RESUMEN
Heterologous expression systems have been used as a powerful experimental strategy to study the function of many proteins, particularly ion transporters. For this experiment, it is fundamental to prepare an expression vector encoding a protein of interest. However, we encountered problems in vector preparation of the voltage sensor domain (VSD) of murine sperm-specific Na+/H+ exchanger (sNHE) due to its severe toxicity to bacteria. We overcame the problems by insertion of an amber stop codon or a synthetic intron into the coding sequence of the VSD in the expression vectors. Both methods allowed us to express the protein of interest in HEK293 cells (combined with a stop codon suppression system for amber codon). The VSD of mouse sNHE generates voltage-dependent outward ionic currents, which is a probable cause of toxicity to bacteria. We propose these two strategies as practical solutions to study the function of any protein toxic to bacteria.
Asunto(s)
Protones , Semen , Animales , Bacterias/metabolismo , Codón de Terminación/metabolismo , Células HEK293 , Humanos , Masculino , Ratones , Semen/metabolismo , Sodio/metabolismo , Intercambiadores de Sodio-Hidrógeno/genética , Intercambiadores de Sodio-Hidrógeno/metabolismo , Espermatozoides/metabolismoRESUMEN
ABSTRACT Introduction: An adequate physical intervention program can improve the physical level of adolescents, promoting their interest in sports learning and socialization, factors that indirectly contribute to academic performance. Despite having a positive impact on athlete performance, cardiopulmonary resistance training has received few studies related to its benefits in children and adolescents. Objective: Explore the effect of resistance training on the physical fitness of children and adolescents and the prevention of their sports injuries. Methods: The statistical method was used in a situational analysis of injuries in different sports of 455 young people. In a second moment, 20 volunteers divided into groups by sex were submitted to resistance training exercises involving aerobic (30 minutes) and anaerobic (15 minutes) activity, under 45 minutes daily, three times a week, for ten weeks. Pertinent data were collected before, during, and after the intervention. They were submitted for analysis and consideration and performed statistical treatment on the data. Results: The frequency of sports injuries in adolescents was high, especially the mild injuries related to the characteristics of adolescents. Under the same intensity of resistance training, there was an improvement in running performance. There was a significant improvement in lung capacity, with relatively small differences between males and females. Conclusion: Resistance training can effectively improve the fitness level of children and adolescents, and its promotion is strongly recommended. Level of evidence II; Therapeutic studies - investigation of treatment outcomes.
RESUMO Introdução: Um programa de intervenção física adequado pode melhorar o nível físico dos adolescentes, promovendo seu interesse na aprendizagem esportiva e socialização, fatores que contribuem indiretamente para o desempenho acadêmico. O treinamento de resistência cardiopulmonar, apesar de impactar positivamente na performance de atletas, recebeu poucos estudos relacionados aos benefícios desempenhados em crianças e adolescentes. Objetivo: Explorar o efeito do treinamento de resistência sob a aptidão física de crianças e adolescentes, bem como na prevenção de suas lesões esportivas. Métodos: O método estatístico foi empregado na análise situacional de lesões em diferentes esportes de 455 jovens. Num segundo momento, 20 voluntários divididos em grupos por sexo foram submetidos à exercícios de treinamento de resistência envolvendo atividade aeróbica (30 minutos) e anaeróbica (15 minutos), sob 45 minutos diários, três vezes por semana, durante 10 semanas. Os dados pertinentes foram coletados antes, durante e após a intervenção. Efetuada a estatística de tratamento nos dados, foram submetidos para análise e consideração. Resultados: A frequência das lesões esportivas em adolescentes foi alta, principalmente as lesões leves, relacionadas às características dos adolescentes. Sob a mesma intensidade do treinamento de resistência, houve melhora no desempenho da corrida. Houve melhora significativa na capacidade pulmonar, com diferenças relativamente pequenas entre homens e mulheres. Conclusão: O treinamento de resistência pode melhorar efetivamente o nível físico de crianças e adolescentes, e sua promoção é fortemente recomendada. Nível de evidência II; Estudos terapêuticos - investigação dos resultados do tratamento.
RESUMEN Introducción: Un adecuado programa de intervención física puede mejorar el nivel físico de los adolescentes, promoviendo su interés por el aprendizaje deportivo y la socialización, factores que contribuyen indirectamente al rendimiento académico. El entrenamiento de resistencia cardiopulmonar, a pesar de tener un impacto positivo en el rendimiento de los deportistas, ha recibido pocos estudios relacionados con los beneficios realizados en niños y adolescentes. Objetivo: Explorar el efecto del entrenamiento de resistencia en la condición física de niños y adolescentes, así como en la prevención de sus lesiones deportivas. Métodos: Se empleó el método estadístico en el análisis situacional de las lesiones en diferentes deportes de 455 jóvenes. En un segundo momento, 20 voluntarios divididos en grupos por sexo fueron sometidos a ejercicios de entrenamiento de resistencia que incluían actividad aeróbica (30 minutos) y anaeróbica (15 minutos), bajo 45 minutos diarios, tres veces por semana, durante 10 semanas. Los datos pertinentes se recogieron antes, durante y después de la intervención. Realizado el tratamiento estadístico de los datos, éstos fueron sometidos a análisis y consideración. Resultados: La frecuencia de las lesiones deportivas en los adolescentes fue alta, principalmente las lesiones leves, relacionadas con las características de los adolescentes. Con la misma intensidad de entrenamiento de resistencia, se produjo una mejora en el rendimiento de la carrera. Hubo una mejora significativa en la capacidad pulmonar, con diferencias relativamente pequeñas entre hombres y mujeres. Conclusión: El entrenamiento de resistencia puede mejorar eficazmente el nivel físico de los niños y adolescentes, y su promoción es muy recomendable. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - investigación de los resultados del tratamiento.