RESUMEN
Mutations and common polymorphisms in interferon regulatory factor 6 ( IRF6) are associated with both syndromic and nonsyndromic forms of cleft lip/palate (CLP). To date, much of the focus on this transcription factor has been on identifying its direct targets and the gene regulatory network in which it operates. Notably, however, IRF6 is found predominantly in the cytoplasm, with its import into the nucleus tightly regulated like other members of the IRF family. To provide further insight into the role of IRF6 in the pathogenesis of CLP, we sought to identify direct IRF6 protein interactors using a combination of yeast 2-hybrid screens and co-immunoprecipitation assays. Using this approach, we identified NME1 and NME2, well-known regulators of Rho-type GTPases, E-cadherin endocytosis, and epithelial junctional remodeling, as bona fide IRF6 partner proteins. The NME proteins co-localize with IRF6 in the cytoplasm of primary palatal epithelial cells in vivo, and their interaction with IRF6 is significantly enhanced by phosphorylation of key serine residues in the IRF6 C-terminus. Furthermore, CLP associated IRF6 missense mutations disrupt the ability of IRF6 to bind the NME proteins and result in elevated activation of Rac1 and RhoA, compared to wild-type IRF6, when ectopically expressed in 293T epithelial cells. Significantly, we also report the identification of 2 unique missense mutations in the NME proteins in patients with CLP (NME1 R18Q in an IRF6 and GRHL3 mutation-negative patient with van der Woude syndrome and NME2 G71V in a patient with nonsyndromic CLP). Both variants disrupted the ability of the respective proteins to interact with IRF6. The data presented suggest an important role for cytoplasmic IRF6 in regulating the availability or localization of the NME1/2 complex and thus the dynamic behavior of epithelia during lip/palate development.
Asunto(s)
Labio Leporino/genética , Fisura del Paladar/genética , Factores Reguladores del Interferón/genética , Nucleósido Difosfato Quinasas NM23/genética , Animales , Embrión de Pollo , Variación Genética , Humanos , Inmunoprecipitación , Mutación , Fosforilación , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Adherencias Tisulares/genética , Factores de Transcripción/genéticaRESUMEN
Hypericum cordatum, planta com possível atividade medicinal foi analisada no presente estudo quanto a sua propagação in vitro e seus principais compostos secundários em comparação com Hypericum perforatum, espécie medicinal utilizada como antidepressivo. Diante das dificuldades que ocorrem na coleta e sua multiplicação por sementes ou via estacas caulinares, iniciou-se a propagação in vitro tendo como resultados: que a indução e o crescimento de brotações foram estimulados pelo regulador 6-benziladenina (2,0 mg L-1), que houve indução de raízes por ácido indol-butírico (0,5 mg L-1), e que as baixas concentrações de auxinas, ácido 2,4-diclorofenoxiacético, ou ácido naftalenoacético (0,01 a 0,4 mg L-1) induziram a formação de calos sendo uma alternativa viável para a multiplicação desta espécie in vitro. Constatou-se com base nas análises bioquímicas e cromatográficas realizadas nesta fase de desenvolvimento das plantas mantidas em culturas in vitro, que as mesmas não contêm hipericina. No entanto, pode-se atribuir o potencial medicinal de H. cordatum às outras substâncias que também possuem importantes atividades biológicas, tais como a xantona e o ácido clorogênico sintetizados nas glândulas foliares de H. cordatum.
Hypericum cordatum, a plant with possible medicinal activity, was analyzed in this study for its in vitro propagation and main secondary compounds, compared to Hypericum perforatum, a medicinal species used as antidepressant. Considering the difficulties that occur in its collection and multiplication through seeds or stem cuttings, in vitro propagation was started and showed the following results: the induction and the growth of sprouts were stimulated by the plant regulator 6-benzyladenine (2.0 mg L-1), there was root induction by indolebutyric acid (0.5 mg L-1) and the low concentrations of auxins, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid or naphthaleneacetic acid (0.01 to 0.4 mg L-1) induced callus formation, constituting a viable alternative for the in vitro multiplication of this species. Biochemical and chromatographic analyses carried out at this developmental stage of plants kept in in vitro cultures indicated that they do not contain hypericin. However, the medicinal role of H. cordatum can be attributed to other substances that also have important biological activities, such as xanthone and chlorogenic acid, both synthesized in the leaf glands of H. cordatum.
Asunto(s)
Hypericum/crecimiento & desarrollo , Clusiaceae/crecimiento & desarrollo , Reguladores del Crecimiento de las Plantas/análisis , AntidepresivosRESUMEN
Informa que anualmente, a nivel mundial existen más de 300 millones de nuevos casos de Infección de Transmisión Sexual, sin tomar en cuenta al VIH- SIDA, y de estas 100 millones corresponden a jóvenes de 15 a 24 años de edad (1) (2). Afecta a cualquier población como niños, adolescentes, adultos etc., no tiene edad, posición social ni credo. El objetivo principal de este estudio era el de identificar las infecciones de Transmisión Sexual más comunes en un grupo de Adolescentes Panameñas que acudían a la clínica de planificación familiar del Centro de Investigación Humana (CIRH).Se captaron un total de 150 jóvenes, que acudían por atención a la clínica del adolescente del Centro de Investigación en Reproducción Humana del ( CIRH )de Panamá, durante un período de 6meses del año 2002. A todas se les tomaron muestras de sangre para realizar las pruebas de Clamidia, Herpes tipo2, Hepatitis B, Sífilis y el VIH. De igual forma se les extrajo muestras del exudado vaginal para frotis y cultivo por GC, suspensión por tricomonas, muestras endocervicales para papanicolau e IVPH y Clamydia por PCR.
Asunto(s)
Enfermedades de Transmisión Sexual , PanamáRESUMEN
Se analizaron 150 muestras de jóvenes de 13 a 24 años usuarias de la Clínica de Anticoncepción del Centro de Investigación Reproducción Humana. Se tomaron muestras de secreción endocervical mediante citobrush. Una parte se le realizó Papanicolau y otra parte se utilizó para el PCR. El ADN fue extraído con el kit de extracción de ADN de Promega. Para el diagnóstico de VPH se utilizaron cebadores consensus MY-009 y MY-011. La tipificación se logró mediante los cebadores HPV1015 y HPV 1016 para el tipo 16 y HPV-1017 y HPV1018 para HPV 18, reactivos Maxim Biotech. La PCR se realizó con MasterMix de Promega.El total de muestras positivas por Virus del Papiloma Humano fue 71 (47.3%). Las muestras positivas por Virus del Papiloma Humano (VPH) por PCR consensus fue de 68 (45.3%) VPH vs solo el 20 (13.3%) con papanicolau. Para el HPV-18 solo se encontraron 4 casos positivos (2.3%) y ninguno para el HPV-16. Las muestras que no fueron diagnosticadas por Papanicolau fueron 51 lo que representa un 71.8% de falsos negativos por Papanicolau. Los protocolos de PCR fue de 25 uL para PCR consensus.
Asunto(s)
Adolescente , Papiloma , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Frotis VaginalRESUMEN
El presente es un estudio prospectivo, para evaluar la técnica de anestesia general balanceada con Tramadol Clorhidrato al 0.1 por ciento vía endovenosa por infusión más Halotano al 1 por ciento vía inhalatoria; realizado en el Departamento de Anestesiología y Reanimación del Hospital General Nacional Dos de Mayo entre los meses de Agosto a Diciembre de 1993. El trabajo incluyó 50 pacientes entre los 16 y 70 años, previamente seleccionados, donde 27 (54 por ciento) fueron de sexo masculino y 23 (46 por ciento) de sexo femenino; los cuales fueron sometidos a diferentes tipos de cirugía, entre ellos: Cirugía Abdominal: 29 (58 por ciento), Traumatológica: 7 (14 por ciento), Ginecológica: 5 (10 por ciento), Otorrinolaringológica: 1 (2 por ciento). La mayoría fueron de cirugía electiva y algunos de cirugía de emergencia. Estos pacientes estaban incluidos dentro de ASA I y II. Se observó que las variaciones de funciones vitales (PAS, PAD,PAM Y FC) no fueron significativos tanto entre los basales, inducción y durante el transoperatorio. El tiempo operatorio varió entre menos de 1 hora hasta las 5 horas. Un gran porcentaje despertó entre los 30 y los 60 minutos post-operatorio, con un despertar de buena calidad con sedación óptima y analgesia residual importante, concluyendo que el 100 por ciento de casos presentaron analgesia residual de moderada a intensa por lo menos hasta cerca de las 6 horas post-operatorios. Aunque no se encontró una relación causa-efecto específica entre los efectos secundarios y la técnica tanto quirúrgica como anestésica, se presentaron náuseas en 13 pacientes, 5 llegaron al vómito, diaforesis: 7, retención uribnaria: 3, bradicardia: 1, depresión respiratoria: 1. Efectos secundarios de escasa incidencia clínica y reversibles en todos los casos. Debemos resaltar que estos efectos secundarios se presentaron de manera independiente de la dosis de Tramadol aplicados. Podemos concluir que ésta técnica anestésica, produce un adecuado balance analgésico-quirúrgico que hace llevadera la cirugía, además de continuar con un adecuado despertar y analgesia residual importante.