RESUMEN
CONTEXT: Anti-Müllerian hormone (AMH) is produced by the granulosa cells (GCs) of growing follicles and inhibits follicular development. OBJECTIVE: This study aimed to investigate the regulation of the AMH-specific type 2 receptor (AMHR2) gene expression in GCs by bone morphogenetic protein (BMP)15, BMP4 and growth differentiation factor (GDF)9. DESIGN, SETTING, AND PATIENTS: Their effects on AMHR2 and AMH mRNAs were studied in luteinized human GCs and in ovine GCs (oGCs) from small antral follicles. The effects of BMPs on human AMHR2 and AMH promoter reporter activities were analyzed in transfected oGCs. The in vivo effect of BMP15 on GCs AMHR2 and AMH expression was investigated by using Lacaune and Rasa Aragonesa hyperprolific ewes carrying loss-of-function mutations in BMP15. MAIN OUTCOME MEASURES: mRNAs were quantified by real-time RT-PCR. Promoter reporter constructs activities were quantified by the measurement of their luciferase activity. RESULTS: BMP15 and BMP4 enhanced AMHR2 and AMH expression in human GCs and in oGCs, whereas GDF9 had no effect. In oGCs, GDF9 increased BMP15 effect on AMH expression. Consistent with these results, BMP15 and BMP4, but not GDF9, enhanced AMHR2 promoter activity in oGCs, whereas GDF9 increased BMP15 effect on AMH promoter activity. Moreover, oGCs from both BMP15 mutant ewes had reduced AMHR2 mRNA levels but unchanged AMH expression compared with wild-type ewes. CONCLUSIONS: Altogether, these results suggest that the mechanisms of action of BMP15 on AMHR2 and AMH expression are different, and that by stimulating AMHR2 and AMH expression in GCs BMP15 enhances AMH inhibitory actions in GCs.
Asunto(s)
Proteína Morfogenética Ósea 15/farmacología , Regulación de la Expresión Génica/efectos de los fármacos , Células de la Granulosa/efectos de los fármacos , Receptores de Péptidos/metabolismo , Receptores de Factores de Crecimiento Transformadores beta/metabolismo , Regulación hacia Arriba/efectos de los fármacos , Adulto , Animales , Proteína Morfogenética Ósea 4/farmacología , Femenino , Células de la Granulosa/metabolismo , Factor 9 de Diferenciación de Crecimiento/farmacología , Humanos , Folículo Ovárico/efectos de los fármacos , Folículo Ovárico/metabolismo , Regiones Promotoras Genéticas/efectos de los fármacos , Receptores de Péptidos/genética , Receptores de Factores de Crecimiento Transformadores beta/genética , Ovinos , Adulto JovenRESUMEN
Para estudiar la supervivencia de embriones transferidos a receptoras sincronizadas con FGA y PMSG, tratadas con hormonas de crecimiento porcina (GHp) al retiro de las esponjas, se realizaron dos experimentos sobre ovejas de la raza Rasa Aragonesa. El experimento 1 utilizó 12 ovejas donantes para transferir un embrión viable a receptoras tratadas (R1; n=29) o no tratadas (R2; n=28) con GHp. La tasa de ovulación (TO) y los niveles de progesterona (P4) resultaron más altos (P <0.01) que las R2. Este último se relacionó directamente con la aplicación directamente con la aplicación exógena de la GHp, mostrando una alta correlación (P < 0.01) entre la concentración de P4 del día 4 y la del día 17 posfecundación, sin diferencias de fertilidad entre tratamientos. En el experimento 2, con 14 ovejas donantes se obtuvieron 95 embriones viables de 2 días, de edad transfiriendo únicamente 68 (8-10 embriones por grupo) a 4 receptoras tratadas con GHp (R1) y a 4 no tratadas (R2). Estos mismos embriones recuperados tres día después a nivel del útero, fueron valorados morfológicamente. Se observó un aumento de la TO (P < 0.05) de las ovejas receptoras tratadas con GHp (R1). La recuperación de embriones fue mayor en las ovejas tratadas con GHp, con una tendencia a una mayor calidad de los embriones (P < 0.2). En conclusión: a) En ovejas receptoras tratadas con FGA y PMSG, la aplicación de GH produce un aumento de la TO y concentración plasmática de P4, cuatro días después de retirar el progestágeno, b) la fertilidad de embriones transferidos no se modifica si se trata con GH a las ovejas receptoras