RESUMEN
Rheumatoid arthritis (RA) is an autoimmune disease that leads to joint destruction. The fibroblast-like synoviocytes (FLS) has a central role on the disease pathophysiology. The present study aimed to examine the role of gastrin-releasing peptide (GRP) and its receptor (GRPR) on invasive behavior of mice fibroblast-like synoviocytes (FLS), as well as to evaluate GRP-induced signaling on PI3K/AKT pathway. The expression of GRPR in FLS was investigated by immunocytochemistry, western blot (WB) and qRT-PCR. The proliferation and invasion were assessed by SRB and matrigel-transwell assay after treatment with GRP and/or RC-3095 (GRPR antagonist), and/or Ly294002 (inhibitor of PI3K/AKT pathway). Finally, AKT phosphorylation was assessed by WB. GRPR protein was detected in FLS and the exposure to GRP increased FLS invasion by nearly two-fold, compared with untreated cells (p<0.05), while RC-3095 reversed that effect (p<0.001). GRP also increased phosphorylated AKT expression in FLS. When Ly294002 was added with GRP, it prevented the GRP-induced increased cell invasiveness (p<0.001). These data suggest that GRPR expression in FLS and that exogenous GRP are able to activate FLS invasion. This effect occurs at least in part through the AKT activation. Therefore, understanding of the GRP/GRPR pathway could be relevant in the development of FLS-targeted therapy for RA.
Asunto(s)
Artritis Reumatoide/tratamiento farmacológico , Péptido Liberador de Gastrina/administración & dosificación , Receptores de Bombesina/genética , Sinoviocitos/metabolismo , Animales , Artritis Reumatoide/genética , Artritis Reumatoide/patología , Movimiento Celular/efectos de los fármacos , Proliferación Celular/efectos de los fármacos , Cromonas/administración & dosificación , Fibroblastos/efectos de los fármacos , Péptido Liberador de Gastrina/genética , Regulación de la Expresión Génica/efectos de los fármacos , Humanos , Ratones , Morfolinas/administración & dosificación , Fosfatidilinositol 3-Quinasas/genética , Fosforilación/genética , Proteínas Proto-Oncogénicas c-akt/genética , Transducción de Señal/efectos de los fármacos , Sinoviocitos/efectos de los fármacos , Sinoviocitos/patologíaRESUMEN
Objetivo: Determinar na prática nao só os padroes de uso de suplementaçao com ácido fólico (FA) em pacientes com artrite reumatóide (RA) tratados com metotrexato (MTX) em nosso centro médico, como também o tempo de permanência em uso e toxicidade da droga entre diferentes grupos de pacientes. Métodos: Foi constituído um grupo de 40 pacientes com RA que iniciaram MTX logo após estarem disponíveis os resultados do primeiro estudo de suplementaçao com ácido fólico. Foram obtidos de todos os pacientes, durante três anos, os dados clínico/demográficos e, anualmente, a administraçao e toxicidade acumulada de MTX/FA. Foram examinadas estatísticas descritivas e curvas de sobrevida. Resultados: Três padroes surgiram na prática: pacientes que receberam MTX desde o início (FAO n = 18), aqueles que receberam-no às vezes durante o estudo por causa da toxicidade (FAD n=8) e aqueles que nunca o receberam (FAN n = 14). O tempo global de permanência em uso da droga durante três anos foi de 69 por cento, sendo comparável nos três grupos. Os valores basais MCV (volume corpuscular médio) e os índices de toxicidade acumulada foram maiores entre os pacientes do grupo FAD. Conclusao: Nao foi universal a implementaçao de alteraçoes nas práticas terapêuticas entre nossos clínicos. A permanência em uso da droga foi comparável entre os três grupos terapêuticos. Pacientes que na linha basal tinham MCV anormal ou normal alto deveriam ter suplementaçao com ácido fólico desde o início