RESUMEN

Neospora caninum is an apicomplexan protozoan parasite that is one of the most important infectious causes of abortion in both dairy and beef cattle in many countries. The objectives of this longitudinal study were to determine the prevalence, rates of vertical and horizontal transmission of N. caninum and hazard for culling of N. caninum-seropositive animals in three Brazilian dairy herds. Blood samples from all animals were collected nine times at each of the three farms over a two-year period. Serum was tested for antibodies against N. caninum using the indirect fluorescent antibody test with a cutoff value of 1:100. The percentage of N. caninum-positive samples at each sampling time ranged at Farm I from 3.32% to 11.71%, at Farm II from 3.90% to 22.06% and at Farm III from 3.90% to 22.06%. The number of positive serological reactions varied in relation to the number of repeated samples taken from individual animals at each farm. In all herds, there was a high degree (P<0.05) of association between the N. caninum serological status of dams and daughters. The seropositive conversion rate was estimated as 0.37%, 3.00% and 6.94% per 100 cow-years at Farms I, II and III, respectively. The seronegative conversion rate was estimated as 31.58% and 11.11% per 100 cow-years at Farms I and III, respectively. In all herds, there was no difference (P>0.05) in the culling rate between the cattle that were seropositive cattle and seronegative for N. caninum infection. The results from this study confirm the importance of vertical transmission in the epidemiology of N. caninum. Although a few positive seroconversions indicated horizontal transmission, it does not appear to be the major route of infection for N. caninum.

Asunto(s)

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Neosporosis is one of the most important causes of abortion in both dairy and beef cattle in many countries. The objective of this study was to quantify the effect of Neospora caninum seropositivity on reproductive parameters in three dairy herds and the dynamics of anti-N. caninum antibodies during gestation in naturally infected cows. Blood samples from all animals were collected nine times on each of the three farms over a two-year period. Serum was tested for antibodies against N. caninum using the indirect fluorescent antibody test (IFAT) with a cutoff value of 1:100. The relative risk of abortion between N. caninum-seropositive and seronegative cows varied between samplings at all farms, but there was only a statistically significant difference (P<0.05) on Farm III in samplings 4, 7 and 8, with positive animals presenting higher risk of abortion. No significant differences (P>0.05) were found regarding gestational age at abortion, repeated abortion, number of inseminations for conception and calving intervals, between seropositive and seronegative cows on all the farms.

Neosporose é uma das causas mais importantes de abortamento em bovinos leiteiro e de corte em muitos países. O objetivo desse estudo foi quantificar o efeito da soropositividade para Neospora caninum nos parâmetros reprodutivos em três rebanhos leiteiros e a dinâmica dos anticorpos anti-N. caninum durante a gestação em vacas infectadas naturalmente. Amostras de sangue de todos os animais foram colhidas nove vezes em cada uma das três fazendas dentro do período de dois anos. O soro foi testado para anticorpos contra N. caninum usando o teste de reação imunofluorescência indireta (RIFI) com valor de corte de 1:100. O risco relativo de abortamento entre vacas N. caninum-soropositivas e soronegativas variou entre as amostragens em todas as fazendas, mas, houve somente diferença estatisticamente significativa (P<0,05) na Fazenda III na amostragem 4, 7 e 8, com os animais soropositivos apresentando maiores risco de abortamento. Nenhuma diferença significativa (P>0,05) foi encontrada em consideração a idade gestacional no abortamento, abortamentos repetidos, número de inseminações por concepção e intervalo entre partos entre vacas soropositivas e soronegativas em todas as fazendas.

Asunto(s)

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Neosporosis is one of the most important causes of abortion in both dairy and beef cattle in many countries. The objective of this study was to quantify the effect of Neospora caninum seropositivity on reproductive parameters in three dairy herds and the dynamics of anti-N. caninum antibodies during gestation in naturally infected cows. Blood samples from all animals were collected nine times on each of the three farms over a two-year period. Serum was tested for antibodies against N. caninum using the indirect fluorescent antibody test (IFAT) with a cutoff value of 1:100. The relative risk of abortion between N. caninum-seropositive and seronegative cows varied between samplings at all farms, but there was only a statistically significant difference (P<0.05) on Farm III in samplings 4, 7 and 8, with positive animals presenting higher risk of abortion. No significant differences (P>0.05) were found regarding gestational age at abortion, repeated abortion, number of inseminations for conception and calving intervals, between seropositive and seronegative cows on all the farms.(AU)

Neosporose é uma das causas mais importantes de abortamento em bovinos leiteiro e de corte em muitos países. O objetivo desse estudo foi quantificar o efeito da soropositividade para Neospora caninum nos parâmetros reprodutivos em três rebanhos leiteiros e a dinâmica dos anticorpos anti-N. caninum durante a gestação em vacas infectadas naturalmente. Amostras de sangue de todos os animais foram colhidas nove vezes em cada uma das três fazendas dentro do período de dois anos. O soro foi testado para anticorpos contra N. caninum usando o teste de reação imunofluorescência indireta (RIFI) com valor de corte de 1:100. O risco relativo de abortamento entre vacas N. caninum-soropositivas e soronegativas variou entre as amostragens em todas as fazendas, mas, houve somente diferença estatisticamente significativa (P<0,05) na Fazenda III na amostragem 4, 7 e 8, com os animais soropositivos apresentando maiores risco de abortamento. Nenhuma diferença significativa (P>0,05) foi encontrada em consideração a idade gestacional no abortamento, abortamentos repetidos, número de inseminações por concepção e intervalo entre partos entre vacas soropositivas e soronegativas em todas as fazendas.(AU)

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O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica e parasitológica de salada de alface servida em restaurantes self-services no município de Taubaté-SP. Na estação seca duas amostras (14,3 por cento) apresentaram coliformes fecais em níveis superiores ao permitido pela Vigilância Sanitária (10² NMP/g), sendo que na estação úmida seis amostras (42,9 por cento) foram positivas. A presença de Escherichia coli foi confirmada em três amostras (21,43 por cento) colhidas na estação seca e em cinco (35,7 por cento) na úmida. As enterobactérias mais freqüentes, nas duas estações, foram Enterobacter aglomerans e Klebsiella pneumoniae, respectivamente, 57,1 por cento e 50,0 por cento na seca e 71,4 por cento e 85,7 por cento, na úmida. Cryptosporidium spp. foi o parasito mais freqüente, sendo encontrado em quatro amostras (28,57 por cento) na estação úmida e em uma (7,1 por cento) na seca. Grande percentual dos restaurantes avaliados não oferecia alfaces com condições higiênicas sanitárias adequadas, sendo que a contaminação foi maior na estação úmida, podendo ser conseqüência do maior índice pluviométrico, o que torna um ambiente adequado para proliferação de patógenos, ou até mesmo pelo despreparo dos manipuladores às normas para o preparo dos alimentos.(AU)

The objective of this work was to evaluate the microbiological and parasitological quality of lettuce served self-services in restaurants. In dry station two samples (14.3%) presented fecal coliforms in levels superior to 102 NMP/g, by the way in the humid station six samples (42.9%) had been positive. It was confirmed Escherichia coli in three samples (21.4%) in the dry station and five (35.7%) in the humid one. The species of the family Enterobacteriaceae more frequent in both stations, was Enterobacter aglommerans and Klebsiella pneumoniae, respectively, 57.1% and 50.0% in dry and 71.4% and 85.7%, in the humid one. The most frequent protozoa was Cryptosporidium spp., found in four samples (28.6%) in the humid station and in one (7.1%) in dry one. Great percentage of the evaluated restaurants did not offer lettuces with adjusted sanitary hygienic conditions, the contamination was higher in the humid station, probable consequence of the high pluviometric index, that becomes an environment adjusted for proliferation of pathogens, or even though for the unpreparedness of the manipulators to the norms for the preparation of foods. (AU)

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O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica e parasitológica de salada de alface servida em restaurantes self-services no município de Taubaté-SP. Na estação seca duas amostras (14,3 por cento) apresentaram coliformes fecais em níveis superiores ao permitido pela Vigilância Sanitária (10² NMP/g), sendo que na estação úmida seis amostras (42,9 por cento) foram positivas. A presença de Escherichia coli foi confirmada em três amostras (21,43 por cento) colhidas na estação seca e em cinco (35,7 por cento) na úmida. As enterobactérias mais freqüentes, nas duas estações, foram Enterobacter aglomerans e Klebsiella pneumoniae, respectivamente, 57,1 por cento e 50,0 por cento na seca e 71,4 por cento e 85,7 por cento, na úmida. Cryptosporidium spp. foi o parasito mais freqüente, sendo encontrado em quatro amostras (28,57 por cento) na estação úmida e em uma (7,1 por cento) na seca. Grande percentual dos restaurantes avaliados não oferecia alfaces com condições higiênicas sanitárias adequadas, sendo que a contaminação foi maior na estação úmida, podendo ser conseqüência do maior índice pluviométrico, o que torna um ambiente adequado para proliferação de patógenos, ou até mesmo pelo despreparo dos manipuladores às normas para o preparo dos alimentos.

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Cryptosporidium isolates identified in fourteen stool samples, collected from five HIV-infected patients and nine immunocompetent children, living in the State of São Paulo, Brazil, were submitted to a molecular analysis using a nested PCR followed of restriction fragment length polymorphism (RFLP), for genetic characterization. The analysis was based on digestion with RsaI restriction enzyme of a DNA fragment amplified from the Cryptosporidium oocyst wall protein (COWP) gene. Based on this analysis, four samples were identified as Cryptosporidium parvum, eight as Cryptosporidium hominis and two presented a profile that corresponded to Cryptosporidium meleagridis when compared to the standards used in the analysis. The use of molecular methods can be helpful to identify source of infections and risk factors related to Cryptosporidium infection in our communities.

Asunto(s)

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Cryptosporidium isolates identified in fourteen stool samples, collected from five HIV-infected patients and nine immunocompetent children, living in the Sate of São Paulo, Brazil, were submitted to a molecular analysis using a nested PCR followed of restriction fragment length polymorphism (RFLP), for genetic characterization. The analysis was based on digestion with RsaI restriction enzyme of a DNA fragment amplified from the Cryptosporidium oocyst wall protein (COWP) gene. Based on this analysis, four samples were identified as Cryptosporidium parvum, eight as Cryptosporidium hominis and two presented a profile that correspondedto Cryptosporidium meleagridis when compared to the standards used in the analysis. The use of molecular methods can be helpful to identify source of infections and risk factors related to Cryptosporidium infection in our communities.

Isolados de Cryptosporidium identificados em quatorze amostras de fezes, coletadas de cinco pacientes com infecção por HIV e de nove crianças imunocompetentes, residentes no estado de São Paulo, Brasil, foram submetidos a análise molecular por Nested-PCR, seguido da caracterização genética por polimorfismo do tamanho do fragmento de restrição (RFLP). A análise foi baseada na digestão, com a enzima de restrição RsaI, de um fragmento de DNA amplificado do gene que codifica a proteína de parede do oocisto de Cryptosporidium (COWP). Baseado nesta análise, quando comparadas aos padrões utilizados, quatro amostras foram identificadas como Cryptosporidium parvum, oito como Cryptosporidium hominis e duas apresentaram um perfil correspondente ao de Cryptosporidium meleagridis. O uso de métodos moleculares pode ser útil para identificar a fonte das infecções e os fatores de risco relacionados à infecção por Cryptosporidium em nossas comunidades.

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Amostras fecais de indivíduos portadores de HIV, e com Aids, foram submetidas ao diagnóstico laboratorial de criptosporidiose. Do total de 29 amostras, 15 apresentaram oocistos de Cryptosporidium sp no exame parasitológico, 13 foram reativas em ELISA para detecção de coproantígenos e em 16 foram obtidos produtos de amplificação por Nested-PCR. Foi realizada caracterização genotípica em cinco destes produtos amplificados, por meio de PCR-RFLP com a enzima de restrição AfaI (RsaI). Dois isolados foram identificados como Cryptosporidium hominis, um como Cryptosporidium parvum e dois apresentaram perfil eletroforético correspondente a Cryptosporidium meleagridis. Esses achados trazem evidências de que diferentes espécies de Cryptosporidium circulam no ambiente, traduzindo-se em risco tanto para humanos quanto para outros animais.

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A criptosporidiose é causada por protozoários do gênero Cryptosporidium. A doença se caracteriza por diarréia aguda no homem e em outros animais. O diagnóstico laboratorial é feito pela detecção do parasito por métodos parasitológicos, imunológicos ou moleculares. Amostras fecais de 29 pacientes portadores de HIV e com AIDS analisadas pelos métodos parasitológico (Kinyoun) e imunológico (ELISA) foram submetidas ao método molecular (Nested-PCR). Destas, 15 amostras foram positivas para Cryptosporidium sp no exame parasitológico e 14 negativos para Cryptosporidium, mas positivos para outras espécies parasitárias ou bacilos álcool-acido-resistentes. Pela Nested-PCR foram encontradas 16 amostras positivas, e destas, 11 apresentaram resultados concordantes com o exame parasitológico e cinco não. Essas cinco amostras discordantes foram também negativas pelo ELISA. Das 15 amostras positivas pelo exame parasitológico, duas foram negativas pelo Nested-PCR e por ELISA. Os métodos moleculares podem-se constituir em importante ferramenta diagnóstica nos casos com suspeita clínica de criptosporidiose nos estudos epidemiológicos, permitindo a caracterização genotípica do parasito e auxiliando na investigação das rotas de transmissão. As discordâncias observadas entre os diferentes métodos precisam ser mais bem investigadas

Asunto(s)

RESUMEN

Objetivou-se, com o presente estudo, verificar a ocorrência de Cryptosporidium spp entre crianças do município de Taubaté-SP e realizar a genotipagem de isolados clínicos do parasito. Foram selecionadas 13 creches municipais, que atendiam crianças de 4 a 72 meses de idade, realizando-se implantação de um programa para busca ativa de casos de diarréia, com acompanhamento da população durante o ano de 2002. Para se conhecer o perfil coproparasitológico, realizou-se estudo tranversal em quatro das 13 creches selecionadas. Foram examinadas 483 amostras fecais processadas pelo método de concentração em formalina-acetato de etila e, para a visualização de oocistos, esfregaços fecais foram corados pelo método de Kinyoun...

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