RESUMEN

We report here the first amino acid sequence of an anti-Tn monoclonal antibody raised against human breast cancer cells and show that a single chain Fv fragment of this IgM retains the Tn-binding specificity as defined by functional assays with asialo-OSM and membrane extracts from MCF-7 cells. Sequence comparisons and molecular modeling of 83D4 indicate that the antibody combining site displays a cavity-like feature primarily defined by the CDR H1 and H2 loops. This pocket could accommodate a single Tn molecule, thus, suggesting a structural explanation for the predominant expression of a particular VH gene segment in a group of antibodies that recognize tumor-associated antigens arising from an aberrant O-glycosylation.

Asunto(s)

Anticuerpos Monoclonales/inmunología , Anticuerpos Antineoplásicos/inmunología , Antígenos de Carbohidratos Asociados a Tumores/inmunología , Fragmentos de Inmunoglobulinas/inmunología , Inmunoglobulina M/inmunología , Región Variable de Inmunoglobulina/inmunología , Cadenas kappa de Inmunoglobulina/inmunología , Secuencia de Aminoácidos , Animales , Anticuerpos Monoclonales/genética , Anticuerpos Antineoplásicos/genética , Especificidad de Anticuerpos , Antígenos de Carbohidratos Asociados a Tumores/genética , Secuencia de Bases , Neoplasias de la Mama/inmunología , Carcinoma/inmunología , Clonación Molecular , Amplificación de Genes , Humanos , Hibridomas , Fragmentos de Inmunoglobulinas/genética , Inmunoglobulina M/genética , Región Variable de Inmunoglobulina/genética , Cadenas kappa de Inmunoglobulina/genética , Ratones , Modelos Moleculares , Datos de Secuencia Molecular , Proteínas Recombinantes de Fusión , Alineación de Secuencia , Análisis de Secuencia de ADN , Células Tumorales Cultivadas