RESUMEN

Human interferon alpha2b gene was transiently expressed in Nicotiana excelsior plants. Fusion with N. plumbaginifolia calreticulin signal peptide for improved apoplast targeting and carrying out the expression under optimized conditions resulted in maximal interferon activity of 3.2 x 10(3) IU/g fresh weight (FW) with an average of 2.1 +/- 0.8 x 10(3) IU/g FW. It proves that N. excelsior is a suitable host for Agrobacterium-mediated transient expression of genes encoding physiologically active human proteins. The transient expression conditions optimized for GFP marker protein were confirmed to be preferable for hIFN alpha2b.

Asunto(s)

Biotecnología/métodos , Interferón-alfa/biosíntesis , Nicotiana/genética , Plantas Modificadas Genéticamente , Proteínas Recombinantes de Fusión/biosíntesis , Rhizobium/genética , Animales , Células Cultivadas , Efecto Citopatogénico Viral/efectos de los fármacos , Genes Reporteros , Vectores Genéticos , Proteínas Fluorescentes Verdes/genética , Humanos , Interferón alfa-2 , Interferón-alfa/aislamiento & purificación , Interferón-alfa/farmacología , Hojas de la Planta/genética , Hojas de la Planta/metabolismo , Plásmidos , Proteínas Recombinantes de Fusión/aislamiento & purificación , Proteínas Recombinantes de Fusión/farmacología , Proteínas Recombinantes , Porcinos , Nicotiana/metabolismo , Vesiculovirus/efectos de los fármacos