RESUMEN
Glycerol-3-phosphate acyltransferase-2 is a member of "cancer-testis gene" family. Initially linked to lipid metabolism, this gene has been recently found involved also in PIWI-interacting RNAs biogenesis in germline stem cells. To investigate its role in piRNA metabolism in cancer, the gene was silenced in MDA-MB-231 breast cancer cells and small RNA sequencing was applied. PIWI-interacting RNAs and tRNA-derived fragments expression profiles showed changes following GPAT2 silencing. Interestingly, a marked shift in length distribution for both small RNAs was detected in GPAT2-silenced cells. Most downregulated PIWI-interacting RNAs are single copy in the genome, intragenic, hosted in snoRNAs and previously found to be upregulated in cancer cells. Putative targets of these PIWI-interacting RNAs are linked to lipid metabolism. Downregulated tRNA derived fragments derived from, so-called 'differentiation tRNAs', whereas upregulated ones derived from proliferation-linked tRNAs. miRNA amounts decrease after Glycerol-3-phosphate acyltransferase-2 silencing and functional enrichment analysis of deregulated miRNA putative targets point to mitochondrial biogenesis, IGF1R signaling and oxidative metabolism of lipids and lipoproteins. In addition, miRNAs known to be overexpressed in breast cancer tumors with poor prognosis where found downregulated in GPAT2-silenced cells. In conclusion, GPAT2 silencing quantitatively and qualitatively affects the population of PIWI-interacting RNAs, tRNA derived fragments and miRNAs which, in combination, result in a more differentiated cancer cell phenotype.
RESUMEN
Lipopolysaccharide (LPS) is an endotoxin released from the outer membrane of Gram-negative bacteria during infections. It have been reported that LPS may play a role in the outer membrane of bacteria similar to that of cholesterol in eukaryotic plasma membranes. In this article we compare the effect of introducing LPS or cholesterol in liposomes made of dipalmitoylphosphatidylcholine/dioleoylphosphatidylcholine on the solubilization process by Triton X-100. The results show that liposomes containing LPS or cholesterol are more resistant to solubilization by Triton X-100 than the binary phospholipid mixtures at 4 degrees C. The LPS distribution was analyzed on GUVs of DPPC:DOPC using FITC-LPS. Solid and liquid-crystalline domains were visualized labeling the GUVs with LAURDAN and GP images were acquired using a two-photon microscope. The images show a selective distribution of LPS in gel domains. Our results support the hypothesis that LPS could aggregate and concentrate selectively in biological membranes providing a mechanism to bring together several components of the LPS-sensing machinery.
Asunto(s)
Membrana Dobles de Lípidos/química , Lipopolisacáridos/química , Fosfolípidos/química , Colesterol/química , Fluoresceína-5-Isotiocianato/química , Liposomas/química , Octoxinol/química , SolubilidadRESUMEN
El lipopolisacarido bacteriano (LPS), tambien denominado endotoxina, es el constituyente mayoritario de la membrana externa de bacterias Gram negativas. Esta molecula es liberada de la bacteria a la circulacion exhibiendo una amplia variedad de efectos toxicos y pro-inflamatorios, los cuales estan asociados al lipido A y a su vez estan relacionados a la patogenesis de la sepsis. Muchos de los fenomenos fisiologicos producidos por el LPS resultan de la capacidad de esta molecula de activar las celulas del sistema inmune del huesped, entre ellas monocitos, macrofagos y leucocitos polimorfonucleares. Este proceso produce una inflamacion local, proceso beneficioso para el huesped. Sin embargo, si la cantidad de LPS liberado excede cierta concentracion critica umbral, la exacerbada liberacion de citoquinas inflamatorias como Factor de Necrosis Tumoral (TNF-alfa) e interleuquinas (IL) resulta en sepsis grave, lo que hace necesario encontrar nuevas opciones terapeuticas capaces de neutralizar la endotoxina circulante. En este articulo se presenta una revision actualizada de los resultados experimentales obtenidos in vivo e in vitro empleando proteinas y peptidos sinteticos con la finalidad de neutralizar el LPS, y las perspectivas que en este area ofrece el uso de lipoproteinas, en particular la apolipoproteina A-I y formas mutantes o peptidos derivados de esta proteina.
Lipopolisaccharide (LPS), also called endotoxin, is the major component of the external membrane in Gram negative bacteria. This molecule is released to circulation by the bacteria, producing a large variety of toxic and pro-inflammatory effects which are associated with lipid A as well as with sepsis pathogenesis. Many physiological henomena produced by LPS arise from this molecule's capacity to activate cells in the host immune system such as monocytes, macrophages and polymorphonuclear leukocytes. This process leads to a local inflammation, and it is beneficial for the host. However, if the amount of LPS released exceeds the critical concentration thresholdan augmented release of inflammatory cytokines as TNF-alfa, and interleukines (IL) produce a severe sepsis. This fact led us to find therapeutical alternatives able to neutralize circulating endotoxin. This work is focused on the experimental results obtained in vivo and in vitro using synthetic proteins and peptides in order to neutralizeLPS, and on future perpectives in this research area that offer the use of lipoprotein and in particular apolipoprotein A-I and mutants or peptides derived from this protein.
Asunto(s)
Humanos , Endotoxinas/antagonistas & inhibidores , Bacterias Gramnegativas , Lipopolisacáridos/antagonistas & inhibidores , Péptidos/farmacología , Sepsis/tratamiento farmacológico , Antiinfecciosos/uso terapéutico , Apolipoproteína A-I/metabolismo , Endotoxinas/química , Endotoxinas/metabolismo , Bacterias Gramnegativas/efectos de los fármacos , Bacterias Gramnegativas/metabolismo , Inflamación , Interleucinas/metabolismo , Lipopolisacáridos/química , Lipopolisacáridos/metabolismo , Lipoproteínas HDL/química , Lipoproteínas HDL/fisiología , Péptidos/metabolismo , Proteínas Recombinantes , Sepsis/metabolismo , Factor de Necrosis Tumoral alfa/metabolismoRESUMEN
El lipopolisacarido bacteriano (LPS), tambien denominado endotoxina, es el constituyente mayoritario de la membrana externa de bacterias Gram negativas. Esta molecula es liberada de la bacteria a la circulacion exhibiendo una amplia variedad de efectos toxicos y pro-inflamatorios, los cuales estan asociados al lipido A y a su vez estan relacionados a la patogenesis de la sepsis. Muchos de los fenomenos fisiologicos producidos por el LPS resultan de la capacidad de esta molecula de activar las celulas del sistema inmune del huesped, entre ellas monocitos, macrofagos y leucocitos polimorfonucleares. Este proceso produce una inflamacion local, proceso beneficioso para el huesped. Sin embargo, si la cantidad de LPS liberado excede cierta concentracion critica umbral, la exacerbada liberacion de citoquinas inflamatorias como Factor de Necrosis Tumoral (TNF-alfa) e interleuquinas (IL) resulta en sepsis grave, lo que hace necesario encontrar nuevas opciones terapeuticas capaces de neutralizar la endotoxina circulante. En este articulo se presenta una revision actualizada de los resultados experimentales obtenidos in vivo e in vitro empleando proteinas y peptidos sinteticos con la finalidad de neutralizar el LPS, y las perspectivas que en este area ofrece el uso de lipoproteinas, en particular la apolipoproteina A-I y formas mutantes o peptidos derivados de esta proteina.(AU)
Lipopolisaccharide (LPS), also called endotoxin, is the major component of the external membrane in Gram negative bacteria. This molecule is released to circulation by the bacteria, producing a large variety of toxic and pro-inflammatory effects which are associated with lipid A as well as with sepsis pathogenesis. Many physiological henomena produced by LPS arise from this molecules capacity to activate cells in the host immune system such as monocytes, macrophages and polymorphonuclear leukocytes. This process leads to a local inflammation, and it is beneficial for the host. However, if the amount of LPS released exceeds the critical concentration thresholdan augmented release of inflammatory cytokines as TNF-alfa, and interleukines (IL) produce a severe sepsis. This fact led us to find therapeutical alternatives able to neutralize circulating endotoxin. This work is focused on the experimental results obtained in vivo and in vitro using synthetic proteins and peptides in order to neutralizeLPS, and on future perpectives in this research area that offer the use of lipoprotein and in particular apolipoprotein A-I and mutants or peptides derived from this protein. (AU)
Asunto(s)
Humanos , Bacterias Gramnegativas , Endotoxinas/antagonistas & inhibidores , Lipopolisacáridos/antagonistas & inhibidores , Péptidos/farmacología , Sepsis/tratamiento farmacológico , Bacterias Gramnegativas/efectos de los fármacos , Bacterias Gramnegativas/metabolismo , Antiinfecciosos/uso terapéutico , Apolipoproteína A-I/metabolismo , Endotoxinas/química , Endotoxinas/metabolismo , Lipoproteínas HDL/química , Lipoproteínas HDL/fisiología , Inflamación , Interleucinas/metabolismo , Lipopolisacáridos/química , Lipopolisacáridos/metabolismo , Péptidos/metabolismo , Proteínas Recombinantes , Sepsis/metabolismo , Factor de Necrosis Tumoral alfa/metabolismoRESUMEN
El lipopolisacarido bacteriano (LPS), tambien denominado endotoxina, es el constituyente mayoritario de la membrana externa de bacterias Gram negativas. Esta molecula es liberada de la bacteria a la circulacion exhibiendo una amplia variedad de efectos toxicos y pro-inflamatorios, los cuales estan asociados al lipido A y a su vez estan relacionados a la patogenesis de la sepsis. Muchos de los fenomenos fisiologicos producidos por el LPS resultan de la capacidad de esta molecula de activar las celulas del sistema inmune del huesped, entre ellas monocitos, macrofagos y leucocitos polimorfonucleares. Este proceso produce una inflamacion local, proceso beneficioso para el huesped. Sin embargo, si la cantidad de LPS liberado excede cierta concentracion critica umbral, la exacerbada liberacion de citoquinas inflamatorias como Factor de Necrosis Tumoral (TNF-alfa) e interleuquinas (IL) resulta en sepsis grave, lo que hace necesario encontrar nuevas opciones terapeuticas capaces de neutralizar la endotoxina circulante. En este articulo se presenta una revision actualizada de los resultados experimentales obtenidos in vivo e in vitro empleando proteinas y peptidos sinteticos con la finalidad de neutralizar el LPS, y las perspectivas que en este area ofrece el uso de lipoproteinas, en particular la apolipoproteina A-I y formas mutantes o peptidos derivados de esta proteina.(AU)
Lipopolisaccharide (LPS), also called endotoxin, is the major component of the external membrane in Gram negative bacteria. This molecule is released to circulation by the bacteria, producing a large variety of toxic and pro-inflammatory effects which are associated with lipid A as well as with sepsis pathogenesis. Many physiological henomena produced by LPS arise from this molecules capacity to activate cells in the host immune system such as monocytes, macrophages and polymorphonuclear leukocytes. This process leads to a local inflammation, and it is beneficial for the host. However, if the amount of LPS released exceeds the critical concentration thresholdan augmented release of inflammatory cytokines as TNF-alfa, and interleukines (IL) produce a severe sepsis. This fact led us to find therapeutical alternatives able to neutralize circulating endotoxin. This work is focused on the experimental results obtained in vivo and in vitro using synthetic proteins and peptides in order to neutralizeLPS, and on future perpectives in this research area that offer the use of lipoprotein and in particular apolipoprotein A-I and mutants or peptides derived from this protein. (AU)
Asunto(s)
Humanos , Bacterias Gramnegativas , Endotoxinas/antagonistas & inhibidores , Lipopolisacáridos/antagonistas & inhibidores , Péptidos/farmacología , Sepsis/tratamiento farmacológico , Bacterias Gramnegativas/efectos de los fármacos , Bacterias Gramnegativas/metabolismo , Antiinfecciosos/uso terapéutico , Apolipoproteína A-I/metabolismo , Endotoxinas/química , Endotoxinas/metabolismo , Lipoproteínas HDL/química , Lipoproteínas HDL/fisiología , Inflamación , Interleucinas/metabolismo , Lipopolisacáridos/química , Lipopolisacáridos/metabolismo , Péptidos/metabolismo , Proteínas Recombinantes , Sepsis/metabolismo , Factor de Necrosis Tumoral alfa/metabolismoRESUMEN
En este trabajo hay varios puntos que han quedado inconclusos, que son de gran relevancia para determinar las condiciones que lleven a un mayor efecto neutralizante del LPS. Entre los ensayos no realizados se encuentra: determinar si la mutante de apo A-I 10@7 con mayor afinidad por lípidos posee algún efecto diferencial respecto a la apo A-I nativa. Siendo el objetivo principal del trabajo, la búsqueda de terapias más eficientes para combatir la endotoxemia causada durante las infecciones generadas por bacterias gram negativas, los ensayos realizados así como los que quedaron pendientes permitirían un gran avance en la búsqueda de un mayor efecto neutralizante de las HDL sobre el LPS liberado durante la infección.
Asunto(s)
Apolipoproteína A-I , Lipoproteínas HDL , BecasRESUMEN
En este trabajo hay varios puntos que han quedado inconclusos, que son de gran relevancia para determinar las condiciones que lleven a un mayor efecto neutralizante del LPS. Entre los ensayos no realizados se encuentra: determinar si la mutante de apo A-I 10@7 con mayor afinidad por lípidos posee algún efecto diferencial respecto a la apo A-I nativa. Siendo el objetivo principal del trabajo, la búsqueda de terapias más eficientes para combatir la endotoxemia causada durante las infecciones generadas por bacterias gram negativas, los ensayos realizados así como los que quedaron pendientes permitirían un gran avance en la búsqueda de un mayor efecto neutralizante de las HDL sobre el LPS liberado durante la infección.
Asunto(s)
Apolipoproteína A-I , Lipoproteínas HDL , BecasRESUMEN
En este trabajo hay varios puntos que han quedado inconclusos, que son de gran relevancia para determinar las condiciones que lleven a un mayor efecto neutralizante del LPS. Entre los ensayos no realizados se encuentra: determinar si la mutante de apo A-I 10@7 con mayor afinidad por lípidos posee algún efecto diferencial respecto a la apo A-I nativa. Siendo el objetivo principal del trabajo, la búsqueda de terapias más eficientes para combatir la endotoxemia causada durante las infecciones generadas por bacterias gram negativas, los ensayos realizados así como los que quedaron pendientes permitirían un gran avance en la búsqueda de un mayor efecto neutralizante de las HDL sobre el LPS liberado durante la infección.