RESUMEN
ABSTRACT Feed additives, such as β-glucans, nucleotides, ascorbic acid (vitamin C), and α-tocopherol (vitamin E) can improve fish immunity and contribute to enhanced zootechnical performance of the fish. This study aimed to evaluate the effect of different concentrations of vitamin- mineral premix with or without the inclusion of an immunostimulant boost (β-glucans, nucleotides and vitamins C and E) on the zootechnical performance, hemato-immunological parameters, histological changes, and survival of Nile tilapia juveniles. To this end, isocaloric and isoproteic diets were prepared with three different concentrations of vitamin-mineral premix (1.0, 1.5, and 2.0 kg ton-1); additionally, the effects of 4% immunostimulant boost in the diet were examined considering six diets (without the immunostimulant boost: 0.1%, 0.15%, and 0.2%, and with the immunostimulant boost: 0.1% I, 0.15% I, and 0.2% I). We used 24 experimental units, each including 15 fish. Nile tilapia juveniles (1.88 g±0.25) were fed for 50 d with supplemented diets. Further, zootechnical indexes; histological changes in the liver, spleen, and intestine; intestinal morphology; and hemato-immunological parameters were evaluated. The fish that received supplementation showed higher zootechnical values, compared to those that did not receive the supplementation of immunostimulant reinforcement. Weight gain (30.45g±3.06), daily weight gain (0.60g±0.06), final weight (32.41g±3.15) and feed conversion (0.95±0.06) were higher in tilapia fed with an inclusion concentration of 0.2%. Hematological parameters were not affected by either the pre-mix concentrations or the booster of the immunostimulant. There was an increase in the number of intestinal folds, length of the fold, total area and number of goblet cells in the group supplemented with immunostimulant reinforcement. Supplementation with the immunostimulant promoted growth and improved intestinal morphology and immunological parameters of Nile tilapia juveniles.
RESUMO Os aditivos alimentares, tais como β-glucanos, nucleotídeos, ácido ascórbico (vitamina C) e α-tocoferol (vitamina E), podem melhorar a imunidade dos peixes e contribuir para um melhor desempenho zootécnico. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes concentrações de premix vitamínico mineral com ou sem a inclusão de um imunoestimulante (β-glucanos, nucleotídeos e vitaminas C e E) no desempenho zootécnico, nos parâmetros hematoimunológicos, nas alterações histológicas e na sobrevivência dos juvenis de tilápia-do-Nilo. Para esse fim, foram preparadas dietas isocalóricas e isoproteicas com três concentrações diferentes de premix vitamínico e mineral (1,0, 1,5, e 2,0kg ton-1); além disso, foram examinados os efeitos da inclusão de 4% de imunoestimulante na dieta, considerando-se seis dietas (sem o imunoestimulante: 0,1%, 0,15% e 0,2%, e com a inclusão de imunoestimulante: 0,1% I, 0,15% I e 0,2% I). Foram utilizadas 24 unidades experimentais, cada uma com 15 peixes. Os juvenis de tilápia-do-Nilo (1,88g±0,25) foram alimentados, durante 50 dias, com as dietas suplementadas. Além disso, foram avaliados índices zootécnicos; alterações histológicas no fígado, baço e intestino; morfologia intestinal; e parâmetros hematoimunológicos. Os peixes que receberam suplementação apresentaram valores zootécnicos mais elevados, em comparação aos que não receberam a suplementação de reforço imunoestimulante. O ganho de peso (30,45g±3,06), o ganho de peso diário (0,60g ± 0,06), o peso final (32,41g±3,15) e a conversão alimentar (0,95±0,06) foram maiores nas tilápias alimentadas com uma concentração de inclusão de 0,2%. Os parâmetros hematológicos não foram afetados nem pelas concentrações de premix nem pelo reforço do imunoestimulante. Foi observado o aumento no número de pregas intestinais, no comprimento da prega, na área total e no número de células caliciformes no grupo suplementado com o boost imunoestimulante. A suplementação com o imunoestimulante promoveu o crescimento e melhorou a morfologia intestinal e os parâmetros imunológicos de juvenis de tilápia-do-Nilo.
RESUMEN
The aim of this study was to evaluate the pathogenicity of Vibrio alginolyticus isolated from an outbreak of sea horse Hippocampus reidi reared in the State of Santa Catarina, Brazil, by experimental infection. Sea horses with necrosis on the mouth epithelium were collected from aquaria at the Aquaculture Department, UFSC and the bacterium isolated from the mouth, liver, heart and blood in tiosulphate citrate bilesalt sucrose agar broth. The strains were identified by API 20E kit with 99.1 percent probability as Vibrio alginolyticus. Twelve adult sea horses (9.63 ± 2.42 g and 15.12 ± 0.87 cm) were distributed in six aquaria of 10 L capacity with aerated sea water. Fish from three aquaria were submitted to an immersion bath in a solution containing 1.0 × 10(7) CFU of V. alginolyticus/mL for 15 minutes. Fish from the other three aquaria received the same procedure without bacteria. Twenty four hours after this challenge, 100 percent mortality was observed in the animals infected with V. alginolyticus. No mortality was observed in non-infected fish. Hyperplasia, displacement and fusion of secondary lamellae of the gills; leukocyte infiltration and necrotic foci in the kidney; hyperplasia, sinusoidal deformation and necrotic foci in the liver were observed in histopathological analysis. The V. alginolyticus isolated in this study was pathogenic to H. reidi and constitutes an important sanitary problem to its culture.
Foi avaliado por meio de infecção experimental a patogenicidade de Vibrio alginolyticus isolado de um surto de enfermidade em cavalo-marinho Hippocampus reidi cultivado no Estado de Santa Catarina, Brasil. Os peixes com necroses no epitélio bucal foram coletados em aquários do Departamento de Aquicultura, UFSC e as bactérias isoladas da boca, fígado, coração e sangue em meio Agar tiossulfato citrato bile sacarose. Os isolados foram identificados pelo kit API 20E como Vibrio alginolyticus com 99,1 por cento de probabilidade. Doze peixes adultos (9,63 ± 2,42 g e 15,12 ± 0,87 cm) foram distribuídos em seis aquários de 10 L com água marinha e aeração. Peixes de três aquários foram submetidos a um banho de imersão por 15 minutos em uma solução contendo 1,0 × 10(7) UFC de V. alginolyticus/mL. Nos outros três aquários realizou-se o mesmo procedimento sem a bactéria. Vinte e quatro horas após o desafio, 100 por cento de mortalidade foi observada nos animais infectados com V. alginolyticus. Não houve mortalidade nos peixes não infectados. Nas análises histopatológicas, foi observado hiperplasia, deslocamento do epitélio e fusão das lamelas secundárias das brânquias; infiltração de leucócitos e necrose no rim; hiperplasia, deformação sinusoidal e necrose no fígado nos animais desafiados com V. alginolyticus. O V. alginolyticus isolado neste estudo foi patogênico para H. reidi, constituindo-se de um importante problema para seu cultivo.
Asunto(s)
Animales , Enfermedades de los Peces/microbiología , Smegmamorpha/microbiología , Vibriosis/microbiología , Vibrio alginolyticus/patogenicidad , Brasil , Vibrio alginolyticus/aislamiento & purificaciónRESUMEN
The aim of this study was to evaluate the pathogenicity of Vibrio alginolyticus isolated from an outbreak of sea horse Hippocampus reidi reared in the State of Santa Catarina, Brazil, by experimental infection. Sea horses with necrosis on the mouth epithelium were collected from aquaria at the Aquaculture Department, UFSC and the bacterium isolated from the mouth, liver, heart and blood in tiosulphate citrate bilesalt sucrose agar broth. The strains were identified by API 20E kit with 99.1 percent probability as Vibrio alginolyticus. Twelve adult sea horses (9.63 ± 2.42 g and 15.12 ± 0.87 cm) were distributed in six aquaria of 10 L capacity with aerated sea water. Fish from three aquaria were submitted to an immersion bath in a solution containing 1.0 × 10(7) CFU of V. alginolyticus/mL for 15 minutes. Fish from the other three aquaria received the same procedure without bacteria. Twenty four hours after this challenge, 100 percent mortality was observed in the animals infected with V. alginolyticus. No mortality was observed in non-infected fish. Hyperplasia, displacement and fusion of secondary lamellae of the gills; leukocyte infiltration and necrotic foci in the kidney; hyperplasia, sinusoidal deformation and necrotic foci in the liver were observed in histopathological analysis. The V. alginolyticus isolated in this study was pathogenic to H. reidi and constitutes an important sanitary problem to its culture.(AU)
Foi avaliado por meio de infecção experimental a patogenicidade de Vibrio alginolyticus isolado de um surto de enfermidade em cavalo-marinho Hippocampus reidi cultivado no Estado de Santa Catarina, Brasil. Os peixes com necroses no epitélio bucal foram coletados em aquários do Departamento de Aquicultura, UFSC e as bactérias isoladas da boca, fígado, coração e sangue em meio Agar tiossulfato citrato bile sacarose. Os isolados foram identificados pelo kit API 20E como Vibrio alginolyticus com 99,1 por cento de probabilidade. Doze peixes adultos (9,63 ± 2,42 g e 15,12 ± 0,87 cm) foram distribuídos em seis aquários de 10 L com água marinha e aeração. Peixes de três aquários foram submetidos a um banho de imersão por 15 minutos em uma solução contendo 1,0 × 10(7) UFC de V. alginolyticus/mL. Nos outros três aquários realizou-se o mesmo procedimento sem a bactéria. Vinte e quatro horas após o desafio, 100 por cento de mortalidade foi observada nos animais infectados com V. alginolyticus. Não houve mortalidade nos peixes não infectados. Nas análises histopatológicas, foi observado hiperplasia, deslocamento do epitélio e fusão das lamelas secundárias das brânquias; infiltração de leucócitos e necrose no rim; hiperplasia, deformação sinusoidal e necrose no fígado nos animais desafiados com V. alginolyticus. O V. alginolyticus isolado neste estudo foi patogênico para H. reidi, constituindo-se de um importante problema para seu cultivo.(AU)
Asunto(s)
Animales , Enfermedades de los Peces/microbiología , Smegmamorpha/microbiología , Vibriosis/microbiología , Vibrio alginolyticus/patogenicidad , Brasil , Vibrio alginolyticus/aislamiento & purificaciónRESUMEN
This study evaluated the haematological changes in Nile tilapia experimentally infected with 1 x 10³ and 1 x 10(6) colony-forming units (CFU)/mL of Enterococcus sp. in the swim bladder. The experiment consisted of four treatments in triplicates: non-injected fish (NI); fish injected with 1 mL of sterile saline solution 0.65% (SAL); fish injected with 1 x 10³ and 1 x 10(6) CFU/mL of Enterococcus diluted in 1 mL sterile saline. Twenty-four hours after injection, the fish were anesthetized and the blood collected. The haematological tests included red blood cell (RBC) and white blood cell (WBC) counts, hematocrit, number of total thrombocytes, and differential counting of WBC. Fish injected with 1 x 10(6) CFU/mL of Enterococcus showed a higher number of thrombocytes than the other treatments. White blood cell and lymphocyte numbers increased significantly in fish injected with 1 x 10(6) CFU/mL of Enterococcus when compared to non-injected control. There was significant increase in the number of neutrophils in saline injected fish and reduced number of monocytes after injections with 1 x 10(6) CFU/mL of Enterococcus. Hematocrit increased in fish injected with 1 x 10³ and 1 x 10(6) CFU/mL of Enterococcus.
Este estudo avaliou alterações hematológicas em tilápia do Nilo infectada experimentalmente com 1 x 10³ e 1 x 10(6) unidades formadoras de colônia (CFU)/mL de Enterococcus sp. na bexiga natatória. O experimento consistiu de quatro tratamentos com três repetições cada: peixes não injetados (NI); peixes injetados com 1 mL de solução salina a 0,65% esterilizada (SAL); peixes injetados com 1 x 10³ e 1 x 10(6) CFU/mL de Enterococcus diluída em 1 mL de solução salina esterilizada. Vinte e quatro horas após as injeções, os peixes foram anestesiados com benzocaína e o sangue coletado. Os testes hematológicos incluíram as contagens totais de eritrócitos (RBC), de leucócitos (WBC) e de trombócitos, o percentual do hematócrito e a contagem diferencial de leucócitos. Peixes injetados com 1 x 10(6) CFU/mL de Enterococcus mostraram maior número de trombócitos no sangue do que os dos outros tratamentos. O número de leucócitos totais e o número de linfócitos foram significativamente mais altos após injeção de 1 x 10(6) CFU/mL de Enterococcus, quando comparados ao controle não injetado. Houve aumento no número de neutrófilos nos injetados com salina e redução no número de monócitos nos injetados com 1 x 10(6) CFU/mL de Enterococcus. O hematócrito aumentou nos animais injetados com 1 x 10³ e 1 x 10(6) CFU/mL de Enterococcus.
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A preliminary study to characterize filamentous bacteria, whose presence is related to high mortality of Litopenaeus vannamei larvae cultured in Santa Catarina State, Brazil, is reported. The extract of infected larvae was diluted in different concentrations, cultured in marine agar (DifcoTM, Marine Agar 2216) and incubated at 30 °C for 48 hours. The biochemical characterization included hydrolytic reactions of starch, gelatin and tyrosine, growth in TCBS agar, growth in 0 and 37 salinity, pigment production in tyrosine agar, production of H2S, nitrate reduction, congo red reaction, oxidase and catalase. The isolated bacteria belong to the species Flexibacter maritimus, Gram-negative bacilli of 0.4-0.5 µm width and 15 µm length. Experiments were carried out on pathogenicity of F. maritimus in post-larvae of L. vannamei. Survival and symptoms in L. vannamei post-larvae 24 hours after inoculation with F. maritimus and its growth in marine agar were evaluated. Mortality was detected around 92,5% as well as symptoms like melanized lesions in several parts of body, discolouration of gills, bad formation of appendages and of the last abdominal segment, low motility and feeding reduction. The experimental infection results suggested that isolated bacteria of the genus Flexibacter are pathogenic to the shrimp Litopenaeus vannamei post-larvae.
Neste trabalho, relata-se um estudo preliminar para caracterizar bactérias filamentosas associadas a elevadas mortalidades de larvas e pós-larvas cultivadas no Estado de Santa Catarina, Brasil. Um extrato de larvas infectadas foi diluído em diferentes concentrações, cultivado em Agar Marine (DifcoTM, Marine Agar 2216) e incubado a 30° C por 48 horas. A caracterização bioquímica inclui reações de amido, gelatina e tirosesine, crescimento em Agar TCBS,crescimento a 0 e 37 de salinidade, produção de pigmentos em Agar Tirosine, produção de H2S, redução de nitrato, reação vermelho congo, oxidase e catalase. A bactéria isolada apresentou características de Flexibacter maritimus, um bacilo Gram negativo de 0,4-0,5 µm de largura e 15 µm de comprimento. Os experimentos foram realizados sobre a patogenicidade de F. Maritimus, em pós-larvas de L. vannamei. Foram avaliados a sobrevivência e os sintomas das pós-larvas 24 horas após a inoculação com F. Maritimus, além do seu crescimento em Agar Marine. Foram encontradas mortalidades de 92,5% e sintomas próprios da enfermidade, tais como lesões melanizadas em várias partes do corpo, descoloração das brânquias e diminuição da motilidade e da alimentação. Com base nos resultados da infecção experimental, pode se concluir que a bactéria isolada do gênero Flexibacter é patogênica para pós-larvas de L. vannamei.