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RESUMEN

By genetic exchange and in vitro mutagenesis a hybrid beta-lactamase was constructed that contained the pCloDF13-encoded bacteriocin release protein signal peptide plus a cysteine residue coupled to the mature portion of beta-lactamase. Immunoblotting, labelling with [3H]palmitate in the presence and absence of globomycin, and pulse-chase experiments revealed that this hybrid construct is modified with lipid and processed into a lipid-modified beta-lactamase. Subcellular localization studies revealed that this hybrid is localized both in the cytoplasmic and outer membranes of Escherichia coli cells. A mutant derivative with an incomplete lipobox (LVG instead of LVAC+1) was not processed and was found in the cytoplasmic membranes.

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Antibacterianos , Proteínas de la Membrana Bacteriana Externa/metabolismo , Proteínas Bacterianas/metabolismo , Cisteína , Proteínas de Escherichia coli , Escherichia coli/metabolismo , Lipoproteínas/metabolismo , Proteínas de la Membrana , Procesamiento Proteico-Postraduccional , Señales de Clasificación de Proteína/metabolismo , Proteínas Recombinantes de Fusión/metabolismo , Serina Endopeptidasas , beta-Lactamasas/metabolismo , Secuencia de Aminoácidos , Proteínas de la Membrana Bacteriana Externa/genética , Proteínas Bacterianas/genética , Secuencia de Bases , Transporte Biológico , Citoplasma/metabolismo , Endopeptidasas/metabolismo , Datos de Secuencia Molecular , Ácido Palmítico , Ácidos Palmíticos/metabolismo , Péptidos/farmacología , Procesamiento Proteico-Postraduccional/efectos de los fármacos , Especificidad por Sustrato , beta-Lactamasas/genética

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