RESUMEN

Human matriptase-2 is an enzyme that belongs to the family of type II transmembrane serine proteases. So far there is a limited knowledge regarding its specificity and protein substrate(s). One of the identified natural substrates is hemojuvelin, a protein involved in the control of iron homeostasis. In this work, we describe the synthesis and evaluation of internal quenched substrates using a combinatorial approach. The iterative deconvolution of two libraries to define the specificity of matriptase-2 yielded to the identification of the substrate ABZ-Ile-Arg-Ala-Arg-Ser-Ala-Gly-Tyr(3-NO2)-NH2 with a k(cat)/K(m) value of 4.5 × 10(5) M(-1) × s(-1), i.e. the highest specificity constant reported so far for matriptase-2.

Asunto(s)

Proteínas de la Membrana/química , Simulación del Acoplamiento Molecular , Oligopéptidos/química , Serina Endopeptidasas/química , Secuencia de Aminoácidos , Dominio Catalítico , Células HEK293 , Humanos , Hidrólisis , Cinética , Proteínas de la Membrana/biosíntesis , Proteínas de la Membrana/aislamiento & purificación , Datos de Secuencia Molecular , Oligopéptidos/síntesis química , Biblioteca de Péptidos , Proteínas Recombinantes/biosíntesis , Proteínas Recombinantes/química , Proteínas Recombinantes/aislamiento & purificación , Serina Endopeptidasas/biosíntesis , Serina Endopeptidasas/aislamiento & purificación , Relación Estructura-Actividad , Especificidad por Sustrato