sangre de cordón umbilical (SCU); el primer trasplante con SCU se realizó en 1989 y en los últimos 25 años este tipo de trasplante se ha aplicado ampliamente en los países desarrollados. Los bancos de SCU se han convertido en una reserva de importancia para estos tratamientos y para la terapia celular regenerativa, por sus múltiples ventajas. Contar con un banco público de SCU en Cuba es una necesidad para el desarrollo del Sistema Nacional de Salud que permitiría unir nuestros esfuerzos a la comunidad científica internacional en la lucha por una salud pública mejor para nuestro pueblo y otros pueblos del mundo, en particular para la América Latina(AU)
During the last 45 years, alogenic stem cell transplant has been an every day most used form of treatment for the cure of malignant hemopathies and other genetic disorders such as sickle cell disease and some primary immunodeficiencies. Nevertheless, the lack of adequate donors caused by not having the patients possible histocompatible relatives has made it necessary to look for alternatives in non relateddonors to guarantee the efficacy and security of the transplant. A commonly used source is cord blood (CB); the first transplant was made in 1989 and in the last 25 years it has been widely applied in developed countries. CB banks have become an important reserve for these treatments and for regenerative cell therapy, due to their multiple advantages. Having a public CB bank in Cuba is a need for the development of our National Health System which will allow us to join our efforts with the international scientific community in the struggle for a better health care for our people and other countries of the world, particularly Latin America(AU)
Asunto(s)
Humanos , Trasplante de Células Madre de Sangre del Cordón Umbilical/métodos , Bancos de Sangre/métodosRESUMEN
Durante los últimos 45 años, el trasplante alogénico de células progenitoras hematopoyéticas ha sido una modalidad de tratamiento cada vez más utilizada en la curación de hemopatías malignas y otras enfermedades genéticas como la drepanocitosis y algunas inmunodeficiencias primarias. Sin embargo, la falta de donantes adecuados, por carecer los pacientes de hermanos que puedan ser histocompatibles, ha hecho necesaria la búsqueda de alternativas en donantes no relacionados para garantizar la eficacia y seguridad del trasplante. Una fuente muy utilizada es la sangre de cordón umbilical (SCU); el primer trasplante con SCU se realizó en 1989 y en los últimos 25 años este tipo de trasplante se ha aplicado ampliamente en los países desarrollados. Los bancos de SCU se han convertido en una reserva de importancia para estos tratamientos y para la terapia celular regenerativa, por sus múltiples ventajas. Contar con un banco público de SCU en Cuba es una necesidad para el desarrollo del Sistema Nacional de Salud que permitiría unir nuestros esfuerzos a la comunidad científica internacional en la lucha por una salud pública mejor para nuestro pueblo y otros pueblos del mundo, en particular para la América Latina
During the last 45 years, alogenic stem cell transplant has been an every day most used form of treatment for the cure of malignant hemopathies and other genetic disorders such as sickle cell disease and some primary immunodeficiencies. Nevertheless, the lack of adequate donors caused by not having the patients possible histocompatible relatives has made it necessary to look for alternatives in non relateddonors to guarantee the efficacy and security of the transplant. A commonly used source is cord blood (CB); the first transplant was made in 1989 and in the last 25 years it has been widely applied in developed countries. CB banks have become an important reserve for these treatments and for regenerative cell therapy, due to their multiple advantages. Having a public CB bank in Cuba is a need for the development of our National Health System which will allow us to join our efforts with the international scientific community in the struggle for a better health care for our people and other countries of the world, particularly Latin America
Asunto(s)
Humanos , Bancos de Sangre/métodos , Trasplante de Células Madre de Sangre del Cordón Umbilical/métodosRESUMEN
El éxito en el enfrentamiento a las hemopatías malignas depende de la erradicación de los clones tumorales por medio de la quimioterapia y la radioterapia. Sin embargo, en determinados pacientes la capacidad de curación se muestra limitada, y se requiere la sustitución de la función medular dañada por una nueva hematopoyesis sana, a través del trasplante de médula ósea (TMO). Este tipo de terapia celular puede contar ahora con donantes alternativos obtenidos a partir de la sangre de cordón umbilical (SCU) almacenada en bancos creados en varios países. Se ha comprobado la necesidad de promover un implante más rápido que disminuya la morbimortalidad relacionada con el procedimiento y permita la generalización de su uso, y se han propuesto estrategias basadas en la expansión de las células progenitoras hematopoyéticos (CPH) ex vivo, en cultivos a partir de SCU, lo que permite su uso en trasplantes con bajo contenido celular, y para diferenciar células pertenecientes a diferentes linajes hematopoyéticos, e incluso tejidos, con diferentes objetivos: trasplante hematopoyético, soporte de la recuperación a corto plazo, inmunoterapia, terapia génica, y diferenciación a tejidos mesenquimales. En esta revisión se explica cómo, de un producto habitualmente desechado, la SCU se ha convertido en una fuente de gran interés científico por la facilidad de su colecta, la fuente "ilimitada" de donantes, la calidad biológica de sus células madre cercanas a la época embrionaria y fetal del desarrollo, y la posibilidad de un uso amplio en diferentes estrategias de expansión ex vivo para terapia celular.
Asunto(s)
Humanos , Animales , Células Cultivadas/trasplante , Sangre Fetal/inmunología , Sangre Fetal/trasplante , Células Madre Hematopoyéticas/inmunología , Receptores del Factor Estimulante de Colonias , Trasplante de Células Madre Hematopoyéticas , Técnicas de Cultivo de Célula/métodosRESUMEN
Se informan las alteraciones inmunológicas detectadas en 27 pacientes con hemofilia A tratados con crioprecipitado de producción nacional y no asociadas a la infección por el virus de la inmodeficiencia humana cuendo se compararon con un grupo control de 50 donantes voluntarios de sangre. Se encontró una disminución estadísticamente significativamente (p < 0,05) en el porcentaje de células formadoras de roseta espontánea y un incremento significativo (p <0,01) en la roseta alogénica, también los pacientes mostraron un porcentaje disminuidos de linfocitos T CD4+ (p <0,001) y una relación T4/T8 promedio disminuida (p < 0,01) enn comparación con los controles. En la evaluación funcional, tanto la transformación linfoblástica de los linfocitos T, como la actividad citostóxica de las células NK y K de los pacientes, resultaron disminuidas (p < 0,01) con respecto al grupo control y se observó un incremento significativo en los niveles de IgG (p < 0,05) y de IgM (p < 0,01). Estos resultados indican la existencia de un estado de inmunodeficiencia subclínica en pacientes tratados con crioprecipitado seronegativos al virus de inminodeficeincia humana
Asunto(s)
Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Humanos , Masculino , Femenino , Hemofilia A/inmunología , VIHRESUMEN
Se informan las alteraciones inmunológicas detectadas en 27 pacientes con hemofilia A tratados con crioprecipitado de producción nacional y no asociadas a la infección por el virus de la inmodeficiencia humana cuendo se compararon con un grupo control de 50 donantes voluntarios de sangre. Se encontró una disminución estadísticamente significativamente (p < 0,05) en el porcentaje de células formadoras de roseta espontánea y un incremento significativo (p <0,01) en la roseta alogénica, también los pacientes mostraron un porcentaje disminuidos de linfocitos T CD4+ (p <0,001) y una relación T4/T8 promedio disminuida (p < 0,01) enn comparación con los controles. En la evaluación funcional, tanto la transformación linfoblástica de los linfocitos T, como la actividad citostóxica de las células NK y K de los pacientes, resultaron disminuidas (p < 0,01) con respecto al grupo control y se observó un incremento significativo en los niveles de IgG (p < 0,05) y de IgM (p < 0,01). Estos resultados indican la existencia de un estado de inmunodeficiencia subclínica en pacientes tratados con crioprecipitado seronegativos al virus de inminodeficeincia humana
Asunto(s)
Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Humanos , Masculino , Femenino , Hemofilia A/inmunología , VIHRESUMEN
En 35 donantes sanos (24 hombres y 11 mujeres) se estandarizó una técnica capaz de medir la citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos (CMCDA), utilizando como diana células Chang previamente marcadas con Cr 51. Los índices de citotoxicidad (IC) obtenidos para las relaciones célula efectora/ célula diana 40:1, 20:1, 10:1 y 5:1, fueron los siguientes: 42,98ñ 16,76%; 30,0 ñ 13,11 %; 19,79 ñ 9,47 % y 12,62 ñ 6,61%, respectivamente. No se observaron diferencias significativas al comparar los IC de ambos sexos. Se obtuvo un aumento de la actividad citotóxica después de la depleción de las células adherentes y una amplia variabilidad de la CMCDA entre individuos diferentes
Asunto(s)
Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Humanos , Masculino , Femenino , Citotoxicidad Celular Dependiente de Anticuerpos , Células Asesinas Naturales , Estándares de ReferenciaRESUMEN
En 35 donantes sanos (24 hombres y 11 mujeres) se estandarizó una técnica capaz de medir la citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos (CMCDA), utilizando como diana células Chang previamente marcadas con Cr 51. Los índices de citotoxicidad (IC) obtenidos para las relaciones célula efectora/ célula diana 40:1, 20:1, 10:1 y 5:1, fueron los siguientes: 42,98ñ 16,76%; 30,0 ñ 13,11 %; 19,79 ñ 9,47 % y 12,62 ñ 6,61%, respectivamente. No se observaron diferencias significativas al comparar los IC de ambos sexos. Se obtuvo un aumento de la actividad citotóxica después de la depleción de las células adherentes y una amplia variabilidad de la CMCDA entre individuos diferentes
Asunto(s)
Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Humanos , Masculino , Femenino , Citotoxicidad Celular Dependiente de Anticuerpos , Células Asesinas Naturales , Estándares de ReferenciaRESUMEN
Se estudian 220 muestras de sangre de embarazadas a término y 113 de sangre de cordón umbilical de recién nacidos vivos procedentes de 3 hospitales ginecoobstétricos de Ciudad de La Habana, para determinar la presencia de anticuerpos específicos de las clases IgG e IgM anticitomegalovirus humano (CMV), mediante una técnica de microanálisis inmunoenzimático cuantitativo (ELISA). Se encuentra el 57,7
de embarazadas seropositivas para la IgM y dl 1.08
para la IgM. Se informa que el estudio de la IgM específica en la sangre del cordón umbilical reveló el 0.8
de seropositividad. Se destaca que no se encontró asociación entre la presencia de anticuerpos y las variables de edad, raza, nivel escolar, ocupación y hospital de procedencia de las muestras
Asunto(s)
Embarazo , Recién Nacido , Adolescente , Adulto , Humanos , Femenino , Anticuerpos/inmunología , Inmunoglobulina G/inmunología , Inmunoglobulina M/inmunología , Citomegalovirus/inmunología , Sangre Fetal/inmunología , Ensayo de Inmunoadsorción EnzimáticaRESUMEN
Se informa que en 39 adultos sanos (30 hombres y 9 mujeres) con un promedio de edad de 31 años (rango de 22 a 46 años) se determinó la cifra de rosetas formadas por neutrófilos (RFN) con eritrocitos de carnero sensibilizados con antisuero de la clase IgG antieritrocitos de carnero producido en conejo. Se obtiene una media de 79,5% con una desviación estándar de 9,8% Se señala que estas cifras se corresponden con las comunicadas por otros autores. Se indica que la aplicación de esta técnica en nuestro laboratorio permite establecer los valores de referencia normales de RFN en adultos sanos, la aplicación de la misma a pacientes con infecciones recurrentes, procesos inflamatorios agudos y crónicos y utilizarla en síndromes mieloproliferativos, por lo que abre nuevas posibilidades en el estudio de los mecanismos de la inmunidad inespecífica
Asunto(s)
Adulto , Persona de Mediana Edad , Humanos , Masculino , Femenino , Formación de Roseta , Neutrófilos , Receptores Fc , Inmunoglobulina GRESUMEN
Se informa que en 39 adultos sanos (30 hombres y 9 mujeres) con un promedio de edad de 31 años (rango de 22 a 46 años) se determinó la cifra de rosetas formadas por neutrófilos (RFN) con eritrocitos de carnero sensibilizados con antisuero de la clase IgG antieritrocitos de carnero producido en conejo. Se obtiene una media de 79,5% con una desviación estándar de 9,8% Se señala que estas cifras se corresponden con las comunicadas por otros autores. Se indica que la aplicación de esta técnica en nuestro laboratorio permite establecer los valores de referencia normales de RFN en adultos sanos, la aplicación de la misma a pacientes con infecciones recurrentes, procesos inflamatorios agudos y crónicos y utilizarla en síndromes mieloproliferativos, por lo que abre nuevas posibilidades en el estudio de los mecanismos de la inmunidad inespecífica
Asunto(s)
Adulto , Persona de Mediana Edad , Humanos , Masculino , Femenino , Inmunoglobulina G , Neutrófilos , Receptores Fc , Formación de RosetaRESUMEN
Se estudian 220 muestras de sangre de embarazadas a término y 113 de sangre de cordón umbilical de recién nacidos vivos procedentes de 3 hospitales ginecoobstétricos de Ciudad de La Habana, para determinar la presencia de anticuerpos específicos de las clases IgG e IgM anticitomegalovirus humano (CMV), mediante una técnica de microanálisis inmunoenzimático cuantitativo (ELISA). Se encuentra el 57,7% de embarazadas seropositivas para la IgM y dl 1.08% para la IgM. Se informa que el estudio de la IgM específica en la sangre del cordón umbilical reveló el 0.8% de seropositividad. Se destaca que no se encontró asociación entre la presencia de anticuerpos y las variables de edad, raza, nivel escolar, ocupación y hospital de procedencia de las muestras