RESUMEN
Bovine brucellosis poses a risk to human health and causes serious economic losses for the animal industry. This report describes the use of different diagnostic methods for the diagnosis of brucellosis in cattle affected by cervical bursitis from a slaughterhouse located in São Luís, Maranhão, Brazil. Serum samples from a total of 47 cattle with bursitis were collected and submitted to the Rose Bengal Test (RBT), and RBT-positive samples were further confirmed by the 2-mercaptoethanol (2-ME) assay. RBT indicated 85.1% (40/47) of positive samples, from which 78.7% (37/47) were confirmed by 2-ME. Immunohistochemistry detected Brucella spp. in 34.0% (16/47) of tissues with bursitis. PCR and/or bacterial isolation demonstrated that 63.8% (30/47) of samples were positive and morphologically compatible with Brucella sp. All colonies suggestive of Brucella sp. were confirmed by PCR. Isolates were further characterized by PCR Multiplex AMOS-ENHANCED, which indicated that the isolates corresponded to biovar 1, 2, 4 (43.33%). This study evidences an association between cervical bursitis and Brucella spp. infection in cattle, and that different biovars of Brucella circulate in bovine herds in Maranhão.
Asunto(s)
Brucella/aislamiento & purificación , Brucelosis Bovina/patología , Bursitis/veterinaria , Animales , Brasil/epidemiología , Brucelosis Bovina/epidemiología , Brucelosis Bovina/microbiología , Bursitis/epidemiología , Bursitis/microbiología , Bursitis/patología , Bovinos , Cuello , ZoonosisRESUMEN
Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão: uma abordagem sorológica, imunohistoquímica, microbiológica e molecular. [Brucella sp. like a bioagent of cervical bursitis in cattle slaughtered in São Luís, Maranhão: a serological approach, immunohistochemistry, and molecular microbiological]. 2012. 82f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) Universidade Estadual do Maranhão, São Luís, 2012. RESUMO A brucelose é uma antropozoonose de evolução preferencialmente crônica, caracterizada pela infecção do sistema fagocítico mononuclear, por bactérias do gênero Brucella. Considerando a hipótese do abate de animais infectados e o seu risco potencial ao homem, a presente pesquisa buscou avaliar a Brucella sp. como bioagente da bursite cervical em bovinos abatidos no Município de São Luís, Maranhão. Foram coletadas amostras de sangue, com e sem E.D.T.A (ácido etilenodiamino tetra-acético), fragmentos de bolsa cervical e linfonodos correspondentes de 47 bovinos abatidos em frigoríficos sob Inspeção Municipal, que apresentaram bursite cervical postmortem. A partir deste material coletado estimou-se a freqüência do bioagente Brucella sp. nas diferentes abordagens diagnósticas: sorologia, histopatologia, imunohistoquímica e PCR. Na sorologia de animais acima de 24 meses, 85,1% das amostras foram reagentes ao teste do AAT, confirmando-se a positividade em 78,7% através dos testes de soroaglutinação lenta e 2-mercaptoetanol. Na histopatologia foi possível observar que a maioria das amostras de bolsa cervical e linfonodos apresentaram infiltrado inflamatório linfohistioplasmocitário, mais comumente associado ao quadro crônico da doença. Todas as amostras de sangue total coletadas foram submetidas a PCR convencional, não sendo verificada a amplificação de produto de DNA compatível com Brucella sp. As 47 amostras coletadas foram submetidas ao isolamento bacteriano, sendo, posteriormente, efetuada a PCR a partir de tecidos (bolsa cervical e linfonodos correspondentes). Nesta PCR, evidenciou-se que 63,8% das amostras apresentaram um amplificado de 223pb, condizentes com o gênero Brucella sp. As amostras nas quais foram confirmadas o gênero Brucella, foram submetidas ao PCR multiplex AMOS ENHANCED, objetivando verificar quais espécies desta bactéria estavam presentes nas amostras analisadas, constatou-se que em 28,0% foram identificadas duas bandas de 498 e 178pb, correspondentes ao biovar 1, 2, 4; em 30,0% das amostras foi identificada somente uma banda de 178pb, correspondente ao biovar 3, 5, 6, 9; 6,0% das amostras foram negativas na PCR multiplex e em 36,0% não houve isolamento de colônias, demonstrando padrões diferenciados entre os amplificados. Os resultados obtidos com a conclusão deste estudo puderam fornecer subsídios para futuras publicações científicas, além de contribuir com dados para o entendimento epidemiológico, isolamento e caracterização das espécies de Brucella sp., que acometem o rebanho bovino maranhense.