RESUMEN
Epileptic seizures are clinical manifestations of neuronal discharges characterized by hyperexcitability and/or hypersynchrony in the cortex and other subcortical regions. The pilocarpine (PILO) model of epilepsy mimics temporal lobe epilepsy (TLE) in humans. In the present study, we used a more selective approach: microinjection of PILO into the hilus of the dentate gyrus (H-PILO). Our main goal was to evaluate the behavioral and morphological alterations present in this model of TLE. Seventy-six percent of all animals receiving H-PILO injections had continuous seizures called status epilepticus (SE). A typical pattern of evolution of limbic seizures during the SE with a latency of 29.3 ± 16.3 minutes was observed using an analysis of behavioral sequences. During the subsequent 30 days, 71% of all animals exhibited spontaneous recurrent seizures (SRSs) during a daily 8-hour videotaping session. These SRSs had a very conspicuous and characteristic pattern detected by behavioral sequences or neuroethiological analysis. Only the animals that had SE showed positive Neo-Timm staining in the inner molecular layer of the dentate gyrus (sprouting) and reduced cell density in Ammon's horn pyramidal cell subfield CA1. However, no correlation between the intensity of sprouting and the mean number and total number of SRSs was found. Additionally, using Fluoro-Jade staining, we observed neurodegeneration in the hilus and pyramidal cell subfields CA3 and CA1 24 hours after SE. These data indicate that H-PILO is a reliable, selective, efficient, low-mortality model that mimics the acute and chronic behavioral and morphological aspects of TLE.
Asunto(s)
Encéfalo/patología , Hipocampo/patología , Agonistas Muscarínicos/toxicidad , Pilocarpina/toxicidad , Estado Epiléptico , Animales , Axones/patología , Conducta Animal/efectos de los fármacos , Distribución de Chi-Cuadrado , Modelos Animales de Enfermedad , Fluoresceínas , Miembro Anterior/efectos de los fármacos , Miembro Anterior/fisiopatología , Lateralidad Funcional , Hipocampo/efectos de los fármacos , Masculino , Microinyecciones/métodos , Compuestos Orgánicos/metabolismo , Células Piramidales/efectos de los fármacos , Células Piramidales/patología , Ratas , Ratas Wistar , Recurrencia , Estadística como Asunto , Estado Epiléptico/inducido químicamente , Estado Epiléptico/patología , Estado Epiléptico/fisiopatología , Factores de TiempoRESUMEN
The aims of this study were to characterize the spatial distribution of neurodegeneration after status epilepticus (SE) induced by either systemic (S) or intrahippocampal (H) injection of pilocarpine (PILO), two models of temporal lobe epilepsy (TLE), using FluoroJade (FJ) histochemistry, and to evaluate the kinetics of FJ staining in the H-PILO model. Therefore, we measured the severity of behavioral seizures during both types of SE and also evaluated the FJ staining pattern at 12, 24, and 168 h (7days) after the H-PILO insult. We found that the amount of FJ-positive (FJ+) area was greater in SE induced by S-PILO as compared to SE induced by H-PILO. After SE induced by H-PILO, we found more FJ+ cells in the hilus of the dentate gyrus (DG) at 12 h, in CA3 at 24 h, and in CA1 at 168 h. We found also no correlation between seizure severity and the number of FJ+ cells in the hippocampus. Co-localization studies of FJ+ cells with either neuronal-specific nuclear protein (NeuN) or glial fibrillary acidic protein (GFAP) labeling 24 h after H-PILO demonstrated spatially selective neurodegeneration. Double labeling with FJ and parvalbumin (PV) showed both FJ+/PV+ and FJ+/PV- cells in hippocampus and entorhinal cortex, among other areas. The current data indicate that FJ+ areas are differentially distributed in the two TLE models and that these areas are greater in the S-PILO than in the H-PILO model. There is also a selective kinetics of FJ+ cells in the hippocampus after SE induced by H-PILO, with no association with the severity of seizures, probably as a consequence of the extra-hippocampal damage. These data point to SE induced by H-PILO as a low-mortality model of TLE, with regional spatial and temporal patterns of FJ staining.
Asunto(s)
Colorantes Fluorescentes/análisis , Hipocampo/patología , Degeneración Nerviosa/patología , Pilocarpina/toxicidad , Estado Epiléptico/patología , Animales , Fluoresceínas , Hipocampo/química , Hipocampo/efectos de los fármacos , Masculino , Microinyecciones , Degeneración Nerviosa/inducido químicamente , Compuestos Orgánicos/análisis , Pilocarpina/administración & dosificación , Ratas , Ratas Wistar , Estado Epiléptico/inducido químicamente , Estado Epiléptico/complicaciones , Factores de TiempoRESUMEN
Utilizaram-se 440 pintos machos, de uma linhagem de corte, distribuídos ao acaso em 11 tratamentos experimentais com quatro repetiçöes de 10 aves cada, por um período de 17 dias, para determinar a disponibilidade biológica do fósforo (BDP) de sete fontes. Quatro tratamentos (T1, T2, T3, T4) nos quais se utilizou o fosfato bicálcico Ipiranga como padräo, cujo fósforo (P) foi considerado 100 por cento, destinaram-se à obtençäo de uma curva-padräo, relacionando-se o ganho de peso (Y)com teores de P adicionados (X) a uma dieta básica, resultando na equaçäo Y=186,36+905X (R elevado ao quadrado=0,94). Os demais tratamentos corresponderam à adiçäo de 0,20 por cento de P à dieta básica a partir das seguintes fontes: farinha de ossos calcinada (FOC), fosfato supersimples (FSS), fosfato supertriplo (FST), fosfato diamônio (DAP), fosfato monoamônio - (MAP), fosfato Patos de Minas (FPM), fosfato natural de Araxá (FNA) e fosfato semidesfluorizado (FSD). Os valores de BDP de cada fonte, estimados pelo critério do ganho de peso e calculados pelo método da abcissa foram: FSS, 79,2; FST, 103,8; DAP, 138,9; MAP, 105,6; FPM, 67,5; FNA, 67,8 e FSD, 82,8. Os resultados sugerem que devem ser considerados os valores de biodisponibilidade do fósforo dos suplementos empregados na formulaçäo de raçöes de frangos de corte, para efeitos do ajuste do fósforo disponível, e que os fosfatos naturais FPM e FNA, que apresentaram as piores biodisponibilidades, devem ser avaliados cuidadosamente antes de suas inclusöes à dieta
Asunto(s)
Animales , Masculino , Disponibilidad Biológica , Fósforo , Aves de CorralRESUMEN
Avaliou-se o desempenho de frangos de corte de um a 47 dias de idade, suplementados com fósforo disponível de oito fontes elaboradas e duas naturais, cujas biodisponibilidades de fósforo foram previamente determinadas. As fontes naturais promoveram os menores ganhos de peso e consumo de raçäo e mais altos teores de flúor nos ossos. Näo houve diferenças significativas (P>0,05) entre as fontes quanto à conversäo alimentar e à mortalidade, bem como aos teores de cinzas, de cálcio e de fósforo nos ossos. As fontes naturais foram inferiores às elaboradas quanto ao desempenho, principalmente ganho de peso de frangos de corte, provavelmente devido aos seus altos teores de flúor; considerando o fósforo disponível, as fontes de fósforo se equivalem em promover o crescimento e o desempenho em frangos de corte; é necessário considerar o fósforo disponível das fontes de fósforo no cálculo das raçöes de frangos de corte
Asunto(s)
Animales , Alimentación Animal , Disponibilidad Biológica , Pollos/crecimiento & desarrollo , Fósforo DietéticoRESUMEN
Realizaram-se dois experimentos com objetivos de determinar e comparar a biodisponibilidade de fósforo (BDP), em fontes de fósforo (P), através das cinzas ósseas (TCO) de frangos de corte (fêmur) e de leitöes (terceiro e quarto metacarpos), e avaliar a atividade da fosfatase alcalina no soro (AFAS), como meio de determinar a BDP em leitöes, tendo o fosfato bicálcico (FBP) como padräo. No experimento I, utilizaram-se 312 pintos de um dia para determinar as BDP (porcentagem) de nove fontes, calculadas pelo método da abscissa, que foram: fosfato monoamônio (FMA) = 114,7, superfosfato triplo (SFT) = 119,5, fosfato natural Patos de Minas (FPM) = 42,5, farinha de ossos calcinada (FOC) = 77,9, fosfato bicálcico I (FBI) = 99,2, fosfato semidesfluorizado (FSD) = 62,4, fosfato natural de Araxá (FNA) = 57,8, fosfato diamômio (FDA ) = 119,8, superfosfato simples (SFS) = 82,6. No experimento II, utilizaram-se 32 leitöes, avaliando-se a BDP de quatro fontes, cujos valores (porcentagem) foram: FMA = 109,0; SFT = 109,0; FPM = 95,4 e FOC = 100,0. Concluiu-se que a BDP variou entre as fontes de P; valores de BDP obtidos com uma espécie näo se aplicam à outra; a AFAS näo foi proporcional aos níveis de P; houve queda na AFAS, do 21§ para o 34§ dia; a AFAS näo se revelou um método adequado para a determinaçäo da BDP para suínos
Asunto(s)
Animales , Fosfatasa Alcalina , Disponibilidad Biológica , Aves , Fósforo , PorcinosRESUMEN
A new method to detect the adulteration of pasteurised milk with whey is described. The method is based on the determination of casein-bound phosphorus (Pcas) and the protein nitrogen content in milk. By using a mean Pcas content (0.85 g P/100 g casein), a Kjeldahl factor of 6.34 and protein N, the relative casein-N content (casein N/protein N x 100) can be estimated. Over a period of one year the variation in the phosphorus factor of dried skimmed milk samples amounted to 2.9%. In order to calculate the percentage of added whey, a standard curve has been prepared in which the relative casein content is plotted against the corresponding whey percentage. The results of 26 analyses on genuine pasteurised milk (Pcas = 21.7 mg/100 ml; casein N/protein N = 80.9%) and on 25 whey samples were used for the standard curve. In laboratory-made blends of pasteurised milk and cheese whey (5%, 10%, 20% and 30%), the estimated percentage of whey varied between -1.2% and +2.9% from the actual value. The analysis of nine samples from the Brazilian market showed that four samples were clearly adulterated with cheese whey. Sweet and/or acid whey addition will be detected by the proposed method.