RESUMEN

Directed sortase A evolution yielded the variants R159G and D165Q/D186G/K196V with increased resistance (2.2-fold) and catalytic efficiency (6.3-fold) in 45% (v/v) dimethylsulfoxide. Interestingly, D165Q/D186G/K196V also showed an up to 4.7-fold increased activity for the conjugation of hydrophobic peptides/amines in co-solvents. MD simulations revealed that conformational mobilities are important for the gained resistance.

Asunto(s)

Aminoaciltransferasas/química , Proteínas Bacterianas/química , Cisteína Endopeptidasas/química , Péptidos/química , Solventes/química , Secuencia de Aminoácidos , Aminoaciltransferasas/genética , Proteínas Bacterianas/genética , Catálisis , Cisteína Endopeptidasas/genética , Dimetilsulfóxido/química , Dimetilformamida/química , Evolución Molecular Dirigida , Etanol/química , Metanol/química , Simulación de Dinámica Molecular , Mutagénesis Sitio-Dirigida , Mutación , Péptidos/síntesis química , Ingeniería de Proteínas , Staphylococcus aureus/enzimología , Agua/química