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Male mouse meiosis has been traditionally studied using descriptive methods like histological sections and spreading or squashing techniques, which allow the observation of fixed meiocytes in either wildtype or genetically modified mice. For these studies, the sacrifice of the males and the extraction of the testicles are required to obtain the material of study. Other functional in vivo studies include the administration of intravenous or intraperitoneal drugs, or the exposure to mutagenic agents or generators of DNA damage, in order to study their impact on meiosis progression. However, in these studies, the exposure times or drug concentration are important limitations to consider when acknowledging animal welfare. Recently, several approaches have been proposed to offer alternative methodologies that allow the in vitro study of spermatocytes with a considerable reduction in the use of animals. Here we revisit and validate an optimal technique of organotypic culture of fragments of seminiferous tubules for meiotic studies. This technique is a trustable methodology to develop functional studies that preserve the histological configuration of the seminiferous tubule, aim homogeneity of the procedures (the use of the same animal for different study conditions), and allow procedures that would compromise the animal welfare. Therefore, this methodology is highly recommendable for the study of meiosis and spermatogenesis, while it supports the principle of 3R's for animal research.

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INTRODUCTION: Critically ill patients typically develop a catabolic stress state as a result of a systemic inflammatory response (SIRS) that alters clinical-nutritional biomarkers, increasing energy demands and nutritional requirements. OBJECTIVE: To evaluate the status of albumin, prealbumin and transferrin in critically ill patients and the association between these clinical-nutritional parameters with the severity during a seven day stay in intensive care unit (ICU). METHOD: Multicenter, prospective, observational and analytical follow-up study. A total of 115 subjects in critical condition were included in this study. Clinical and nutritional parameters and severity were monitored at admission and at the seventh day of the ICU stay. RESULTS: A significant decrease in APACHE II and SOFA (p < 0.05) throughout the evolution of critically ill patients in ICU. In general, patients showed an alteration of most of the parameters analyzed. The status of albumin, prealbumin and transferrin were below reference levels both at admission and the 7th day in ICU. A high percentage of patients presented an unbalanced status of albumin (71.3%), prealbumin (84.3%) and transferrin (69.0%). At admission, 27% to 47% of patients with altered protein parameters had APACHE II above 18. The number of patients with altered protein parameters and APACHE II below 18 were significantly higher than severe ones throughout the ICU stay (p < 0.01). Regarding the multivariate analysis, low prealbumin status was the best predictor of severity critical (p < 0.05) both at admission and 7th day of the ICU stay. CONCLUSION: The results of the present study support the idea of including low prealbumin status as a severity predictor in APACHE II scale, due to the association found between severity and poor status of prealbumin.

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Introduction: Critically ill patients typically develop a catabolic stress state as a result of a systemic inflammatory response (SIRS) that alters clinical-nutritional biomarkers, increasing energy demands and nutritional requirements. Objective: To evaluate the status of albumin, prealbumin and transferrin in critically ill patients and the association between these clinical-nutritional parameters with the severity during a seven day stay in intensive care unit (ICU). Method: Multicenter, prospective, observational and analytical follow-up study. A total of 115 subjects in critical condition were included in this study. Clinical and nutritional parameters and severity were monitored at admission and at the seventh day of the ICU stay. Results: A significant decrease in APACHE II and SOFA (p < 0.05) throughout the evolution of critically ill patients in ICU. In general, patients showed an alteration of most of the parameters analyzed. The status of albumin, prealbumin and transferrin were below reference levels both at admission and the 7th day in ICU. A high percentage of patients presented an unbalanced status of albumin (71.3%), prealbumin (84.3%) and transferrin (69.0%). At admission, 27% to 47% of patients with altered protein parameters had APACHE II above 18. The number of patients with altered protein parameters and APACHE II below 18 were significantly higher than severe ones throughout the ICU stay (p < 0.01). Regarding the multivariate analysis, low prealbumin status was the best predictor of severity critical (p < 0.05) both at admission and 7th day of the ICU stay. Conclusion: The results of the present study support the idea of including low prealbumin status as a severity predictor in APACHE II scale, due to the association found between severity and poor status of prealbumin (AU)

Antecedentes: los pacientes críticos suelen desarrollar un estado de estrés catabólico que se traduce en una respuesta inflamatoria sistémica (RIS) que altera los biomarcadores clínico-nutricionales, aumentando las necesidades de nutrientes y de energía. Objetivo: evaluar el estatus de albúmina, prealbúmina y transferrina en pacientes críticamente enfermos y la asociación entre estos parámetros clínico-nutricionales con la severidad del paciente durante siete días de estancia en la unidad de cuidados intensivos (UCI). Método: estudio multicéntrico, de seguimiento, prospectivo, observacional y analítico. Un total de 115 sujetos en estado crítico fueron incluidos en el estudio. Los parámetros clínico-nutricionales y la gravedad clínica fueron controlados al ingreso y al séptimo día de estancia en UCI. Resultados: una disminución significativa en la gravedad del paciente (p < 0.05) fue registrada a lo largo de la evolución de la estancia en la UCI. En general, los pacientes mostraron una alteración de la mayoría de los parámetros analizados. El estatus de albúmina, prealbúmina y transferrina se situaron por debajo de los niveles de referencia tanto en la admisión como a los 7 días en UCI. Un alto porcentaje de pacientes presentó una alteración de los niveles de albúmina (71.3%), prealbúmina (84.3%) y transferrina (69.0%). Al ingreso, entre el 27 y 47 por ciento de pacientes con parámetros proteicos alterados presentaron un APACHE II por encima de 18. Los pacientes con parámetros proteicos alterados y APACHE II por debajo de 18 fueron significativamente más altos que los más graves y aumentaron a lo largo de la estancia en UCI (p < 0.01). En cuanto al análisis multivariado, niveles bajos de prealbúmina fueron el mejor predictor de severidad crítica (p < 0.05) tanto en la admisión como a los 7 días de estancia en la UCI. Conclusión: los resultados del presente estudio apoyan la idea de incluir la prealbúmina como predictor de la gravedad dentro de la escala APACHE II debido a la asociación encontrada entre la gravedad y un estatus pobre de prealbúmina (AU)

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BACKGROUND: trauma and severe infections cause remarkable metabolic changes in patient with SIRS from an adaptive response aimed to control the underlying disease, repairing damaged tissue, and to synthesize substrates. If the attack is intense and sustained and the patient has a compromised nutritional status, can evolve into multiple organ failure and death. OBJECTIVE: assessment of nutritional proteic status and the involvement of proteins and inflammatory factors in critically ill patients. METHOD: multicenter observational analytical study in critical ill patients at the admission in ICU. RESULTS AND DISCUSSION: patients showed disturbances in clinical nutritional parameters which confirm their hypercatabolic situation, showing malnutrition state at admission, where 42.9% had plasma levels below the reference prealbumin. Amino acid profile was situated below the reference values and 99% of patients had low plasma transferrin. Significant differences were observed in total protein, ferritin and transferrin parameters adjusted by CRP levels, being higher when patients presented high inflammation in the case of ferritin and the opposite for the rest of parameters. Adjusting APACHE and SOFA scores according to low, medium and high severity, results showed significant differences in creatinine, urea, and transferrin, being lower at high severity grade for the last one. CONCLUSION: critical illness is characterized by a high degree of stress and accelerated degradation of proteins that cause malnutrition, systemic inflammation and organ dysfunction, with a significant association between albumin, ferritin and transferrin.

Antecedentes: el trauma y las infecciones severas causan cambios metabólicos notables en los pacientes con SRIS como una respuesta adaptativa dirigida a controlar la enfermedad subyacente, la reparación del tejido dañado y para sintetizar sustratos. Si el ataque es intenso y sostenido y el paciente tiene un estado nutricional comprometido puede evolucionar a insuficiencia orgánica múltiple y muerte. Objetivo: evaluación del estado nutricional proteico y la participación de las proteínas y los factores inflamatorios en pacientes críticamente enfermos. Método: estudio analítico observacional multicéntrico en pacientes enfermos críticos en la admisión en la UCI. Resultados y discusión: los pacientes mostraron alteraciones en los parámetros nutricionales clínicos que confirman su situación hipercatabólica, mostrando malnutrición a la admisión en UCI, donde el 42,9% tenían niveles plasmáticos de prealbúmina por debajo de la referencia. Los aminoácidos se encuentran por debajo de los valores de referencia y el 99% de los pacientes presentaron bajos niveles plasmáticos de transferrina. Se observaron diferencias significativas en los niveles de proteína total, ferritina y transferrina ajustados por los niveles de PCR, siendo mayor cuando los pacientes presentaron altos valores de inflamación, en el caso de la ferritina, y lo opuesto para el resto de parámetros. Al estratificar por las puntuaciones APACHE y SOFA de acuerdo a la gravedad baja, media y alta, los resultados mostraron diferencias significativas en creatinina, urea y transferrina, siendo menor cuanto mayor era el grado de severidad para la transferrina. Conclusión: la enfermedad crítica se caracteriza por un alto grado de estrés y la degradación acelerada de proteínas que causan malnutrición, inflamación sistémica y la disfunción de órganos, con una asociación significativa entre albúmina, ferritina y transferrina.

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Background: trauma and severe infections cause remarkable metabolic changes in patient with SIRS from an adaptive response aimed to control the underlying disease, repairing damaged tissue, and to synthesize substrates. If the attack is intense and sustained and the patient has a compromised nutritional status, can evolve into multiple organ failure and death. Objective: assessment of nutritional proteic status and the involvement of proteins and inflammatory factors in critically ill patients. Method: multicenter observational analytical study in critical ill patients at the admission in ICU. Results and discussion: patients showed disturbances in clinical nutritional parameters which confirm their hypercatabolic situation, showing malnutrition state at admission, where 42.9% had plasma levels below the reference prealbumin. Amino acid profile was situated below the reference values and 99% of patients had low plasma transferrin. Significant differences were observed in total protein, ferritin and transferrin parameters adjusted by CRP levels, being higher when patients presented high inflammation in the case of ferritin and the opposite for the rest of parameters. Adjusting APACHE and SOFA scores according to low, medium and high severity, results showed significant differences in creatinine, urea, and transferrin, being lower at high severity grade for the last one. Conclusion: critical illness is characterized by a high degree of stress and accelerated degradation of proteins that cause malnutrition, systemic inflammation and organ dysfunction, with a significant association between albumin, ferritin and transferrin (AU)

Antecedentes: el trauma y las infecciones severas causan cambios metabólicos notables en los pacientes con SRIS como una respuesta adaptativa dirigida a controlar la enfermedad subyacente, la reparación del tejido dañado y para sintetizar sustratos. Si el ataque es intenso y sostenido y el paciente tiene un estado nutricional comprometido puede evolucionar a insuficiencia orgánica múltiple y muerte. Objetivo: evaluación del estado nutricional proteico y la participación de las proteínas y los factores inflamatorios en pacientes críticamente enfermos. Método: estudio analítico observacional multicéntrico en pacientes enfermos críticos en la admisión en la UCI. Resultados y discusión: los pacientes mostraron alteraciones en los parámetros nutricionales clínicos que confirman su situación hipercatabólica, mostrando malnutrición a la admisión en UCI, donde el 42,9% tenían niveles plasmáticos de prealbúmina por debajo de la referencia. Los aminoácidos se encuentran por debajo de los valores de referencia y el 99% de los pacientes presentaron bajos niveles plasmáticos de transferrina. Se observaron diferencias significativas en los niveles de proteína total, ferritina y transferrina ajustados por los niveles de PCR, siendo mayor cuando los pacientes presentaron altos valores de inflamación, en el caso de la ferritina, y lo opuesto para el resto de parámetros. Al estratificar por las puntuaciones APACHE y SOFA de acuerdo a la gravedad baja, media y alta, los resultados mostraron diferencias significativas en creatinina, urea y transferrina, siendo menor cuanto mayor era el grado de severidad para la transferrina. Conclusión: la enfermedad crítica se caracteriza por un alto grado de estrés y la degradación acelerada de proteínas que causan malnutrición, inflamación sistémica y la disfunción de órganos, con una asociación significativa entre albúmina, ferritina y transferrina (AU)

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