RESUMEN
Mammalian spermatozoa must undergo biochemical and structural changes to acquire the capacity for fertilization, in a process known as capacitation. Activation of PKA enzymes is essential for capacitation, and thus cAMP levels are tightly regulated during this process. Previously, we demonstrated that during capacitation, bovine spermatozoa extrude cAMP through multidrug resistance-associated protein 4 (MRP4, also known as ABCC4), which regulates intracellular levels of the nucleotide and provides cAMP to the extracellular space. Here, we report the presence of functional MRP4 in murine spermatozoa, since its pharmacological inhibition with MK571 decreased levels of extracellular cAMP. This also produced a sudden increase in PKA activity, with decreased tyrosine phosphorylation at the end of capacitation. Blockade of MRP4 inhibited induction of acrosome reaction, hyperactivation and in vitro fertilization. Moreover, MRP4 inhibition generated an increase in Ca2+ levels mediated by PKA, and depletion of Ca2+ salts from the medium prevented the loss of motility and phosphotyrosine inhibition produced by MK571. These results were supported using spermatozoa from CatSper Ca2+ channel knockout mice. Taken together, these results suggest that cAMP efflux via MRP4 plays an essential role in mouse sperm capacitation.This article has an associated First Person interview with the first author of the paper.
Asunto(s)
AMP Cíclico/metabolismo , Proteínas Asociadas a Resistencia a Múltiples Medicamentos/metabolismo , Capacitación Espermática/fisiología , Animales , Calcio/metabolismo , Proteínas Quinasas Dependientes de AMP Cíclico/metabolismo , Masculino , Ratones Endogámicos C57BL , Modelos Biológicos , Fosforilación/efectos de los fármacos , Fosfotirosina/metabolismo , Propionatos/farmacología , Quinolinas/farmacología , Capacitación Espermática/efectos de los fármacos , Motilidad Espermática/efectos de los fármacos , Espermatozoides/efectos de los fármacos , Espermatozoides/metabolismoRESUMEN
OBJECTIVE: To describe clinical presentation across age groups in 2855 children with pulmonary tuberculosis (TB) attending the Children's Hospital, Lima, Peru, to improve the diagnosis, treatment and care of childhood TB. DESIGN: Children aged 0-14 years admitted between 1 January 1973 and 31 December 1997 with active pulmonary TB were enrolled. Demographic information, history, physical examination data, laboratory and microbiological results, chest radiograph data, disease classification, treatment and adverse effect data, and outcome at the time of discharge were recorded by pulmonologists using detailed chart abstractions. RESULTS: Of the 2855 enrollees, 47% were malnourished and 56% had a household contact. Older children presented with classic TB symptoms, while weight loss and anorexia were rare in children aged <5 years. Microbiological or pathologic confirmation was obtained in 71% of children aged 10-14 years compared with 34% of children aged <2 years; however, severe extra-pulmonary TB was most common among children aged <2 years (41%). CONCLUSION: Classic TB symptoms should be considered when making a diagnosis; however, systematic symptoms among young children are also important. In high-burden settings, clinicians should have a low threshold to diagnose and treat children for TB across all ages, even in the context of a negative tuberculin skin test result and lack of micro-pathological confirmation.
Asunto(s)
Tuberculosis Pulmonar/diagnóstico , Adolescente , Factores de Edad , Antituberculosos/uso terapéutico , Técnicas Bacteriológicas , Niño , Preescolar , Comorbilidad , Trazado de Contacto , Países en Desarrollo , Femenino , Vivienda , Humanos , Lactante , Recién Nacido , Masculino , Estado Nutricional , Perú/epidemiología , Valor Predictivo de las Pruebas , Radiografía Torácica , Factores de Riesgo , Factores de Tiempo , Resultado del Tratamiento , Prueba de Tuberculina , Tuberculosis Pulmonar/tratamiento farmacológico , Tuberculosis Pulmonar/epidemiología , Tuberculosis Pulmonar/transmisiónRESUMEN
De muestras de suelos correspondientes a parcelas sembradas con trigo y que recibieron aplicación de 5 herbicidas post-emergentes: 2-4 D más dicamba; 2-4 D más Picloram, Metsulfurón-metil; Fluroxypyr, Metsulfurón-metil más Dicamba, en las dosis habituales; se realizó el aislamiento y clasificación de cepas celulolíticas con el objeto de conocer la influencia de esos fitotóxicos sobre la evolución de las mismas durante el ciclo de cultivo del trigo. Para ello, las muestras de suelos testigos y con tratamiento desmalezante fueron extraídas a los 7,14,30,45,60 y 90 días posteriores a su aplicación, entre los meses de Agosto a Diciembre, durante los años 1989, 1990, 1901. De acuerdo a los aislamientos en un medio selectivo, se determinó el número de unidades formadoras de colonias (u.f.c.) por gramo de suelo, su frecuencia en las siembras durante los tres ciclos de cultivo y la población relativa en los 6 muestreos de cada año. Los promedios de u.f.c. correspondientes a suelos tratados con Metsulfurón-metil y 2-4 más Picloram, mostraron una disminución importante con respecto a los testigos, en los tres ciclos; para los demás herbicidas, esas diferencias variaron, según el año del muestreo. Las especies celulolíticas, de la parcela testigo son en general similares, durante todo el tiempo de la experiencia, pero esa colonización varía marcadamente, en los suelos con desmalezantes. Tienen mayor frecuencia las cepas de Aspergillus niger, A. candidus, A.ochraceus, Trichoderma harzianum, T. Koningii,Fusarium solani, F. oxysporum, Rhizopus oryzae. La estimación de la población de especies aisladas difiere para cada tiempo del muestreo en la parcela control y en relación con los demás, reflejando las fluctuaciones de la micota en las interrelaciones suelos-cultivos por un lado y por otro suelo-cultivos herbicida